本文關(guān)鍵詞： 血小板微粒 sCD40L 紅細(xì)胞微粒 中性粒細(xì)胞呼吸爆發(fā) 急性肺損傷　出處：《華東師范大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的：研究血液制品儲(chǔ)存過(guò)程中產(chǎn)生的血小板微粒(PMPs)和紅細(xì)胞微粒(RMPs)對(duì)引發(fā)中性粒細(xì)胞(PMNs)產(chǎn)生呼吸爆發(fā)的作用,并利用輸血相關(guān)急性肺損傷(TRALI)的“兩次打擊”模型從體外細(xì)胞水平評(píng)價(jià)PMPs對(duì)人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HMVECs)的損傷和體內(nèi)小鼠水平評(píng)價(jià)兩種微粒對(duì)誘導(dǎo)小鼠急性肺損傷的作用。方法：從儲(chǔ)存單采血小板(A-PLT)1中分離純化的PMPs、儲(chǔ)存濃縮紅細(xì)胞上清中分離純化的RMPs和重組SCD40L分別與PMNs相互作用,通過(guò)檢測(cè)PMNs活性氧(ROS)的生成量,分析儲(chǔ)存PMPs和RMPs及重組sCD40L對(duì)引發(fā)fMLP活化的PMNs呼吸爆發(fā)的作用；流式檢測(cè)HMVECs表面的粘附分子-1 (CD54; ICAM-1)和PMNs表面的整合素αM(CDllb)的表達(dá)情況判斷細(xì)胞的活化程度。用LPS預(yù)處理HMVECs并建立PMNs介導(dǎo)的HMVECs損傷的兩次打擊體外模型,從細(xì)胞水平評(píng)價(jià)儲(chǔ)存PMPs、重組sCD40L和NADPH氧化酶的抑制劑Apocynin對(duì)HMVECs的損傷作用；通過(guò)檢測(cè)LPS致敏的小鼠輸注純化的PMPs和RMPs后血管外肺水量、肺泡灌洗液蛋白滲漏、肺組織結(jié)構(gòu)、肺炎癥程度及PMN滯留情況從小鼠體內(nèi)水平評(píng)價(jià)PMPs和RMPs對(duì)引發(fā)小鼠急性肺損傷的作用。結(jié)果：PMPs能夠劑量依賴性的誘導(dǎo)PMNs表面CDllb表達(dá)升高,其攜帶的sCD40L與PMNs表面的CD40相互作用,能夠顯著引發(fā)fMLP活化的PMNs產(chǎn)生呼吸爆發(fā),從而誘導(dǎo)PMNs介導(dǎo)的HMVECs發(fā)生損傷；抑制PMNs的NADPH氧化酶作用,可以有效抑制PMPs引發(fā)的PMNs呼吸爆發(fā)和PMNs介導(dǎo)的HMVECs損傷。LPS可以劑量依賴性的誘導(dǎo)HMVECs表面CD54的表達(dá)升高,封阻HMVECs表面表達(dá)的CD54可以降低PMPs誘導(dǎo)的PMNs介導(dǎo)的HMVECs損傷。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)顯示PMPs能夠劑量依賴性的引起LPS致敏的小鼠發(fā)生急性肺損傷,過(guò)濾除去PMPs后可以部分抑制血漿引發(fā)LPS致敏的小鼠發(fā)生急性肺損傷。濃縮紅細(xì)胞在正常條件儲(chǔ)存過(guò)程中,RMPs會(huì)發(fā)生積累。RMPs能夠劑量依賴性的引發(fā)fMLP活化的PMNs呼吸爆發(fā)和誘導(dǎo)LPS致敏的小鼠發(fā)生急性肺損傷；濾除RMPs后可以顯著抑制紅細(xì)胞上清引發(fā)fMLP活化的PMNs呼吸爆發(fā),并部分抑制上清誘導(dǎo)LPS致敏的小鼠發(fā)生急性肺損傷。結(jié)論：儲(chǔ)存血小板中的PMPs攜帶的CD40L信號(hào),可以引起PMNs介導(dǎo)的HMVECs損傷,并且能誘導(dǎo)LPS致敏的小鼠發(fā)生急性肺損傷；濃縮紅細(xì)胞儲(chǔ)存過(guò)程中,RMPs會(huì)發(fā)生積累并能引發(fā)PMNs呼吸爆發(fā),誘導(dǎo)小鼠發(fā)生急性肺損傷。儲(chǔ)存血液成分中積累的微�？赡茉谡T導(dǎo)輸血后急性肺損傷(TRALI)中發(fā)揮重要作用。
[Abstract]:Objective: to study the effects of platelet microparticles (PMPs) and erythrocyte microparticles (RMPs) produced during the storage of blood products on the initiation of respiratory burst in neutrophils (PMNs). The "two strikes" model of transfusion-associated acute lung injury (TRALI) was used to evaluate the injury of PMPs to human pulmonary microvascular endothelial cells (HMVECs) in vitro and mice in vivo to evaluate the effects of two kinds of particles on inducing acute lung injury in mice. Methods: the purified PMPs were isolated from the single platelets collected from the platelets and the purified RMPs and recombinant SCD40L were isolated from the supernatants of concentrated erythrocytes and interacted with PMNs, respectively. The effects of