本文關(guān)鍵詞： 氯霉素 檢測 膠體金免疫層析技術(shù)　出處：《中國農(nóng)業(yè)科學院》2015年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：氯霉素曾作為廣譜抗菌素應用于畜牧業(yè)和水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)，由于其嚴重的毒副作用而被美國FDA、歐盟、中國等相關(guān)標準規(guī)定為不得檢出。因其穩(wěn)定的抗菌性好、價格低廉，違法添加的現(xiàn)象屢見不鮮。膠體金技術(shù)是利用抗原抗體的特異性結(jié)合，放大反應結(jié)果，使結(jié)果通過直接觀察即可判定的檢測技術(shù)。 通過對膠體金免疫層析法制備及性能，超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀的驗證等進行研究。主要研究結(jié)果如下： 1、確定以檸檬酸三鈉為還原劑，制備出直徑約為20nm的膠體金顆粒。用氯霉素多抗進行標記，最佳標記量為300μg/mL。 2、成功研制出氯霉素膠體金免疫層析試紙條，優(yōu)化工藝條件，選擇Millipore135s的硝酸纖維素膜為反應載體，用以0.5%吐溫的磷酸鹽緩沖液處理的全血濾膜為樣品墊，使本試紙條的靈敏度達到1ppb。 3、確定了試紙條檢測生牛乳、蜂蜜和雞蛋的檢測限分別是2ng/mL，，5ng/g，3ng/g，并用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜儀驗證了試紙條的測定結(jié)果，達到了用一種試紙條檢測不同種類樣品的研究目的。
[Abstract]:Chloramphenicol has been used in animal husbandry and aquaculture as a broad-spectrum antibiotic, and has been banned from detection in the FDAs, EU, China and other related standards because of its serious toxic side effects. Colloidal gold technique is a kind of detection technique which can be determined by direct observation by using the specific binding of antigen and antibody and amplifying the reaction result. The preparation and properties of colloidal gold immunochromatography and the verification of ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometer were studied. The main results are as follows:. 1. The colloidal gold particles with diameter of 20 nm were prepared with trisodium citrate as reducing agent, and the best labeling amount was 300 渭 g / mL with chloramphenicol polyclonal antibody. 2. The test strip of chloramphenicol colloidal gold immunochromatography was successfully prepared. The optimum technological conditions were optimized. The nitrocellulose membrane of Millipore135s was selected as the reaction carrier, and the whole blood filter membrane treated with 0.5% tween phosphate buffer was used as the sample pad. The sensitivity of the test strip is 1 ppb. 3. The detection limits of milk, honey and egg were determined to be 2ng / mLL ~ 5ng / g / g respectively. The results were verified by ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometer, and the purpose of detecting different kinds of samples with a kind of test strip was achieved.
【學位授予單位】：中國農(nóng)業(yè)科學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R446.6

【參考文獻】

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本文編號：1533784