發(fā)布時(shí)間：2016-12-27 10:59

  本文關(guān)鍵詞：黃芪甲苷和環(huán)黃芪醇的體內(nèi)外代謝研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《北京中醫(yī)藥大學(xué)》 2013年

黃芪甲苷和環(huán)黃芪醇的體內(nèi)外代謝研究

劉曉亞  

【摘要】：當(dāng)今世界各國(guó)人口老齡化速度加快,防治衰老、延年益壽就成為人們的迫切需要,探求有效的抗衰老藥物成為熱點(diǎn)。目前,衰老機(jī)理有影響的是端粒學(xué)說(shuō),若激活端粒酶,可以增加細(xì)胞分裂次數(shù),延長(zhǎng)壽命。近年研究證實(shí)黃芪甲苷(Astragaloside Ⅳ, AST)的皂苷元環(huán)黃芪醇(Cycloastragenol, CAG)具有顯著的端粒酶激活作用,AST也早已證實(shí)具有明顯的抗衰老活性。二者作為第四代天然保健品和抗衰老藥物引起廣泛關(guān)注,因而對(duì)它們的研究也成為熱點(diǎn)。 目前很多研究證實(shí)皂苷類(lèi)物質(zhì)在體內(nèi)可發(fā)生糖基水解,代謝產(chǎn)物包括皂苷元作為主要物質(zhì)進(jìn)入血液發(fā)揮更大的藥理作用。AST同為大分子皂苷,其口服生物利用度很低；其在體內(nèi)吸收代謝轉(zhuǎn)化及真正發(fā)揮藥效的成分等問(wèn)題目前尚不清楚。CAG為其皂苷元,二者的理化性質(zhì)不同,這可能直接導(dǎo)致二者生物利用度的差異,影響體內(nèi)吸收分布及代謝,繼而進(jìn)一步影響藥效作用。 因而,本課題對(duì)AST及CAG進(jìn)行體內(nèi)外代謝轉(zhuǎn)化過(guò)程、轉(zhuǎn)化部位及代謝產(chǎn)物研究,明確藥效成分。本課題首先對(duì)AST和CAG的理化性質(zhì)進(jìn)行研究,然后分別探討二者體內(nèi)外的代謝特性,明確代謝途徑,為新藥和保健品合理開(kāi)發(fā)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 本論文主要包括三部分： 第一部分文獻(xiàn)綜述對(duì)衰老及抗衰老藥物和保健品的研究進(jìn)展,皂苷類(lèi)藥物的體內(nèi)外代謝轉(zhuǎn)化研究進(jìn)行概括,對(duì)AST及CAG的研究現(xiàn)狀進(jìn)行了歸納和分析。 第二部分實(shí)驗(yàn)部分AST及CAG的理化性質(zhì)和二者體內(nèi)外代謝的研究,包括代謝產(chǎn)物研究、代謝途徑分析等。 1AST及CAG理化性質(zhì)評(píng)價(jià) 對(duì)二者的近似溶解度,水中平衡溶解度實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,二者理化性質(zhì)不同。 2AST體內(nèi)外代謝的研究 (1)體內(nèi)代謝產(chǎn)物分析 通過(guò)灌胃大鼠AST (40mg·kg-1),收集48h的大鼠尿液及糞便,采用LC-MS/MS檢測(cè)原型及代謝產(chǎn)物。在大鼠的尿液及糞便中均未檢測(cè)到原型藥物。其中,大鼠尿液中檢測(cè)到2個(gè)代謝產(chǎn)物：A(vivo)1(m/z513)和A(vivo)2(m/z543)。根據(jù)多級(jí)質(zhì)譜推測(cè)A(vivo)1可能為CAG的異構(gòu)體或三元開(kāi)環(huán)產(chǎn)物；A(vivo)2可能為甲氧基化代謝產(chǎn)物。大鼠糞便中 檢測(cè)到4個(gè)新物質(zhì),分別為A(vivo)1'(m/z513), A(vivo)2'(m/z513), A(vivo)3'(m/z543)和A(vivo)4'(m/z511),推測(cè)A(vivo)1'可能為CAG:A(vivo)2'、A(vivo)3'與尿液中A(vivo)1、 A(vivo)2一致；A(vivo)4'可能為CAG脫氫氧化產(chǎn)物。 (2)體外代謝特性及代謝產(chǎn)物分析 首先考察在人工胃液和人工腸液中的穩(wěn)定性,可看出AST在人工胃液和腸液反應(yīng)4h內(nèi)基本保持穩(wěn)定；通過(guò)AST的離體腸道菌群代謝,發(fā)現(xiàn)AST易被水解,發(fā)生脫糖基反應(yīng),生成CAG-6-O-β-D-葡萄糖苷和CAG。說(shuō)明AST在腸道內(nèi)不穩(wěn)定,可被腸道菌群代謝。大鼠肝臟對(duì)AST代謝的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),AST在大鼠肝中幾乎不發(fā)生代謝,說(shuō)明口服AST后,幾乎無(wú)肝臟首關(guān)作用。 3CAG體內(nèi)外代謝的研究 (1)體內(nèi)代謝產(chǎn)物分析 通過(guò)灌胃大鼠CAG (40mg·kg-1),收集24h的尿液及糞便,采用LC-MS/MS檢測(cè)。大鼠尿液中檢測(cè)到CAG(CO)和7種代謝產(chǎn)物C1-C7,分別為C1(m/z529), C2(m/z529), C3(m/z527), C4(m/z543), C5(m/z485), C6(m/z469)和C7(m/z353)根據(jù)多級(jí)質(zhì)譜推測(cè)幾個(gè)代謝物多為氧化和甲基化的代謝產(chǎn)物。大鼠糞便中發(fā)現(xiàn)了CAG(CO-1’,C0-2’)和9種代謝產(chǎn)物C1’-C9’,分別為C1'(m/z527), C2'(m/z527), C3'(m/z529), C4'(m/z485), C5'(m/z499), C6'(m/z543), C7'(m/z455), C8'(m/z469)和C9'(m/z453)。CAG的體內(nèi)代謝產(chǎn)物多為甲基化和氧化代謝產(chǎn)物。 (2)體外肝代謝動(dòng)力學(xué) 大鼠肝勻漿中酶促動(dòng)力學(xué)研究,得到最佳溫孵時(shí)間40min,最佳蛋白濃度2.0mg·mL-1,最佳底物濃度0.05mg·mL-1。計(jì)算得到Vmax為6.88×10-5μmoL·(min·mg protein)-1, Km為18.8μmol·L-1。 CAG在大鼠不同組織中代謝比較結(jié)果顯示,在心、脾、肺、腎中代謝能力較低且遠(yuǎn)不如在肝中的代謝能力。 第三部分結(jié)論及討論 AST在體內(nèi)易發(fā)生生物轉(zhuǎn)化,生成皂苷元CAG; CAG在體內(nèi)代謝。由此推測(cè)AST被腸道菌群轉(zhuǎn)化為藥理活性較強(qiáng)的代謝產(chǎn)物,主要通過(guò)苷元CAG發(fā)揮藥效。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：北京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類(lèi)號(hào)】：R285
【目錄】：

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【相似文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：黃芪甲苷和環(huán)黃芪醇的體內(nèi)外代謝研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：228139