基于上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化現(xiàn)象對(duì)益氣活血方抗大鼠肝纖維化療效及分子機(jī)制的研究
本文關(guān)鍵詞:基于上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化現(xiàn)象對(duì)益氣活血方抗大鼠肝纖維化療效及分子機(jī)制的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
《中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院》 2013年
基于上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化現(xiàn)象對(duì)益氣活血方抗大鼠肝纖維化療效及分子機(jī)制的研究
李川
【摘要】:背景:肝纖維化(Hepatic fibrosis, HF)是指肝臟中細(xì)胞外基質(zhì)(Extracellular matrix, ECM)尤其是膠原的過量沉積。它不是一個(gè)獨(dú)立的疾病,而是各種病因所致的慢性肝病的共同病理過程,是發(fā)展到肝硬化必經(jīng)階段,并與肝癌有關(guān)。因此抗纖維化治療對(duì)肝硬化及肝癌的防治、延緩疾病進(jìn)程、減少患者痛苦及疾病支出具有重要臨床意義。近年來的研究表明:肝星狀細(xì)胞活化、肝竇毛細(xì)血管化、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化均參與了肝纖維化的進(jìn)程,其中對(duì)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化參與肝纖維化的研究相對(duì)較少,所以進(jìn)一步研究影響上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化這一病理生理現(xiàn)象的調(diào)控因素,可為肝纖維化的治療提供新的途徑。目前西醫(yī)尚無特別有效的抗肝纖維化藥物,而中醫(yī)藥在防治肝纖維化方面進(jìn)行了大量的實(shí)驗(yàn)和臨床研究,顯示出較好的療效和優(yōu)勢(shì)。益氣活血方(黃芪、莪術(shù)、九香蟲、桃仁)是孫桂芝教授在總結(jié)多年臨床經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上提煉出來的治療肝纖維化肝硬化的小驗(yàn)方。經(jīng)本人導(dǎo)師呂文良主任和廣安門醫(yī)院肝炎門診的其他專家大量臨床觀察驗(yàn)證,益氣活血方的確有顯著的抗肝纖維化療效。 目的:通過觀察益氣活血方對(duì)大鼠肝纖維化的影響,研究其抗肝纖維化的療效;驗(yàn)證肝纖維化進(jìn)程中存在上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial-mesenchymal transition, EMT)現(xiàn)象且轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(Transforming growth factor-β, TGF-β)/轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-βⅡ型受體(Transforming growth factor-β receptor Ⅱ, TGF βRⅡ)/Smads信號(hào)通路參與了EMT,為EMT參與HF提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù);探討益氣活血方抗肝纖維化的分子機(jī)制,以便更好的運(yùn)用于臨床,也為挖掘傳承名老中醫(yī)經(jīng)驗(yàn)的科學(xué)內(nèi)涵提供新的研究思路。 方法:采用四氯化碳和乙醇復(fù)合因素復(fù)制大鼠肝纖維化模型,從第5周起,造模的同時(shí)開始給予藥物干預(yù),藥物干預(yù)12周后采取大鼠血清、肝臟、脾臟。檢測(cè)大鼠血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(Alanine aminotransferase, ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(Aspartate aminotransferase, AST)、白蛋白(Albumin, ALB)含量。記錄肝臟、脾臟重量并計(jì)算肝指數(shù)、脾指數(shù)。取各組大鼠肝臟的相同部位進(jìn)行病理切片HE染色,光鏡下觀察各組大鼠病理結(jié)果,并進(jìn)行纖維化分級(jí)。免疫組化法檢測(cè)肝組織中E-鈣粘素(Epithelial Ca2+dependent cell adhesion molecules, E-cadherin)、TGF-β1、TGFβRⅡ、Smad2,并應(yīng)用Axio Vision Release4.8.2圖像分析軟件測(cè)量各指標(biāo)的陽(yáng)性表達(dá)面積總值和陽(yáng)性面積百分比。 結(jié)果:經(jīng)四氯化碳和乙醇造模后,模型組大鼠的肝濕重、脾濕重、肝指數(shù)、脾指數(shù)均升高,與空白對(duì)照組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);給予益氣活血方治療后大鼠的肝濕重、脾濕重、肝指數(shù)、脾指數(shù)下降,與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。模型組ALT、AST升高,ALB降低,與空白對(duì)照組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);給予益氣活血方治療后大鼠的ALT、AST水平降低,ALB升高,與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。HE染色結(jié)果顯示,空白對(duì)照組大鼠肝臟纖維化程度全部處于sO期,模型組主要集中在s4期,二者的差異有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01):益氣活血組主要分布在Sl-S3期,與模型組的差異有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。