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血府逐瘀湯大鼠含藥血清主要成分的初步研究

發(fā)布時間:2016-07-30 22:09

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《中國中醫(yī)科學院》 2013年

血府逐瘀湯大鼠含藥血清主要成分的初步研究

付衍  

【摘要】:研究背景 血府逐瘀湯(Xuefu Zhuyu Decoction, XFZYD)是臨床上常用的活血化瘀經(jīng)典方,有活血化瘀、行氣止痛之功效。該方在傳統(tǒng)中醫(yī)學主要用于胸中血瘀之證,治療氣滯血瘀所致的胸痛、頭痛、內(nèi)熱煩悶、失眠多夢、心悸怔忡、急躁易怒等病癥,現(xiàn)代醫(yī)學中常用于治療冠心病心絞痛、血管及外傷性頭痛等多種疾病。在中醫(yī)理論的指導下,該方不僅可以治療血瘀引起的出血性疾病,還可以用于閉經(jīng)等血行不暢之病癥,應用非常廣泛。最近研究顯示,同為血府逐瘀湯含藥血清(Xuefu Zhuyu Decoction-Contained Serum, XFZYD-CS)的作用機理研究,有人發(fā)現(xiàn)該方作用機制可能與XFZYD促進血管新生相關(guān),也另有研究者表明XFZYD可能與抑制血管新生有關(guān)。XFZYD的作用機理引起人們廣泛關(guān)注,其是否具有雙向調(diào)節(jié)作用,還是其他因素導致,值得進一步深入研究。 研究目的 為了進一步研究血府逐瘀湯的功效,對該方的物質(zhì)作用基礎有更深入的了解,本研究采用高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)、液相色譜-質(zhì)譜-質(zhì)譜聯(lián)用(Liquid Chromatography-Mass Spectrometry/Mass Spectrometry, LC-MS/MS)等分析技術(shù)對血府逐瘀湯大鼠含藥血清、空白血清的成分進行了初步研究,通過定性、定量分析,初步篩選了XFZYD-CS的主要成分——芍藥苷,以期逐步明確XFZYD-CS中的主要藥物成分并定量分析。 研究方法 SD大鼠經(jīng)血府逐瘀制劑灌胃、取血、分離血清,血清樣品用乙腈沉淀蛋白法樣品前處理后,用LC-MS/MS法測定含藥血清中的芍藥苷濃度。色譜柱為Atlantis(?) T3(2.1×100mm3μm),柱溫:40℃,流速:0.3mL/min,進樣量:2μL流動相:A:0.05%甲酸水溶液;B:甲醇,梯度洗脫。離子源:電噴霧(ESI)電離源,源溫:325℃,檢測模式:負離子檢測,干燥氣流量(Gas Flow):11L/min,霧化器壓力(Nebulizer):45psi,采集條件:芍藥苷479→120.9,裂解電壓:150V,碰撞電壓:25V。 研究結(jié)果 1、芍藥苷檢測濃度在9.14-230.0ng/mL內(nèi)線性關(guān)系良好,回歸方程為Y=1.1666X-7.2314(r=0.9983)。最低定量限為9.14ng/mL。 2、血府逐瘀膠囊含藥血清中芍藥苷的濃度:高劑量組含藥血清芍藥苷的平均值為55.97ng/mL,SD為13.77%,RSD為24.6%。低劑量組平均值為8.38ng/mL, SD為1.84%,RSD為21.9%。中劑量組平均值為23.77ng/mL,SD為5.58%,RSD23.5%。 3、經(jīng)統(tǒng)計學分析,血府逐瘀湯含藥血清低、中、高三個劑量組中芍藥苷的濃度有顯著差異。 結(jié)論 本研究以HPLC.LC-MS/MS等檢測技術(shù)對血府逐瘀湯含藥血清、空白血清進行了初步分析研究,確立了大鼠血清中芍藥苷的LC-MS/MS檢測方法,對血府逐瘀制劑含藥血清中所含芍藥苷進行了定量分析。本研究建立的大鼠血清中LC-MS/MS測定法,操作簡便,靈敏度高,結(jié)果準確,樣品穩(wěn)定性良好。 經(jīng)統(tǒng)計學分析,血府逐瘀湯含藥血清低、中、高三個劑量組中芍藥苷的濃度有顯著差異。其含藥血清中芍藥苷濃度的差異,是否構(gòu)成血府逐瘀湯不同藥物作用的基礎,還需進一步研究驗證。

【關(guān)鍵詞】:
【學位授予單位】:中國中醫(yī)科學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2013
【分類號】:R285.5
【目錄】:

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4 王海蘋;PMS肝氣逆證大鼠含藥血清對體外原代培養(yǎng)大鼠大腦皮層神經(jīng)元活力及5-HT1A受體影響[D];山東中醫(yī)藥大學;2005年

5 陳圣麗;“益發(fā)”復方治療女性型脫發(fā)的臨床療效觀察及對體外培養(yǎng)SD大鼠毛乳頭細胞的影響[D];廣州中醫(yī)藥大學;2006年

6 楊巍;淫羊藿對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞的影響[D];武漢體育學院;2007年

7 徐凌霄;補腎益精法對間充質(zhì)干細胞向軟骨細胞定向過程中Ⅱ型膠原和蛋白多糖基因表達影響[D];南京中醫(yī)藥大學;2010年

8 彭柯萍;益骨膠囊含藥血清對成骨細胞ER和IL-6影響的研究[D];暨南大學;2003年

9 周羨敏;益骨膠囊含藥血清對成骨細胞增殖及分泌IL-1β、TGF-β_1的影響[D];暨南大學;2003年

10 朱曉峰;益骨膠囊含藥血清對成骨細胞分泌IGF-I、NO和破骨細胞凋亡的影響[D];暨南大學;2003年


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