本文關(guān)鍵詞：丹參酮I對(duì)2型糖尿病小鼠空腹血糖的影響及部分機(jī)制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：2型糖尿病占糖尿病患者總數(shù)的90以上,嚴(yán)重危害人類健康。丹參酮Ⅰ是以丹參中所含的脂溶性成分丹參醌Ⅰ分離得到的單體,但其對(duì)糖尿病降糖作用還不明確。本研究利用高脂高糖飲食結(jié)合多次小劑量鏈脲佐菌素(streptozotocin, STZ)注射誘導(dǎo)的方法,構(gòu)造小鼠的2型糖尿病模型(type 2 diabetes mellitus, T2DM),觀察丹參酮Ⅰ對(duì)小鼠肝臟的影響并分析其可能的作用機(jī)制。同時(shí),構(gòu)造HepG2胰島素抵抗細(xì)胞模型,觀察丹參酮Ⅰ在細(xì)胞模型上的作用并探討可能的的作用機(jī)制。在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,將ICR實(shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)分為2組,NFD (nomal-fat diet)組和HFD (high-fat diet)組。NFD組給于普通飼料飼養(yǎng),HFD組給于高脂高糖飼料飼養(yǎng),時(shí)間為4周。第4周末已經(jīng)配好的STZ溶液,對(duì)HFD組小鼠按照40mg/kg的劑量進(jìn)行腹腔注射,每隔2天注射一次,連續(xù)注射5次(每次注射前禁食禁水過(guò)夜)。2周后,測(cè)空腹血糖,將HFD組血糖值高于13.89mmol/L的實(shí)驗(yàn)小鼠挑選出來(lái),并隨機(jī)分組,分別是模型組、丹參酮Ⅰ高濃度組、中濃度組、低濃度組,二甲雙胍(Met)陽(yáng)性對(duì)照組和吡格列酮(Pio)陽(yáng)性對(duì)照組。隨后這6組繼續(xù)給于高脂高糖飼料喂養(yǎng)3周,每天注射相應(yīng)劑量的藥物,同時(shí),每周對(duì)7組實(shí)驗(yàn)小鼠測(cè)一次空腹血糖和體重。結(jié)果顯示,3周內(nèi),模型組的空腹血糖值明顯高于NFD組、高濃度組,Met組和Pio組(P0.05)。在給藥3周階段,從第2周開(kāi)始,模型組小鼠活動(dòng)顯著減少；第3周,體質(zhì)量明顯降低并低于高濃度組(P0.05)。第3周末,取肝臟,經(jīng)過(guò)病理學(xué)檢測(cè),模型組肝臟細(xì)胞中多見(jiàn)細(xì)胞質(zhì)腫脹,細(xì)胞核固縮,細(xì)胞壞死現(xiàn)象和組織炎癥較其他組明顯。免疫組織化學(xué)試驗(yàn)顯示,模型組肝臟組織中PTP1B的表達(dá)(以積分光密度IOD表示)明顯高于NFD組、高濃度組,Met組和Pio組(P0.05)。Western blot分析顯示,模型組肝臟組織中PTP1B的表達(dá)明顯高于NFD組、高濃度組,Met組和Pio組(P0.05)。模型組肝臟組織中P-Akt的表達(dá)明顯低于NFD組、高濃度組,Met組和Pio組(P0.05)。提示,高濃度的丹參酮Ⅰ可以降低STZ誘導(dǎo)的T2DM小鼠的空腹血糖和肝損傷,同時(shí)降低肝臟PTP1B的表達(dá),增加肝臟P-Akt的表達(dá)。在體外實(shí)驗(yàn)中,以高濃度胰島素誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞,建立HepG2胰島素抵抗細(xì)胞模型,經(jīng)過(guò)不斷的條件摸索,最終確定了胰島素的誘導(dǎo)濃度和誘導(dǎo)時(shí)間(10-7mol/L,24 h)。同時(shí),利用MTT法確定了丹參酮Ⅰ的給藥濃度(78、156、312ng/ml)。進(jìn)一步利用葡萄糖氧化酶法檢測(cè)丹參酮Ⅰ對(duì)HepG2胰島素抵抗模型細(xì)胞的葡萄糖消耗量的影響,結(jié)果顯示,隨著丹參酮Ⅰ濃度的增加,胰島素抵抗的HepG2細(xì)胞葡萄糖消耗量也隨之增加。最后利用Western blot法測(cè)定PTP1B、Akt和P-Akt蛋白的表達(dá)情況,結(jié)果顯示,與正常組比較,模型組PTP1B的表達(dá)升高,P-AKT的表達(dá)降低；與模型組比較,隨著丹參酮Ⅰ給藥組濃度的增加,PTP1B蛋白的表達(dá)降低,P-Akt蛋白的表達(dá)升高。由此,本研究得出以下結(jié)論：(1)STZ誘導(dǎo)的T2DM小鼠肝臟PTP1B表達(dá)明顯增加。(2)高濃度的丹參酮Ⅰ可以降低STZ誘導(dǎo)的T2DM小鼠的空腹血糖水平和肝損傷,同時(shí)降低肝臟PTP1B的表達(dá),其機(jī)制可能與丹參酮Ⅰ提高肝臟P-Akt的表達(dá)有關(guān)。(3)丹參酮Ⅰ能改善HepG2細(xì)胞的胰島素抵抗,其機(jī)制可能與通過(guò)抑制PTP1B的表達(dá),進(jìn)而促進(jìn)了Akt信號(hào)通路的活化有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：2型糖尿病 丹參酮Ⅰ 動(dòng)物模型 鏈脲佐菌素 HepG2細(xì)胞 胰島素 PTP1B 胰島素抵抗
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R259
【目錄】：