免疫組化結(jié)果顯示,模型組大鼠肝組織中E-cadherin表達(dá)下調(diào),TGF-β1、TGF βRⅡ、Smad2的表達(dá)上調(diào),與空白對(duì)照組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);益氣活血組E-cadherin表達(dá)較模型組提高,TGF-β1、TGFβRⅡ、Smad2的表達(dá)較模型組降低,二者的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 結(jié)論:益氣活血方能降低肝纖維化大鼠肝濕重、脾濕重、肝指數(shù)、脾指數(shù),并能降低ALT、AST,提高ALB水平,從而改善肝纖維化大鼠肝脾形態(tài)及肝功能。從病理上來看,益氣活血方能改善肝臟炎癥程度,減少細(xì)胞外基質(zhì)的沉積,促使肝纖維化逆轉(zhuǎn),具有很好的抗肝纖維化療效。上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化參與了大鼠肝纖維化的發(fā)展進(jìn)程,模型組E-cadherin表達(dá)的下降是其參與纖維化的證據(jù)。益氣活血方能上調(diào)E-cadherin的表達(dá),提示其可以逆轉(zhuǎn)EMT,從而逆轉(zhuǎn)肝纖維化。益氣活血方能通過下調(diào)TGF-β1、TGFβRⅡ、Smad2的表達(dá)阻斷TGF-β/TGFβRⅡ/Smads通路,從而阻斷肝纖維化進(jìn)程。鑒于TGF-β/TGFβRⅡ/Smads通路是EMT的主要通路之一,而我們的研究發(fā)現(xiàn)益氣活血方既可以逆轉(zhuǎn)EMT,又可以阻斷TGF-β/TGFβRⅡ/Smads通路,因此我們認(rèn)為益氣活血方可能是通過阻斷TGF-β/TGFβRⅡ/Smads通路,從而逆轉(zhuǎn)EMT實(shí)現(xiàn)抗肝纖維化功效。
【關(guān)鍵詞】:
【學(xué)位授予單位】:中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R259
【目錄】:
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【參考文獻(xiàn)】
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中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
1 江宇泳;王憲波;王融冰;;益氣活血方抗大鼠肝纖維化的實(shí)驗(yàn)研究[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)第二十二屆全國(guó)脾胃病學(xué)術(shù)交流會(huì)暨2010年脾胃病診療新進(jìn)展學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2010年
2 齊聰;楊紅;周華;;益氣活血方干預(yù)卵巢子宮內(nèi)膜異位囊腫術(shù)后復(fù)發(fā)的臨床療效分析[A];第十次全國(guó)中醫(yī)婦科學(xué)術(shù)大會(huì)論文集[C];2010年
3 李宇丹;胡晏珍;;益氣活血方對(duì)慢性腎衰竭患者臨床療效觀察[A];江西省中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)第九次活血化瘀學(xué)術(shù)研討會(huì)活血化瘀臨床應(yīng)用新進(jìn)展培訓(xùn)班論文集[C];2011年
4 李翠屏;鄭吉民;彭力宏;;益氣活血方對(duì)大鼠皮層神經(jīng)元缺氧凋亡影響的藥理學(xué)研究[A];首屆中國(guó)中醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技交流會(huì)論文匯編[C];2002年
5 強(qiáng)暉;黃介飛;周國(guó)雄;倪潤(rùn)洲;謝渭芬;;肝纖維化組織中細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶與膠原表達(dá)的相關(guān)性研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)消化病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編(下冊(cè))[C];2007年
6 江毅;程偉;;益氣活血方及其拆方對(duì)人血管平滑肌細(xì)胞增殖影響的觀察[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)心病分會(huì)第十次全國(guó)中醫(yī)心病學(xué)術(shù)年會(huì)暨吉林省中醫(yī)藥學(xué)會(huì)心病第二次學(xué)術(shù)會(huì)議論文精選[C];2008年
7 曾欣;朱穎煒;林勇;謝渭芬;陳岳祥;施健;楊秀疆;張新;;尿激酶型纖溶酶原激活劑及其抑制物與肝纖維化調(diào)控的實(shí)驗(yàn)研究[A];第五屆全國(guó)肝臟疾病臨床暨中華肝臟病雜志成立十周年學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年
8 鄭凱;沈洪;劉增巍;袁超;賴仁勝;周曉波;葉柏;周曉虹;陳靜;沈天華;陸為民;徐陸周;徐藝;;益氣活血方治療慢性萎縮性胃炎癌前病變的臨床研究[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)脾胃病分會(huì)第十八次學(xué)術(shù)交流會(huì)論文匯編[C];2006年
9 葛惠男;龔誠(chéng);高忠恩;李江虹;;益氣活血方預(yù)防NSAIDs胃粘膜損傷作用的臨床觀察及作用機(jī)理研究[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)脾胃病分會(huì)第二十三次全國(guó)脾胃病學(xué)術(shù)交流會(huì)論文匯編[C];2011年
10 陳俊紅;王繼;;不同中醫(yī)治法逆轉(zhuǎn)大鼠肝纖維化的病理觀察[A];中華中醫(yī)藥學(xué)會(huì)中醫(yī)、中西醫(yī)結(jié)合治療常見病研討會(huì)論文集[C];2007年
中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
1 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院肝病研究所 程勇衛(wèi) 唐望先 段瑞嫻 劉紅艷 林菊生 楊玉珍 武漢市第七人民醫(yī)院肝病所 虞滌霞;[N];保健時(shí)報(bào);2009年
