【摘要】：目的制備高含量細(xì)胞因子的血小板裂解液(PL)。方法采用反復(fù)凍融法[-80℃~37℃凍融3次(凍24 h/次)]和超聲法(285 W,每次超聲處理5 s停止5 s,共10次)處理10份單采血小板制劑(30 m L/份),ELISA法對細(xì)胞因子,血小板衍生長因子(PDGF)-AA、PDGF-AB、PDGF-BB,轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1),血管內(nèi)皮生長因子165(VEGF165)檢測,同時將2種方法制備的PL按10%比例加入常規(guī)培養(yǎng)基DMEM/F12培養(yǎng)第5代人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞,觀察傳至第7代細(xì)胞增殖情況,并與FBS液培養(yǎng)(組)比較。結(jié)果血小板保存3 d后制備成的PL各因子含量均升高,0 d漿與3 d漿相比,PDGF-AA(ng/m L)為0.071±0.024 vs 2.494±0.326,PDGF-AB(pg/m L)為36.079±15.54 vs 5 866.572±859.31,PDGF-BB(pg/m L)為33.258±21.23 vs 641.69±80.58;VEGF165(pg/m L)為26.661±5.42 vs 122.652±10.59;TGF-β1(pg/m L)為55.556±6.16 vs 3 930.022±827.68(P0.05或0.01)。超聲法可釋放更高含量的細(xì)胞因子,3 d反復(fù)凍融組與3 d超聲組比較,PDGF-AA(ng/m L)為0.095±0.025 vs 1.28±0.236,PDGF-AB(pg/m L)為12 424.746±3 738.03 vs 19 610.987±10 430.26;PDGF-BB(pg/m L)為5 429.184±1 824.53 vs8 397.039±611.93;VEGF165(pg/m L)為128.379±46.69 vs 374.552±32.48;TGF-β1(pg/m L)為8 820.789±1 755.45 vs 14 686.780±7 164.89(P0.05或0.01)。結(jié)論反復(fù)凍融法和超聲法均能有效釋放血小板內(nèi)的細(xì)胞因子;超聲法處理血小板能釋放更高含量的細(xì)胞因子,可替代FBS用于細(xì)胞培養(yǎng)。
[Abstract]:Objective to prepare platelet lysate (PL). With high levels of cytokines. Methods repeated freezing and thawing methods [-80 鈩，

本文編號：2174281