storage of PMPs and RMPs and recombinant sCD40L on the initiation of PMNs respiratory burst activated by fMLP were analyzed by detecting the amount of PMNs reactive oxygen species (Ros). The expression of adhesion molecule 1 (CD54; ICAM-1) on the surface of HMVECs and integrin 偽 MmmCDllb on the surface of PMNs were detected by flow cytometry. The HMVECs was pretreated with LPS and the in vitro model of HMVECs damage mediated by PMNs was established. To evaluate the damage effect of Apocynin, an inhibitor of recombinant sCD40L and NADPH oxidase, on HMVECs at the cell level, the extravascular lung water, the protein leakage of alveolar lavage fluid, and the lung tissue structure were detected by injecting purified PMPs and RMPs into LPS sensitized mice. The effect of PMPs and RMPs on inducing acute lung injury in mice was evaluated by the degree of lung inflammation and the retention of PMN in vivo. Results the CDllb expression on PMNs surface was increased in a dose-dependent manner, and the sCD40L carried by it interacted with CD40 on PMNs surface. It can induce respiratory burst of PMNs activated by fMLP, induce HMVECs damage mediated by PMNs, inhibit NADPH oxidase of PMNs. LPs can effectively inhibit PMNs respiratory burst induced by PMPs and HMVECs damage mediated by PMNs. LPs can induce the increase of CD54 expression on HMVECs surface in a dose-dependent manner. Blocking the expression of CD54 on the surface of HMVECs could reduce the PMNs induced HMVECs damage induced by PMPs. In vivo, PMPs could induce acute lung injury in LPS sensitized mice in a dose-dependent manner. Filtration after removing PMPs could partially inhibit the occurrence of acute lung injury in mice sensitized to LPS by plasma. RMPs accumulated in concentrated red blood cells during storage under normal conditions. RMPs could induce PMNs respiratory explosion activated by fMLP in a dose-dependent manner. Acute lung injury occurred in LPS sensitized mice. Filtration of RMPs could significantly inhibit the respiratory burst of fMLP activated PMNs induced by erythrocyte supernatant, and partly inhibit the occurrence of acute lung injury in LPS sensitized mice induced by supernatant. Conclusion: the CD40L signal carried by PMPs in storage platelets can be stored. It can induce HMVECs damage mediated by PMNs and induce acute lung injury in mice sensitized with LPS. The accumulation of particles in the stored blood components may play an important role in inducing acute lung injury after blood transfusion in mice.
【學(xué)位授予單位】：華東師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R457.1