2 記者 馬艷紅;[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2009年
3 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院肝病研究所 段瑞嫻 劉紅艷 程勇衛(wèi) 高嘯 林菊生 唐望先 武漢市第七醫(yī)院 虞滌霞 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)系 吳翠環(huán);[N];保健時(shí)報(bào);2009年
4 黃丁毅;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2010年
5 徐琪忠 王根華;[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2010年
6 記者 胡德榮;[N];健康報(bào);2011年
7 吳楊 楊蘇河;[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2001年
8 胡德榮;[N];健康報(bào);2004年
9 ;[N];健康報(bào);2005年
10 記者 張旭;[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2009年
中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
1 賈愛芹;清肝抑纖飲及其拆方防治大鼠肝纖維化的實(shí)驗(yàn)研究[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2010年
2 李志紅;酒精性肝纖維化中醫(yī)證候特點(diǎn)和慢肝消抗酒精性肝纖維化的分子機(jī)制[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2004年
3 段志軍;肝纖維化形成中MMP-1、TIMP-1表達(dá)及益氣軟肝方保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2003年
4 強(qiáng)暉;肝纖維化相關(guān)基因的篩選及其功能初步研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2003年
5 畢紅征;RF膠囊抗肝纖維化作用及機(jī)理研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2005年
6 朱冰;抗纖Ⅰ號(hào)方藥抗實(shí)驗(yàn)性大鼠肝纖維化作用及其分子機(jī)制研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2003年
7 彭彥輝;中藥和硒對(duì)慢性肝纖維化的預(yù)防和治療作用及其機(jī)理研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2002年
8 金玟成;解酒復(fù)方對(duì)酒精性脂肪肝大鼠肝纖維化的預(yù)防作用及機(jī)制[D];吉林大學(xué);2006年
9 鄧剛;重組Akt腺病毒對(duì)CCL_4誘導(dǎo)肝纖維化大鼠模型的影響[D];中南大學(xué);2008年
10 王文林;斯氏貍殖吸蟲致大鼠肝纖維化作用機(jī)制和治療的研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2011年
中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條
1 李川;基于上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化現(xiàn)象對(duì)益氣活血方抗大鼠肝纖維化療效及分子機(jī)制的研究[D];中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院;2013年
2 王馨;益氣活血方對(duì)大鼠心肌缺血及閏盤相關(guān)蛋白表達(dá)的影響[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2012年
3 張靜;益氣活血方對(duì)高血壓性腦卒中前狀態(tài)的影響[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2011年
4 湯微;益氣活血方對(duì)糖尿病視網(wǎng)膜病變眼底血流動(dòng)力學(xué)的影響[D];遼寧中醫(yī)藥大學(xué);2011年
5 吳雪琴;益氣活血方治療氣虛血瘀型難治性特發(fā)性血小板減少性紫癜的臨床觀察[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2010年
6 康日艷;益氣活血方治療慢性充血性心力衰竭的臨床研究[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2011年
7 劉舸;益氣活血方對(duì)消化性潰瘍病變黏膜環(huán)氧合酶-1和環(huán)氧合酶-2的調(diào)節(jié)作用研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2012年
8 沈月貞;益氣活血方對(duì)糖尿病大鼠坐骨神經(jīng)細(xì)胞凋亡及其調(diào)控相關(guān)因子的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年
9 胡結(jié)林;解毒益氣活血方對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞血管生成及STAT3信號(hào)通路干預(yù)研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2012年
10 龔誠(chéng);益氣活血方提高胃黏膜保護(hù)因子及其預(yù)防NSAIDs致急性胃黏膜損傷作用的臨床觀察[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2010年
本文關(guān)鍵詞:基于上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化現(xiàn)象對(duì)益氣活血方抗大鼠肝纖維化療效及分子機(jī)制的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):199988
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