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人參多糖及其組分抗老年癡呆的有效性研究

發(fā)布時間:2017-02-07 11:01

  本文關(guān)鍵詞:人參多糖及其組分抗老年癡呆的有效性研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


《吉林大學(xué)》 2014年

人參多糖及其組分抗老年癡呆的有效性研究

劉姝男  

【摘要】:人參是我國傳統(tǒng)的名貴中藥,具有多種藥理活性,迄今已有兩千多年的應(yīng)用歷史,F(xiàn)已證實人參可以治療惡性腫瘤、糖尿病、心血管疾病,還具有提高免疫功能、改善中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能以及抗氧化的功效。人參含有多種化學(xué)成分,如皂苷、多糖、揮發(fā)油、氨基酸、多肽和蛋白質(zhì)等。一直以來,人參皂苷被認(rèn)為是人參發(fā)揮其神經(jīng)保護(hù)作用的活性物質(zhì)基礎(chǔ)。人參多糖的含量占人參總重的20%左右,具有多種藥理活性,但關(guān)于其神經(jīng)保護(hù)作用的研究較少。阿爾茨海默。ˋlzheimer,s disease, AD)是一種以學(xué)習(xí)記憶障礙、認(rèn)知功能障礙、語言障礙為主要臨床表現(xiàn),以老年斑、神經(jīng)元纖維纏結(jié)和神經(jīng)元丟失為主要病理特征的進(jìn)行性神經(jīng)衰退性疾病。AD的發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜,尚未得到明確闡述。 本實驗旨在采用動物模型,研究人參多糖及其組分對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的保護(hù)作用及其機(jī)制。主要包括三部分實驗:一是使用東莨菪堿建立小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙模型,通過Morris水迷宮實驗研究人參粗多糖對學(xué)習(xí)記憶障礙小鼠的影響,通過測定小鼠腦組織中乙酰膽堿酯酶的活力探討人參粗多糖的神經(jīng)保護(hù)作用的機(jī)制;二是采用在大鼠海馬內(nèi)注射Aβ25-35的方法建立老年癡呆模型,通過Morris水迷宮實驗比較人參多糖(GP-1)各劑量組(20mg/kg,40mg/kg,80mg/kg)對老年癡呆大鼠記憶障礙的改善作用;同時對大鼠腦組織切片進(jìn)行免疫組化分析,探討GP-1對Aβ25-35引起的老年癡呆大鼠治療作用的機(jī)制;三是根據(jù)分子量大小對GP-1進(jìn)行分離,得到GP-2,GP-3和GP-4。通過Morris水迷宮實驗的方法比較各樣品對Aβ25-35誘導(dǎo)的老年癡呆大鼠記憶障礙的改善作用。 實驗方法: 1、人參粗多糖對東莨菪堿誘導(dǎo)的小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙模型的有效性研究 (1)Morris水迷宮試驗:定位航行試驗和空間搜索試驗; (2)小鼠腦組織乙酰膽堿酯酶活力測定。 2、人參多糖(GP-1)對Aβ25-35誘導(dǎo)的大鼠老年癡呆模型的有效性研究 (1)GP-1分子量、組成糖及含量、蛋白質(zhì)含量、總糖含量和酸性糖含量的 測定; (2)Morris水迷宮試驗:定位航行試驗和空間搜索試驗; (3)大鼠腦組織切片的HE染色; (4)大鼠腦組織海馬處MAP2,CDK5,P-tau-Thr231和NF-κBp65表達(dá)的測定。 3、人參多糖各組分的分離及對Aβ25-35誘導(dǎo)的大鼠老年癡呆模型的有效性研究 (1)人參多糖各組分的提取:將GP-1上活性炭柱,依次用水、10%乙醇和60%的乙醇洗脫,收集到10%乙醇的洗脫液為GP-2,60%乙醇的洗脫液為GP-3。GP-1經(jīng)透析(截留分子量10kD)后的透析內(nèi)液為GP-4。 (2)測定GP-2,GP-3和GP-4的分子量、組成糖及含量、蛋白質(zhì)含量、總糖含量和酸性糖含量; (3)Morris水迷宮試驗:定位航行試驗和空間搜索試驗。 