本文關鍵詞：陽虛體質者內分泌及免疫功能變化，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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陽虛體質者內分泌及免疫功能變化

發(fā)布時間：2013-07-03 來源：安徽省醫(yī)學協會信息中心

作者：王琦, 姚實林, 董靜, 吳宏東, 吳承玉, 夏仲元, 石鶴峰, 龐國明, 鄧祺衛(wèi), 趙健雄, 蔡晶, 崔正植 【摘要】 目的：觀察陽虛體質者內分泌功能和環(huán)核苷酸系統及免疫功能的變化，探索陽虛質特征、成因與生理生化指標的關聯性。 方法：在臨床流行病學調查的基礎上，按陽虛質和平和質的診斷標準篩選陽虛質60例和平和質50例，清晨8：00～9：00空腹抽取靜脈血8 ml，3 000 r/min離心5 min分離血清，－70 ℃冰箱中保存，采用酶聯免疫吸附檢測（enzymelinked immunosorbent assay, ELISA）法測定陽虛質及平和質血清皮質酮、皮質醇、促腎上腺皮質激素（adrenocorticotrophic hormone, ACTH）、環(huán)腺苷酸（cyclic adenosine monophosphate, cAMP）、環(huán)鳥苷酸（cyclic guanosine monophosphate, cGMP）、游離三碘甲狀腺原氨酸（free triiodothyronine, FT3）、游離甲狀腺素（free thyroxine, FT4）、促甲狀腺素（thyrotropicstimulating hormone, TSH）、白細胞介素1β（interleukin1β, IL1β）和白細胞介素2（interleukin2, IL2）水平，計算cAMP/cGMP比值，并對陽虛質與平和質上述指標之間的差異進行分析。 結果：與平和質比較，陽虛質血清皮質酮、cAMP/cGMP比值、IL1β和TSH含量較高，而血清皮質醇、ACTH、cGMP及FT4含量則較低。 結論：陽虛質與下丘腦垂體腎上腺軸、下丘腦垂體甲狀腺軸功能減退,及環(huán)核苷酸系統和免疫功能紊亂具有一定的關聯性。 【關鍵詞】 陽虛; 體質; 下丘腦垂體系統; 環(huán)核苷酸; 免疫 Objective: To investigate the changes of endocrine, cyclic nucleotide and immune systems in subjects of yang deficiency constitution, and to explore the relationship among characteristics and causes of yang deficiency constitution, the physiological and biochemical parameters. Methods: Based on the diagnostic criteria for the clinical epidemiological investigation, sixty subjects of yang deficiency constitution and fifty of normal constitution were selected. Eight milliliters venous blood were taken from overnight fasted subjects at 8:009:00. The sera were obtained by centrifugation of the blood at the speed of 3 000 r/min for 5 minutes, and they were stored at －70 ℃ until use. The serum levels of corticosterone, cortisol, adrenocorticotrophic hormone (ACTH), cyclic adenosine monophosphate (cAMP), cyclic guanosine monophosphate (cGMP), free triiodothyronine (FT3), free thyroxine (FT4), thyrotropicstimulating hormone (TSH), interleukin1β and interleukin2 were measured by enzymelinked immunosorbent assay; the cAMP/cGMP ratio was also computed; and the differences of the above indexes were compared between the two types of subjects. Results: The serum levels of corticosterone, interleukin1β, TSH and cAMP/cGMP ratio of yang deficiency constitution significantly increased as compared with those of normal constitution, and the serum levels of cortisol, ACTH, cGMP and FT4 of yang deficiency constitution significantly decreased in comparison with those of normal constitution. Conclusion: Subjects of yang deficiency constitution may be not only related to hypothalamicpituitaryadrenal axis and hypothalamicpituitarythyroid axis, but also related to the functional disorders of cyclic nucleotide and immune systems. Keywords: yang deficiency; body constitution; hypothalamohypophyseal system; cyclic nucleotide; immunity 陽虛質是指陽氣不足，以虛寒現象為主要特征的體質狀態(tài)。先天稟賦不足、病后陽虧或后天生活失養(yǎng)是陽虛質的主要成因。畏寒肢冷、尿清便溏等“寒象”是陽虛質的主要特征。陽虛質對疾病和證候的影響主要表現為易患感冒、痰飲、腫脹、泄瀉，易形成虛寒證、寒濕證和血瘀證等。既往研究［1，2］已揭示陽虛證與下丘腦垂體腎上腺軸（hypothalamicpituitaryadrenal axis, HPA）、下丘腦垂體甲狀腺軸（hypothalamicpituitarythyroid axis, HPT）及免疫系統的功能變化具有一定的關聯性。本研究旨在探索陽虛質是否與上述生理功能的變化具有關聯性，進一步探討陽虛質特征及其發(fā)病機制。 　　1 資料與方法 1.1 臨床資料 1.1.1 診斷標準 由平和質和陽虛質亞量表確定。平和質亞量表條目包括：（1）您精力充沛嗎；（2）您容易疲乏嗎；（3）您說話聲音低弱無力嗎；（4）您容易忘事嗎；（5）您比一般人耐受不了寒冷（冬天的寒冷，夏天的冷空調或電扇等）嗎；（6）您的應變能力如何，能適應外界環(huán)境的各種變化嗎；（7）您容易失眠嗎。每個條目按照“沒有或（不）”、“很少”、“有時”、“經�！薄ⅰ翱偸恰狈謩e計1、2、3、4、5分；條目（2）、（3）、（4）、（5）、（7）逆向計分。計分方法分為以下2種。（1）原始分：簡單求和法，即原始分數=各個條目分值相加；（2）轉化分數：0～100分，轉化分數=（原始分－7）/28×100。判定標準：平和質轉化分≥60分，且其他8種偏頗體質轉化分均＜30分，判定為“是”；平和質轉化分≥60分，且其他8種偏頗體質轉化分為30～39分，判定為“基本是”；否則判定為“否”。本研究選擇判定為“是”者。 陽虛質亞量表條目包括：（1）您手腳發(fā)涼嗎；（2）您胃脘部、背部或腰膝部怕冷嗎；（3）您感到怕冷，衣服比別人穿得多嗎；（4）您比一般人耐受不了寒冷（冬天的寒冷，夏天的冷空調、電扇等）嗎；（5）您比別人容易患感冒嗎；（6）您吃（喝）涼的東西會感到不舒服或者怕吃（喝）涼的東西嗎；（7）您受涼或吃（喝）涼的東西后，容易腹瀉、拉肚子嗎。每個條目按照“沒有（或）不”、“很少”、“有時”、“經常”、“總是”分別計1、2、3、4、5分。計分方法同平和質。判定標準：陽虛質轉化分≥40分，判定為“是”；30～39分，判定為“傾向是”；＜30分，判定為“否”。本研究選擇判定為“是”者。 