• 中英文縮略詞對(duì)照6-8
• 中文摘要8-10
• 英文摘要10-13
• 前言13-16
• 1 實(shí)驗(yàn)材料16-20
• 2 實(shí)驗(yàn)方法20-32
• 2.1 T2DM小鼠模型的制備20
• 2.2 動(dòng)物分組及給藥方法20-21
• 2.3 病理學(xué)分析21-22
• 2.4 免疫組織化學(xué)試驗(yàn)22-23
• 2.5 HepG2細(xì)胞培養(yǎng)23-24
• 2.6 HepG2胰島素抵抗細(xì)胞模型的建立24-25
• 2.7 MTT試驗(yàn)25
• 2.8 葡萄糖消耗量的檢測(cè)25-26
• 2.9 免疫印跡試驗(yàn)26-31
• 2.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理31-32
• 3 結(jié)果32-42
• 3.1 丹參酮Ⅰ對(duì)STZ誘導(dǎo)的2型糖尿病小鼠空腹血糖的影響32-33
• 3.2 丹參酮Ⅰ對(duì)STZ誘導(dǎo)的2型糖尿病小鼠體質(zhì)量的影響33-34
• 3.3 丹參酮Ⅰ對(duì)STZ誘導(dǎo)的2型糖尿病小鼠肝組織病理形態(tài)的影響34-35
• 3.4 丹參酮Ⅰ對(duì)STZ誘導(dǎo)的2型糖尿病小鼠肝PTP1B量的表達(dá)的影響35-37
• 3.5 丹參酮Ⅰ對(duì)STZ誘導(dǎo)的2型糖尿病肝組織Akt和P-Akt的影響37-38
• 3.6 丹參酮Ⅰ對(duì)HepG2細(xì)胞增值的影響38-39
• 3.7 丹參酮Ⅰ對(duì)HepG2胰島素抵抗細(xì)胞的葡萄糖消耗量的影響39-40
• 3.8 丹參酮Ⅰ對(duì)HepG2胰島素抵抗細(xì)胞中PTP1B蛋白表達(dá)的影響40-41
• 3.9 丹參酮Ⅰ對(duì)HepG2胰島素抵抗細(xì)胞中Akt和P-Akt蛋白表達(dá)的影響41-42
• 4. 討論42-44
• 5. 結(jié)論44-45
• 參考文獻(xiàn)45-49
• 附錄49-50
• 致謝50-51
• 綜述51-59
• 參考文獻(xiàn)57-59

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 朱春霞;白育庭;;丹參酮的臨床研究進(jìn)展[J];咸寧學(xué)院學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2008年06期

2 石嶺;魚(yú)紅閃;金鳳燮;;丹參藥渣中丹參酮的提取研究[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2010年09期

3 王慶偉，楊頻，，張立偉;丹參酮的有效分離[J];山西大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);1994年03期

4 李莉霞;梁睿;彭奇均;;丹參酮色譜分離中羧基鍵合固定相作用研究[J];藥物分析雜志;2007年08期

5 王潤(rùn)梅;岳志勁;;丹參中丹參酮的提取及其薄層色譜定性分析[J];山西大同大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2008年01期

6 母繼林;和順琴;薛景嬌;曹靖麗;胡秋芬;;中藥材丹參中4種主要丹參酮的超高效液相色譜法測(cè)定研究[J];云南民族大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2010年06期

7 孔德云,劉星X&;丹參中二氫異丹參酮Ⅰ的結(jié)構(gòu)[J];藥學(xué)學(xué)報(bào);1984年10期

8 涂祖月;黃傳輝;;丹參酮及其衍生物的藥理活性研究[J];當(dāng)代醫(yī)藥論叢;2014年09期

9 胡廣林;王小如;黎先春;;丹參分析樣品中丹參酮的超聲波輔助提取[J];天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā);2006年06期

10 鄧萍;張海東;蔣君好;蔣啟華;;丹參酮分子結(jié)構(gòu)及光譜性質(zhì)的理論研究[J];計(jì)算機(jī)與應(yīng)用化學(xué);2010年05期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 段海波;楊峗金;丁中濤;曹秋娥;;丹參中三種丹參酮的區(qū)帶毛細(xì)管電泳分析[A];中國(guó)化學(xué)會(huì)第十五屆全國(guó)有機(jī)分析及生物分析學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2009年