實驗結(jié)果: 1、人參粗多糖對東莨菪堿誘導(dǎo)的小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙模型的有效性研究 (1)Morris水迷宮實驗結(jié)果表明,人參粗多糖能縮短東莨菪堿所致學(xué)習(xí)記憶障礙小鼠的逃避潛伏期,增強(qiáng)小鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力。 (2)腦組織生化指標(biāo)的測定結(jié)果表明,人參粗多糖可以降低小鼠腦組織乙酰膽堿酯酶的活力。 2、人參多糖對Aβ25-35誘導(dǎo)的大鼠老年癡呆模型的有效性研究 (1)GP-1的總糖含量為35%,葡萄糖是其最主要的單糖,含量為87.21%;GP-1主要含有兩種寡聚糖,分子量分別為672Da(38%)和331Da(61%)。 (2)Morris水迷宮實驗結(jié)果表明,人參多糖高劑量組(80mg/kg)能顯著縮短Aβ25-35誘導(dǎo)的老年癡呆大鼠的逃避潛伏期,并且使跨平臺次數(shù)、平臺所在象限路程與總路程之比顯著升高。人參多糖中劑量組(40mg/kg)可以顯著縮短Aβ25-35誘導(dǎo)的老年癡呆模型大鼠的逃避潛伏期。 (3)HE染色結(jié)果表明,人參多糖中劑量組和高劑量組均改善了Aβ25-35誘導(dǎo)的老年癡呆大鼠海馬CA1區(qū)的神經(jīng)元丟失和排列雜亂的情況,減少了凋亡的形態(tài)學(xué)特征。 (4)免疫組化結(jié)果表明,人參多糖高劑量組(80mg/kg)可以顯著降低大鼠腦組織海馬CA1區(qū)域內(nèi)p-tau-Thr231的表達(dá),增加MAP2的表達(dá),同時降低NF-κBp65的表達(dá)。 3、人參多糖各組分的分離及對Aβ25-35誘導(dǎo)的大鼠老年癡呆模型的有效性研究 (1)GP-2主要含有兩種寡聚糖,分子量分別為566Da(38%)和325Da(80.9%)。GP-3主要含有兩種寡聚糖,分子量分別為670Da(20%)和308Da(50%)。GP-2和GP-3的總多糖含量分別約為60%和70%。GP-2和GP-3主要的組成單糖均為葡萄糖,含量分別為95%和50%。GP-4的分子量分布于1300Da至40000Da之間,蛋白質(zhì)含量為46.98%,總多糖含量為37.27%,其中葡萄糖(50.38%)和鼠李糖(39.01%)是主要的組成單糖。 (2)Morris水迷宮實驗結(jié)果表明,,GP-1可以顯著逆轉(zhuǎn)Aβ25-35誘導(dǎo)老年癡呆大鼠的逃避潛伏期延長、跨平臺次數(shù)減少以及路程比降低的趨勢。GP-2和GP-3顯著縮短了Aβ25-35誘導(dǎo)的老年癡呆大鼠在第2天和第3天的逃避潛伏期。 實驗結(jié)論: 1、人參粗多糖對東莨菪堿誘導(dǎo)的小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙模型的有效性研究 人參粗多糖可以顯著降低東莨菪堿誘導(dǎo)的學(xué)習(xí)記憶障礙小鼠腦內(nèi)乙酰膽堿酯酶的活力,說明人參粗多糖可能通過調(diào)節(jié)中樞膽堿能系統(tǒng)的功能來改善小鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的癥狀。 2、人參多糖(GP-1)對Aβ25-35誘導(dǎo)的大鼠老年癡呆模型的有效性研究 GP-1高劑量組可以顯著地改善Aβ25-35誘導(dǎo)的老年癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶障礙的癥狀。GP-1高劑量組(80mg/kg)對老年癡呆大鼠治療作用的機(jī)制為:可能是通過抑制tau蛋白Thr231位點的過度磷酸化,減少MAP2與之結(jié)合,進(jìn)而保護(hù)神經(jīng)元骨架的完整性不被破壞,最終改善神經(jīng)節(jié)纏連;可能還通過抑制老年癡呆大鼠海馬區(qū)NF-κBp65的表達(dá),減少了細(xì)胞凋亡的發(fā)生。 3、人參多糖各組分的分離及對Aβ25-35誘導(dǎo)的大鼠老年癡呆模型的有效性研究 GP-1具有治療Aβ25-35誘導(dǎo)的大鼠老年癡呆的作用。GP-2和GP-3僅在一定程度上改善了Aβ25-35誘導(dǎo)的老年癡呆大鼠的記憶障礙的癥狀,但效果均弱于GP-1。由于GP-4不具有對Aβ25-35誘導(dǎo)的老年癡呆的治療作用,因此推測有效成分可能存在于透析外液中,有待今后進(jìn)一步深入研究。

