本文選題：鼠諾如病毒MNV　切入點：實時熒光定量PCR　出處：《中國比較醫(yī)學雜志》2016年12期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的建立小鼠諾如病毒(murine norovirus,MNV)實時熒光定量PCR檢測方法,為建立MNV規(guī)范化檢測方法提供依據(jù)。方法根據(jù)NCBI公布的60個MNV病毒株核酸序列設計特異性引物,構建標準陽性質(zhì)控品,建立MNV實時熒光定量PCR方法,并進行特異性、靈敏度、重復性及穩(wěn)定性評價。用該方法對766只送檢小鼠的盲腸內(nèi)容物樣品進行檢測,初步了解北京地區(qū)實驗小鼠MNV感染狀況。結果成功建立MNV實時熒光定量PCR檢測方法,該方法特異性好,與同種屬人類諾如病毒(Hu No Vs)、貓杯狀病毒(FCV)均無交叉反應,檢測靈敏度可達101copies/μL。批內(nèi)及批間CT值變異系數(shù)均小于2%。應用該方法在766份小鼠盲腸內(nèi)容物樣品中檢出301份MNV核酸陽性樣品,陽性率39.3%。結論建立的MNV實時熒光定量PCR檢測方法特異性好,靈敏度高,重復性好,可以用于MNV的快速定量檢測。
[Abstract]:Objective to establish a real-time fluorescent quantitative PCR method for the detection of murine norovirusus of mouse norovirus.Methods according to the nucleic acid sequences of 60 MNV virus strains published by NCBI, specific primers were designed and the standard positive quality control products were constructed. MNV real-time fluorescence quantitative PCR method was established to evaluate the specificity, sensitivity, reproducibility and stability of cecum contents in 766 mice. Results the real-time fluorescence quantitative PCR assay for the detection of MNV was successfully established. The method was specific and had no cross reaction with Hu No VsSN of the same species and calicivirus of cat. The sensitivity of detection was 101 copias / 渭 L. the coefficient of variation of CT values in and between batches was less than 2. 301 MNV nucleic acid positive samples were detected in 766 mouse caecum contents by this method. Conclusion the established MNV real-time fluorescent quantitative PCR method has good specificity, high sensitivity and good reproducibility, and can be used for rapid quantitative detection of MNV.
【作者單位】： 中國食品藥品檢定研究院實驗動物資源研究所;
【基金】：國家科技支撐課題(2013BAK11B01)
【分類號】：R440

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