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 王和枚,丁日高,阮金秀;急性肺損傷的中性粒細(xì)胞作用機(jī)制研究進(jìn)展[J];中國(guó)工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志;2002年06期

2 陳志強(qiáng),黃宏,劉友生;巨噬細(xì)胞在急性肺損傷中的作用[J];中國(guó)急救醫(yī)學(xué);2002年02期

3 尹文,虎曉岷,袁靜,黃楊,宋祖軍,張金山;急性肺損傷核因子-κB的活性變化及糖皮質(zhì)激素的干預(yù)研究[J];中國(guó)急救醫(yī)學(xué);2002年09期

4 錢(qián)桂生;急性肺損傷和急性呼吸窘迫綜合征研究進(jìn)展[J];重慶醫(yī)學(xué);2002年09期

5 朱光發(fā);核因子-κB與急性肺損傷關(guān)系的研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).呼吸系統(tǒng)分冊(cè);2002年02期

6 閻錫新,郭麗萍;中性粒細(xì)胞在急性肺損傷中的作用[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).呼吸系統(tǒng)分冊(cè);2002年04期

7 羅富榮;中性粒細(xì)胞與急性肺損傷[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).麻醉學(xué)與復(fù)蘇分冊(cè);2002年02期

8 錢(qián)桂生;全身炎癥反應(yīng)綜合征、急性肺損傷與急性呼吸窘迫綜合征[J];遼寧醫(yī)學(xué)雜志;2002年03期

9 楊毅;核因子κB的活化與急性肺損傷[J];現(xiàn)代醫(yī)學(xué);2002年02期

10 黃英;肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞凋亡在急性肺損傷中的作用[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2002年03期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 潘鵬飛;于湘友;;側(cè)臥位通氣對(duì)急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征患者肺復(fù)張容積的影響[A];第三屆重癥醫(yī)學(xué)大會(huì)論文匯編[C];2009年

2 伍峻松;王沈華;周文;陳金明;張茂;徐少文;干建新;趙小綱;;嚴(yán)重創(chuàng)傷合并急性肺損傷惡化進(jìn)展至急性呼吸窘迫綜合征的臨床危險(xiǎn)因素分析[A];第七屆全國(guó)創(chuàng)傷學(xué)術(shù)會(huì)議暨2009海峽兩岸創(chuàng)傷醫(yī)學(xué)論壇論文匯編[C];2009年

3 胡宗風(fēng);孫海晨;邵旦兵;李百?gòu)?qiáng);聶時(shí)南;;急性肺損傷血管內(nèi)皮保護(hù)作用的臨床研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)急診醫(yī)學(xué)分會(huì)第十三次全國(guó)急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)大會(huì)論文集[C];2010年

4 孫軍;韓忠朝;孟磊;王偉強(qiáng);秦永明;;臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞治療急性肺損傷[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)急診醫(yī)學(xué)分會(huì)第十三次全國(guó)急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)大會(huì)論文集[C];2010年

5 陳文學(xué);王洵;安曉靜;楊冬;陳芬兒;白春學(xué);;基于核磁共振波譜的急性肺損傷代謝組學(xué)研究[A];第十六屆全國(guó)波譜學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要集[C];2010年

6 宋振舉;白春學(xué);童朝陽(yáng);;急性肺損傷的分子遺傳學(xué)研究進(jìn)展與展望[A];《中華急診醫(yī)學(xué)雜志》更名十周年、World Journal of Emergency Medicine創(chuàng)刊一周年慶典《中華急診醫(yī)學(xué)雜志》第十屆組稿會(huì)、第三屆急診醫(yī)學(xué)青年論壇論文匯編[C];2011年

7 劉斌劍;王建民;陳林;;急性肺損傷的基因治療[A];湖北省暨武漢市生物化學(xué)與分子生物學(xué)學(xué)會(huì)第七屆第十四次學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2003年

8 張忠;洪文;鐘曉玲;陳生;曲敬來(lái);;痰熱清對(duì)急性肺損傷患者保護(hù)作用的臨床研究[A];2006年全國(guó)危重病急救醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

9 張畔;劉劍虹;虎盤(pán)林;駱寧;;急性一氧化碳中毒大鼠急性肺損傷的實(shí)驗(yàn)研究[A];2006年全國(guó)危重病急救醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

10 陳新;陳榮昌;岑燕遺;劉杰;鐘南山;;自主呼吸狀態(tài)下犬急性肺損傷早期干預(yù)呼吸生理機(jī)制研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)呼吸病學(xué)術(shù)會(huì)議暨學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2006年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前9條

