外周血液樣本抗凝劑類型、保存時間和溫度對CIK細胞培養(yǎng)的影響
發(fā)布時間:2018-05-25 15:04
本文選題:細胞因子誘導(dǎo)的殺傷細胞 + 抗凝劑; 參考:《細胞與分子免疫學(xué)雜志》2016年03期
【摘要】:目的探討外周血液樣本抗凝劑類型、保存時間和保存溫度對細胞因子誘導(dǎo)的殺傷(CIK)細胞培養(yǎng)的影響,為自體免疫細胞治療技術(shù)的外周血保存標準化提供實驗依據(jù)。方法將抽取的4份60 m L外周血樣本分別應(yīng)用肝素鈉、細胞保存液(枸櫞酸鈉)和EDTA抗凝劑抗凝,并分別存放于4、22、30℃的環(huán)境中,儲存0、4、8、24 h,應(yīng)用正交實驗設(shè)計優(yōu)選為12組,然后分離出單個核細胞分別誘導(dǎo)培養(yǎng)成CIK細胞,對比12組CIK細胞增殖效率及γ干擾素(IFN-γ)分泌量的變化。結(jié)果在CIK細胞培養(yǎng)過程中,EDTA組CIK細胞增殖不明顯,肝素鈉組和血液保存液組CIK細胞增殖明顯,且肝素鈉優(yōu)于血液保存液;血液保存時間對CIK細胞培養(yǎng)影響不明顯,但保存時間越長,細胞增殖效率越差,保存時間超過8 h的CIK細胞,其增殖效率在第16天以后明顯降低。對培養(yǎng)時間在16 d內(nèi)的CIK細胞,血液保存溫度影響不顯著,但CIK細胞培養(yǎng)16 d之后,22℃保存條件下,CIK細胞增殖效率最高,4℃次之,30℃最差。結(jié)論肝素鈉和血液保存液均可用于CIK細胞培養(yǎng)的血液抗凝;保存時間在24 h內(nèi),溫度在4℃~30℃之間保存的血液,均可用于CIK細胞培養(yǎng)。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of anticoagulant type, preservation time and preservation temperature on cytokine induced cytotoxicity (CIK) cell culture in peripheral blood samples, and to provide experimental evidence for the standardization of peripheral blood preservation in autologous immune cell therapy. Methods four samples of 60 mL peripheral blood were collected and treated with sodium heparin, sodium citrate (sodium citrate) and anticoagulant EDTA, respectively, and stored at 40 鈩,
本文編號:1933622
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