1.1.2 納入標準 （1）對象來源于20～45歲的中國漢族公民，男女不限；（2）符合“9種中醫(yī)體質調查問卷”的陽虛質與平和質診斷標準［3］；（3）對調查知情同意；（4）血常規(guī)和肝、腎功能檢測結果正常，，背景情況表中血壓正常，無既往病史。 1.1.3 排除標準 （1）不符合陽虛質及平和質標準者；（2）兼夾其他體質類型者；（3）符合明顯陽虛證者；（4）有器質性病變、傳染病或發(fā)熱者；（5）有精神疾患者；（6）未獲得知情同意者。 1.1.4 篩選結果 平和質50例（北京中醫(yī)藥大學7例，蘭州大學中西醫(yī)結合研究所6例，南京中醫(yī)藥大學10例，河南省中醫(yī)藥研究院6例，河南省開封市第一中醫(yī)院6例，江西中醫(yī)藥高等專科學校6例，福建中醫(yī)學院中西醫(yī)結合老年病研究所3例，吉林省延邊州民族醫(yī)藥研究所朝醫(yī)醫(yī)院6例），男24例，女26例。陽虛質60例（北京中醫(yī)藥大學8例，安徽中醫(yī)學院4例，蘭州大學中西醫(yī)結合研究所7例，南京中醫(yī)藥大學12例，河南省中醫(yī)藥研究院7例，河南省開封市第一中醫(yī)院7例，江西中醫(yī)藥高等�？茖W校7例，福建中醫(yī)學院中西醫(yī)結合老年病研究所3例，吉林省延邊州民族醫(yī)藥研究所朝醫(yī)醫(yī)院5例），男16例，女44例。經Pearson卡方檢驗，兩組性別比較，差異有統計學意義（χ2=5.364，P=0.021）。平和質平均年齡（34.70±7.99）歲，陽虛質平均年齡（34.57±8.30）歲，兩組年齡比較，差異無統計學意義（t=0.085，P=0.932）。 1.2 研究方法 1.2.1 樣本采集 受試對象均由協作單位按陽虛質與平和質標準篩選，并由課題組指派專家確認。告知受試者試驗目的、意義及相關注意事項。囑采血前1 d禁酒和避免勞累，女性避開月經期，清晨8：00～9：00空腹抽取靜脈血8 ml，注入普通生化管，3 000 r/min，離心5 min，分離血清，－20 ℃保存，3 d內置于生物冰內送至北京中醫(yī)藥大學中醫(yī)體質與生殖醫(yī)學研究中心，置于－70 ℃冰箱內保存，2個月內統一檢測相關指標。 1.2.2 指標檢測 采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附檢測（enzymelinked immunosorbent assay, ELISA）法測定所有指標，主要儀器為芬蘭雷勃公司的Phermo MK3型全自動酶標儀，ELISA試劑盒購自美國Technology Partners International Company (TPI Inc)。游離三碘甲狀腺原氨酸（free triiodothyronine, FT3），批號20070201，美國TPI Inc；游離未結合甲狀腺素（free thyroxine, FT4），批號20070201，美國TPI Inc；促甲狀腺素（thyrotropicstimulating hormone, TSH），批號0815H3，美國TPI Inc；皮質醇，批號0416H1，美國TPI Inc；皮質酮，批號0428H2，美國TPI Inc；促腎上腺皮質激素（adrenocorticotrophic hormone, ACTH），批號06040602，美國Rapidbio Lab (RB)；白細胞介素1β（interleukin1β, IL1β），批號01050401，美國RB；白細胞介素2（interleukin2，IL2），批號15120555，美國RB；環(huán)腺苷酸（cyclic adenosine monophosphate, cAMP），批號200703217，美國RB；環(huán)鳥苷酸（cyclic guanosine monophosphate, cGMP），批號200703218，美國RB。人cAMP或人cGMP定量酶聯免疫分析試劑盒購自尚柏生物醫(yī)學技術（北京）有限公司。ACTH、IL1β、IL2、FT3、FT4、TSH、cAMP和cGMP的測定采用ELISA法，皮質酮、皮質醇測定采用免疫競爭法。 1.2.3 統計學方法 采用SPSS 10.0軟件進行統計學分析，計量資料用x±s表示。陽虛質與平和質相關指標的比較采用獨立樣本t檢驗。用“Levene's Test for Equality of Variances”進行方差齊性檢驗，當方差顯著不齊時，取“Equal variances not assumed”時的t值和P值。