【摘要】：隨著國家轉(zhuǎn)基因重大專項的開展，越來越多的轉(zhuǎn)基因作物投入到大田釋放和田間試驗階段，轉(zhuǎn)植酸酶基因玉米是我國自主研發(fā)的具有知識產(chǎn)權(quán)的玉米新品種，有著提高飼料營養(yǎng)利用率、減少磷污染、降低生產(chǎn)成本等諸多優(yōu)點。目前國內(nèi)外還鮮見有對轉(zhuǎn)植酸酶玉米環(huán)境安全性方面的研究。本研究以其親本蠡玉35和常規(guī)玉米品種鄭單958為對照，從土壤肥力、根際土壤蛋白質(zhì)含量、根際土壤微生物多樣性及基因水平漂移四個方面研究了轉(zhuǎn)植酸酶玉米的種植對生態(tài)安全尤其是土壤生態(tài)系統(tǒng)造成的影響。研究結(jié)果如下： 1、用Biolog法對三種玉米的土壤微生物群落功能多樣性進行對比研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在整個玉米生育期內(nèi)微生物種群的豐富度和多樣性都呈現(xiàn)出逐漸增加的趨勢。相較于另外兩種非轉(zhuǎn)基因玉米，轉(zhuǎn)植酸酶基因玉米的根際土壤微生物群落多樣性更豐富。統(tǒng)計分析顯示除了Simpson優(yōu)勢度指數(shù)出現(xiàn)顯著差異外，，轉(zhuǎn)植酸酶玉米與另外兩種非轉(zhuǎn)基因玉米在土壤微生物功能多樣性指數(shù)和均勻度指數(shù)上均未出現(xiàn)顯著性差異。 2、根際土壤氮磷鉀的測定結(jié)果表明，雖然在秸稈還田期土壤中的氮含量有增加，但轉(zhuǎn)植酸酶玉米與另外兩種非轉(zhuǎn)基因玉米相比氮磷鉀含量在生育期和秸稈還田期均未出現(xiàn)顯著性差異。 3、利用BCA和ELISA法分別測定了三種玉米生育期根部土壤中蛋白質(zhì)總含量的變化和植酸酶蛋白含量的變化，結(jié)果表明三種玉米根際土壤蛋白總量和植酸酶含量呈現(xiàn)逐漸遞增的趨勢。與另外兩種非轉(zhuǎn)基因玉米相比，轉(zhuǎn)植酸酶玉米的根部土壤中蛋白質(zhì)總含量不存在顯著性差異；植酸酶蛋白含量雖然略高，但也未出現(xiàn)顯著性地差異。 4、利用不動桿菌Acinetobacter baylyisp.ADP1構(gòu)建了植酸酶基因平行轉(zhuǎn)移檢測模型。為了明確轉(zhuǎn)植酸酶基因玉米中外源基因是否會向土壤微生物轉(zhuǎn)移，建立了以目前已知自然狀態(tài)下接受外源DNA能力最強的不動桿菌Acinetobacter baylyisp.ADP1為指示菌的外源基因水平轉(zhuǎn)移檢測體系。以超聲波破碎處理的轉(zhuǎn)植酸酶基因玉米的基因組片段轉(zhuǎn)化Acinetobacter baylyisp.ADP1，對多于10~6個轉(zhuǎn)化子進行PCR檢測，未發(fā)現(xiàn)含有植酸酶基因的轉(zhuǎn)化子。由此推測，轉(zhuǎn)植酸酶基因玉米種的外源基因不會或者只可能以低于10~~(-6)的頻率轉(zhuǎn)移到土壤微生物中去。
【學位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：S513;S154.3

【參考文獻】

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1 朱國萍;用蛋白質(zhì)工程方法設(shè)計和改造工業(yè)用酶[J];安徽師大學報(自然科學版);1998年04期

2 姚斌，張春義，王建華，范云六，史秀云，王亞茹，李淑敏;產(chǎn)植酸酶的黑曲霉菌株篩選及其植酸酶基因克隆[J];農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學報;1998年01期

3 阮妙鴻;許燕;鄭瑤;楊川毓;張積森;闕友雄;陳如凱;張木清;;轉(zhuǎn)ScMV-CP基因甘蔗對土壤微生物的影響[J];熱帶作物學報;2008年02期

4 施安輝;王光玉;周波;;目前國內(nèi)外植酸酶研究的進展[J];山東食品發(fā)酵;2002年01期

5 胡春霞;宋會儀;;提高真菌植酸酶熱穩(wěn)定性的方法[J];飼料廣角;2006年06期

6 沈法富,韓秀蘭,范術(shù)麗;轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲棉根際微生物區(qū)系和細菌生理群多樣性的變化[J];生態(tài)學報;2004年03期

7 孔維棟,劉可星,廖宗文,朱永官,王碧玲;不同腐熟程度有機物料對土壤微生物群落功能多樣性的影響[J];生態(tài)學報;2005年09期

8 路興波,孫紅煒,楊崇良,劉開啟,尚佑芬,趙玖華;轉(zhuǎn)基因玉米外源基因通過花粉漂移的頻率和距離[J];生態(tài)學報;2005年09期

9 王強;戴九蘭;吳大千;余悅;申天琳;王仁卿;;微生物生態(tài)研究中基于BIOLOG方法的數(shù)據(jù)分析[J];生態(tài)學報;2010年03期

10 楊永華,姚健,華曉梅;農(nóng)藥污染對土壤微生物群落功能多樣性的影響[J];微生物學雜志;2000年02期

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