本文關(guān)鍵詞： 氯霉素 檢測(cè) 膠體金免疫層析技術(shù)　出處：《中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院》2015年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

【摘要】：氯霉素曾作為廣譜抗菌素應(yīng)用于畜牧業(yè)和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)，由于其嚴(yán)重的毒副作用而被美國(guó)FDA、歐盟、中國(guó)等相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定為不得檢出。因其穩(wěn)定的抗菌性好、價(jià)格低廉，違法添加的現(xiàn)象屢見(jiàn)不鮮。膠體金技術(shù)是利用抗原抗體的特異性結(jié)合，放大反應(yīng)結(jié)果，使結(jié)果通過(guò)直接觀察即可判定的檢測(cè)技術(shù)。 通過(guò)對(duì)膠體金免疫層析法制備及性能，超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀的驗(yàn)證等進(jìn)行研究。主要研究結(jié)果如下： 1、確定以檸檬酸三鈉為還原劑，制備出直徑約為20nm的膠體金顆粒。用氯霉素多抗進(jìn)行標(biāo)記，最佳標(biāo)記量為300μg/mL。 2、成功研制出氯霉素膠體金免疫層析試紙條，優(yōu)化工藝條件，選擇Millipore135s的硝酸纖維素膜為反應(yīng)載體，用以0.5%吐溫的磷酸鹽緩沖液處理的全血濾膜為樣品墊，使本試紙條的靈敏度達(dá)到1ppb。 3、確定了試紙條檢測(cè)生牛乳、蜂蜜和雞蛋的檢測(cè)限分別是2ng/mL，，5ng/g，3ng/g，并用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀驗(yàn)證了試紙條的測(cè)定結(jié)果，達(dá)到了用一種試紙條檢測(cè)不同種類(lèi)樣品的研究目的。
[Abstract]:Chloramphenicol has been used in animal husbandry and aquaculture as a broad-spectrum antibiotic, and has been banned from detection in the FDAs, EU, China and other related standards because of its serious toxic side effects. Colloidal gold technique is a kind of detection technique which can be determined by direct observation by using the specific binding of antigen and antibody and amplifying the reaction result. The preparation and properties of colloidal gold immunochromatography and the verification of ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometer were studied. The main results are as follows:. 1. The colloidal gold particles with diameter of 20 nm were prepared with trisodium citrate as reducing agent, and the best labeling amount was 300 渭 g / mL with chloramphenicol polyclonal antibody. 2. The test strip of chloramphenicol colloidal gold immunochromatography was successfully prepared. The optimum technological conditions were optimized. The nitrocellulose membrane of Millipore135s was selected as the reaction carrier, and the whole blood filter membrane treated with 0.5% tween phosphate buffer was used as the sample pad. The sensitivity of the test strip is 1 ppb. 3. The detection limits of milk, honey and egg were determined to be 2ng / mLL ~ 5ng / g / g respectively. The results were verified by ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometer, and the purpose of detecting different kinds of samples with a kind of test strip was achieved.
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R446.6

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1533784