1 熊學(xué)莉邋通訊員 曾理;急性肺損傷早診早治降低病死率[N];健康報(bào);2008年

2 郭姜寧 常亮 王曉靜;高海拔地區(qū)急性肺損傷防治難題攻克[N];科技日?qǐng)?bào);2003年

3 郭姜寧 常亮 王曉靜;急性肺損傷防治難題攻克[N];醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)(中藥報(bào));2003年

4 ;Ｃａｌｆａｃｔａｎｔ在兒科急性肺損傷中的療效[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2005年

5 張國(guó)民;首個(gè)治療“非典”新藥進(jìn)入臨床研究[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2003年

6 記者 張曉松;治非典新藥首次獲批臨床試驗(yàn)[N];新華每日電訊;2003年

7 鄒爭(zhēng)春 記者 陳磊;我國(guó)學(xué)者發(fā)現(xiàn)新生兒急性肺損傷新病因[N];科技日?qǐng)?bào);2013年

8 李山;德發(fā)現(xiàn)致命性輸血并發(fā)癥致病機(jī)理[N];保健時(shí)報(bào);2010年

9 李山;德找到致命性輸血并發(fā)癥致病機(jī)理[N];科技日?qǐng)?bào);2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 朱耀斌;部分液體通氣技術(shù)治療急性肺損傷的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2010年

2 劉東;過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ在內(nèi)毒素致急性肺損傷中的保護(hù)作用及機(jī)制[D];華中科技大學(xué);2006年

3 吳海青;間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)內(nèi)毒素誘導(dǎo)急性肺損傷大鼠肺保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2012年

4 宋琳;攜帶缺氧誘導(dǎo)有絲分裂因子的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)急性肺損傷的作用研究[D];復(fù)旦大學(xué);2008年

5 李曉鋒;肺動(dòng)脈—左心房無(wú)泵肺輔助治療急性肺損傷的研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

6 李建軍;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞治療內(nèi)毒素誘導(dǎo)大鼠急性肺損傷的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東大學(xué);2012年

7 李波;小鼠急性肺損傷時(shí)期促炎癥消退介質(zhì)脂氧素的變化及調(diào)節(jié)機(jī)制研究[D];華中科技大學(xué);2013年

8 李強(qiáng);急性肺損傷肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞間隙連接蛋白40與血管通透性的關(guān)系研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2009年

9 李偉棟;完全液體通氣技術(shù)治療乳豬急性肺損傷的實(shí)驗(yàn)研究[D];浙江大學(xué);2011年

10 孫繼萍;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)內(nèi)毒素致大鼠急性肺損傷生物學(xué)作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2008年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 張蕾;一氧化氮對(duì)急性肺損傷大鼠白介素-6，，環(huán)氧合酶-2的影響[D];華中科技大學(xué);2008年

2 李宏林;不同原因致大鼠急性肺損傷炎性反應(yīng)及地塞米松干預(yù)效果的差異[D];河北醫(yī)科大學(xué);2006年

3 雷霆;丹參對(duì)急性肺損傷血管生成素表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

4 任文霞;膽紅素對(duì)抗急性肺損傷形成作用機(jī)制的研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2005年

5 劉輝;外源性肺泡表面活性物質(zhì)對(duì)急性肺損傷治療效果及量效關(guān)系的研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2005年

6 張文涵;不同劑量沐舒坦對(duì)內(nèi)毒素所致大鼠急性肺損傷的阻遏作用的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2005年

7 高冬娜;急性肺損傷大鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶及單核細(xì)胞趨化蛋白-1的表達(dá)及意義[D];大連醫(yī)科大學(xué);2006年

8 秦開(kāi)秀;烏司他丁對(duì)小鼠急性肺損傷的保護(hù)作用及其機(jī)制[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2006年

9 李海寧;人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)急性肺損傷氧化應(yīng)激的影響[D];山西醫(yī)科大學(xué);2012年

10 李超然;內(nèi)毒素誘導(dǎo)的急性肺損傷早期炎癥反應(yīng)狀態(tài)變化及其與肺損傷關(guān)系研究[D];蘭州大學(xué);2012年

本文編號(hào)：1521873