本文關(guān)鍵詞：體外儲(chǔ)存致懸浮紅細(xì)胞凋亡損傷機(jī)制的研究　出處：《安徽醫(yī)科大學(xué)》2015年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的研究體外儲(chǔ)存期懸浮紅細(xì)胞(suspenged erythrocytes)在不同保存時(shí)間引起紅細(xì)胞凋亡損傷的影響,并探討其可能的發(fā)生機(jī)制。方法采集8例健康獻(xiàn)血員全血,常規(guī)分離白細(xì)胞和血漿制成懸浮紅細(xì)胞。置4℃貯血冰箱儲(chǔ)存,在保存后3 d、11 d、19 d、27 d和35 d共5個(gè)時(shí)相點(diǎn),分別留取相應(yīng)保存期的懸浮紅細(xì)胞,利用Annexin V-FITC進(jìn)行熒光染色,經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)不同保存期紅細(xì)胞凋亡率及紅細(xì)胞體積大小變化,同時(shí)用熒光顯微鏡觀察PS外翻的凋亡的紅細(xì)胞形態(tài);利用Fluo-3/AM作為熒光探針,經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)不同保存期紅細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度;同時(shí)留取不同保存期懸浮紅細(xì)胞上清液,利用酶標(biāo)儀檢測(cè)上清液在405 nm的吸光度并計(jì)算紅細(xì)胞溶血率。結(jié)果不同保存期的懸浮紅細(xì)胞經(jīng)過(guò)熒光染色,經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)后發(fā)現(xiàn),紅細(xì)胞凋亡率和紅細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度逐漸增加,與保存3 d的懸浮紅細(xì)胞相比較,11d和19 d差異不明顯,至27 d差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),并且熒光顯微鏡下可以觀察到凋亡紅細(xì)胞膜上的FITC熒光信號(hào);用酶標(biāo)儀檢測(cè)上清液中血紅蛋白的吸光度后發(fā)現(xiàn),與保存3 d的紅細(xì)胞相比較,11 d、19 d和27 d溶血率增加不明顯,至35 d差異才有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而隨著保存時(shí)間的增加,紅細(xì)胞體積逐漸變小,與保存3 d的紅細(xì)胞相比較,11 d和19 d體積變小差異不明顯,至27d差異有顯著性(P0.05)。結(jié)論體外儲(chǔ)存的懸浮紅細(xì)胞隨著保存時(shí)間的延長(zhǎng),凋亡逐漸增加,這可能是導(dǎo)致儲(chǔ)存損傷的原因之一。紅細(xì)胞凋亡發(fā)生的主要機(jī)制可能是鈣離子內(nèi)流。
[Abstract]:Objective to study the effects of suspended erythrocytes (RBC) suspending erythrocytes on erythrocyte apoptosis at different storage times in vitro. Methods whole blood samples from 8 healthy blood donors were collected, leucocytes and plasma were routinely separated and made into suspended red blood cells (RBC), stored in 4 鈩，

本文編號(hào)：1357087