本文關(guān)鍵詞： 單鏈DNA 核酸適配體 RhD抗體 指數(shù)富集的配體系統(tǒng)進(jìn)化技術(shù)　出處：《中國輸血雜志》2016年06期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的獲得具有拮抗RhD抗體能力的特異性核酸適配體。方法利用SELEX技術(shù),從體外合成的82 nt隨機(jī)單鏈DNA文庫中,篩選出與RhD抗體特異結(jié)合的核酸適配體。采用熒光標(biāo)記法檢測核酸適配體與RhD抗體結(jié)合的親和力及特異性,并對中和RhD抗體的劑量效應(yīng)關(guān)系進(jìn)行分析。結(jié)果通過篩選得到的4個核酸適配體解離常數(shù)達(dá)到nmol/L水平,其中3號核酸適配體特異性最強(qiáng),其次為1號,而2號與4號無特異性。1號與3號核酸適配體聯(lián)合使用,濃度分別為50 pmol/L時,可完全中和RhD抗體。結(jié)論利用隨機(jī)單鏈寡核苷酸文庫成功獲得與RhD抗體特異性結(jié)合的核酸適配體,所獲得的核酸適配體具有拮抗RhD抗體的能力。
[Abstract]:Objective to obtain a specific nucleic acid aptamer with the ability of antagonizing RhD antibody. Methods 82 NT random single-stranded DNA library was synthesized in vitro using SELEX technique. Nucleic acid aptamers that specifically bind to RhD antibody were screened. The affinity and specificity of the aptamer to RhD antibody were detected by fluorescence labeling method. The dose-effect relationship of neutralizing RhD antibody was analyzed. Results the dissociation constants of 4 nucleic acid aptamers obtained by screening reached the level of nmol/L, and the specificity of nucleic acid aptamer No. 3 was the strongest. The second was 1, but the 2 and 4 were not specific. When 1 and 3 aptamer were used together, the concentration was 50 pmol/L. Conclusion the nucleic acid aptamers specifically bound to RhD antibody were successfully obtained by using the random single-strand oligonucleotide library. The obtained aptamer has the ability to antagonize RhD antibody.
【作者單位】： 深圳市血液中心;陜西省血液中心;廣州中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院;
【基金】：深圳市科技計(jì)劃項(xiàng)目(JCYJ20140403092619633)
【分類號】：R457.1
【正文快照】： proven to have the ability to neutralize Rh D antibody.Rh血型系統(tǒng)抗原可分為2類:由RHD基因編碼的Rh D抗原與由RHCE基因編碼的Rh Cc Ee抗原[1]。Rh D抗原的免疫性較強(qiáng),是影響臨床用血安全的重要因素,《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》明確規(guī)定常規(guī)輸血治療前須檢測ABO血型系統(tǒng)及Rh D抗

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本文編號：1455201