【關(guān)鍵詞】:
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R285.5
【目錄】:

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6 卜海博;王丹;李瑞龍;王瑾;李向日;;生曬參中多糖和人參皂苷含量的相關(guān)性研究[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會中藥炮制分會2011年學(xué)術(shù)年會論文集[C];2011年

7 謝遵江;劉穎;賀業(yè)春;;多糖類藥物依賴的LAK細(xì)胞抗腫瘤效應(yīng)的實驗研究[A];解剖學(xué)雜志——中國解剖學(xué)會2002年年會文摘匯編[C];2002年

8 于榮敏;馬文霞;張輝;姚新生;;銀杏細(xì)胞培養(yǎng)及其代謝產(chǎn)物銀杏多糖的研究[A];中國自然資源學(xué)會全國第三屆天然藥物資源學(xué)術(shù)研討會論文集[C];1998年

9 胡衛(wèi)東;;腫瘤的中醫(yī)藥治療思路[A];2011年中華名中醫(yī)論壇暨發(fā)揮中西醫(yī)優(yōu)勢防治腫瘤高峰論壇論文集[C];2011年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 ;[N];中國中醫(yī)藥報;2004年

2 宿健桃;[N];中國醫(yī)藥報;2001年

3 本報記者 廖榮富;[N];福建工商時報;2000年

4 宿健桃;[N];中國中醫(yī)藥報;2002年

5 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)博士 李志平;[N];湖北日報;2010年

6 王三虎;[N];中國醫(yī)藥報;2003年

7 ;[N];中國醫(yī)藥報;2004年

8 王 星;[N];中國中醫(yī)藥報;2003年

9 趙宇新;[N];中國中醫(yī)藥報;2004年

10 廣文;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報;2003年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 韓翰;人參多糖抗腫瘤活性及機(jī)理研究[D];東北師范大學(xué);2011年

2 倪維華;人參多糖免疫活性及抗腫瘤作用[D];東北師范大學(xué);2010年

3 王佳;人參多糖抗疲勞和抗抑郁作用及其機(jī)制的研究[D];東北師范大學(xué);2010年

4 程海榮;絲裂霉素C及人參多糖與TRAIL協(xié)同抗結(jié)腸癌作用的研究[D];東北師范大學(xué);2012年

5 陳地龍;人參多糖對人白血病細(xì)胞株(K562)增殖抑制及誘導(dǎo)分化的分子機(jī)理研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2005年

6 初麗偉;人參硫酸酯多糖的合成方法及其有機(jī)氯多殘留的分析方法研究[D];東北師范大學(xué);2008年

7 于麗;人參水提果膠的結(jié)構(gòu)及其在細(xì)胞壁中的分布[D];東北師范大學(xué);2011年

8 范玉瑩;人參果膠對細(xì)胞遷移的影響及其機(jī)理研究[D];東北師范大學(xué);2010年

9 劉鵬;以線蟲為模型研究中藥中活性成份的生物學(xué)功能及中藥紫蘇梗降糖功能的研究[D];吉林大學(xué);2013年

10 劉繼永;蒸參水化學(xué)成分及生物活性研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2010年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 梁海艷;人參多糖對乳酸菌發(fā)酵特性的影響及應(yīng)用[D];吉林大學(xué);2013年

2 王秦;人參多糖誘導(dǎo)急性早幼粒白血病細(xì)胞凋亡的研究[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2011年

3 劉海波;中性人參多糖的系統(tǒng)分級及結(jié)構(gòu)分析[D];東北師范大學(xué);2011年

4 劉姝男;人參多糖及其組分抗老年癡呆的有效性研究[D];吉林大學(xué);2014年

5 王寅秀;不同部位人參中多糖含量隨海拔變化規(guī)律及其活性比較研究[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

6 趙俊;人參多糖對小鼠外周血造血干細(xì)胞動員作用及其移植的實驗研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2004年

7 姚斕;人參根中堿溶性多糖的分離與分析[D];東北師范大學(xué);2010年

8 方崇業(yè);組織培養(yǎng)人參細(xì)胞與天然人參多糖的研究[D];吉林大學(xué);2005年

9 田國燕;人參多糖定向誘導(dǎo)臍血來源樹突狀細(xì)胞及鑒定[D];浙江中醫(yī)藥大學(xué);2006年

10 王文寶;人參的活性成分及其發(fā)酵產(chǎn)物的定量研究[D];延邊大學(xué);2006年


  本文關(guān)鍵詞:人參多糖及其組分抗老年癡呆的有效性研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:240681

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