2 藍(lán)天鳳;于宗淵;王岱杰;王曉;管仁軍;黃璐琦;;硅膠柱色譜結(jié)合高速逆流色譜法分離制備丹參中丹參酮[A];2010年全國(guó)中藥學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年

3 張華;劉剛;張捷;劉昌葉;史寧;譚生建;;HPLC同時(shí)測(cè)定丹參酮含片中二氫丹參酮Ⅰ 隱丹參酮 丹參酮Ⅰ和丹參酮ⅡA含量[A];2007年全國(guó)生化與生物技術(shù)藥物學(xué)術(shù)年會(huì)論文集[C];2007年

4 張華;劉剛;張捷;劉昌葉;史寧;譚生建;;HPLC同時(shí)測(cè)定丹參酮含片中二氫丹參酮Ⅰ隱丹參酮丹參酮Ⅰ和丹參酮ⅡA含量[A];第九屆全國(guó)中藥和天然藥物學(xué)術(shù)研討會(huì)大會(huì)報(bào)告及論文集[C];2007年

5 張喜華;吳海龍;張樹(shù)榮;王予;俞汝勤;;HPLC-DAD結(jié)合SWATLD二階校正方法快速測(cè)定丹參和復(fù)方丹參片中三種丹參酮含量[A];中國(guó)化學(xué)會(huì)第28屆學(xué)術(shù)年會(huì)第9分會(huì)場(chǎng)摘要集[C];2012年

6 張榮;孫建國(guó);吳曉蘭;周芳;劉昌輝;尚麗麗;高海燕;王廣基;;丹參酮對(duì)前致癌物活化酶CYP1家族的抑制研究[A];第九屆全國(guó)藥物和化學(xué)異物代謝學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

7 楊世高;汪維云;張鑒;;丹參中丹參酮類物質(zhì)高效液相色譜檢測(cè)方法研究[A];中醫(yī)藥理論與應(yīng)用研究——安徽中醫(yī)藥繼承與創(chuàng)新博士科技論壇論文集[C];2008年

8 戴海學(xué);汪明明;李曉蓉;李宇航;王麗娟;薛明;;丹參酮類藥物體內(nèi)代謝產(chǎn)物的LC-DAD-MS鑒定[A];第九屆全國(guó)藥物和化學(xué)異物代謝學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

9 劉蘊(yùn);李曉蓉;李曉莉;李宇航;王麗娟;薛明;;丹參酮和丹參酚酸類的同步液相色譜-質(zhì)譜測(cè)定及其在大鼠體內(nèi)的藥物動(dòng)力學(xué)[A];第九屆全國(guó)藥物和化學(xué)異物代謝學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2009年

10 張萃;王培訓(xùn);周聯(lián);董燕;王青;潘華新;王文君;曹柳英;梁瑞燕;;丹參酮Ⅰ、ⅡA對(duì)LPS誘導(dǎo)THP-1增殖作用及其差異蛋白質(zhì)分析[A];第三屆全國(guó)中醫(yī)藥免疫學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2006年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 李凱;丹參酮Ⅰ調(diào)控Nrf2/ARE通路在小鼠腎臟缺血再灌注損傷中的保護(hù)作用[D];南京大學(xué);2016年

2 吳勝;丹參酮I對(duì)2型糖尿病小鼠空腹血糖的影響及部分機(jī)制[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2016年

3 李靜;二氫丹參酮Ⅰ對(duì)腫瘤細(xì)胞中缺氧誘導(dǎo)因子-1α及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的影響[D];延邊大學(xué);2016年

4 王飛;二氫丹參酮Ⅰ對(duì)NF-κB信號(hào)通路作用機(jī)制及其抗腫瘤作用研究[D];延邊大學(xué);2016年

5 宋燁;丹參中丹參酮Ⅰ和二氫丹參酮Ⅰ的抗腫瘤活性及作用機(jī)制研究[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2014年

6 張小娟;丹參中丹參酮的提取分離工藝及其衍生物合成研究[D];鄭州大學(xué);2009年

7 王艷;丹參酮Ⅰ抗血管生成作用和機(jī)制研究[D];南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院;2015年

8 費(fèi)雅君;中藥丹參活性化合物提取分離技術(shù)研究[D];大連工業(yè)大學(xué);2009年

9 樊翠平;丹參酮化合物的結(jié)構(gòu)修飾及鹵代中間體的合成[D];河南科技大學(xué);2013年

10 張朝暉;丹參酮ⅡA衍生物的設(shè)計(jì)與合成研究[D];中國(guó)海洋大學(xué);2014年

  本文關(guān)鍵詞：丹參酮I對(duì)2型糖尿病小鼠空腹血糖的影響及部分機(jī)制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：251385