當資料呈非正態(tài)分布時，采用非參數檢驗，用MannWhitney Test進行顯著性檢驗。 因陽虛質與平和質組間性別差異有統計學意義，故對每個指標均進行男女性別之間總的比較（男40例，女70例）及平和質組內（男24例，女26例）和陽虛質組內（男16例，女44例）性別之間的比較，若被測指標存在性別差異，則將男性陽虛質與男性平和質、女性陽虛質與女性平和質分別進行比較，以觀察性別對被測指標的影響。 　　2 結果 2.1 血清皮質酮、皮質醇及ACTH含量 與平和質比較，陽虛質血清皮質酮含量較高（t=－2.730，P=0.008），血清皮質醇含量則較低（t=7.588，P=0.000），血清ACTH水平亦較低（t=4.490，P=0.000）。見表1。 表1 血清皮質酮、皮質醇及ACTH含量（略） Table 1 Contents of corticosterone, cortisol and ACTH in the serum **P＜0.01, vs normal constitution group. 2.2 血清cAMP、cGMP含量及cAMP/cGMP比值 平和質與陽虛質血清cAMP含量分別為（110.38±54.78）nmol/L和（113.87±40.00）nmol/L，二者比較，差異無統計學意義（t=－0.386，P=0.700）；陽虛質血清cGMP含量（63.60±15.91）nmol/L低于平和質（73.03±17.90）nmol/L（t=2.926，P=0.004）；陽虛質血清cAMP/cGMP比值1.98±1.09則高于平和質1.52±0.64（Z=－2.035，P=0.042）。 男性陽虛質cGMP含量為（71.68±11.36）nmol/L，cAMP/cGMP比值為（1.47±0.55），分別與女性陽虛質cGMP含量（60.66±16.40）nmol/L和cAMP/cGMP比值（2.17±1.19）比較，差異有統計學意義（t=2.474，P=0.016；Z=－2.156，P=0.031）。女性陽虛質cGMP含量和cAMP/cGMP比值分別與女性平和質cGMP含量（74.96±20.89）nmol/L和cAMP/cGMP比值（1.49±0.66）比較，差異亦有統計學意義（t=3.181，P=0.002；Z=－2.370，P=0.018）。 2.3 血清FT3、FT4和TSH水平 陽虛質血清FT3含量與平和質比較，差異無統計學意義（t=－0.817，P=0.415）；與平和質比較，陽虛質血清FT4含量較低（t=2.395，P=0.019），血清TSH水平則較高（Z=－2.441，P=0.015）。見表2。 表2 血清FT3、FT4和TSH含量（略） Table 2 Contents of FT3, FT4 and TSH in the serum *P＜0.05, vs normal constitution group. 2.4 血清IL1β和IL2含量 陽虛質血清IL1β含量（96.32±35.59）ng/L高于平和質（80.30±28.52）ng/L（t=－2.567，P=0.012）；陽虛質血清IL2含量（9.38±2.99）ng/L與平和質（10.31±2.86）ng/L比較，差異無統計學意義（t=1.661，P=0.100）。 　　3 討論 中醫(yī)體質臨床流行病學預調查結果顯示陽虛質多見于女性，本次全國2萬例臨床流行病學調查結果也表明陽虛質以女性居多。流行病學調查結果符合中醫(yī)學對男女體質差異的認識。宋·朱肱《類證活人書·卷第二》提到“男子陽多而陰少”、“女子陰盛而陽微”；明·徐春甫《古今醫(yī)統大全·直指病機賦》曰：“男子陽多乎陰，可補陰以配陽�！爆F代王莉等［4］開展的2 967例體質流行病學調查結果顯示，女子多虛弱、偏頗、失調體質，與男子相比，尤以精血不足等虛弱體質為主。一般說來，男子用藥重，女子用藥輕；男子陽旺，慎用辛熱，女子陰盛，少用寒涼［5］。本研究入選的陽虛質者與平和質者在性別方面存在明顯差異，與男性陽虛質明顯少于女性有關。為探索性別差異對被測指標的影響，對每一個指標均進行男女性別間總的比較和同一體質男女性別及同一性別不同體質間的比較（僅列出兩者具有統計學意義的結果），以消除組間性別差異所造成的偏倚。 3.1 陽虛質HPA軸功能的變化 HPA軸在應激反應中發(fā)揮重要作用，所有的應激刺激均可活化HPA軸，但不同類型應激刺激的作用不同，引發(fā)HPA軸的變化也有所不同。腎上腺皮質在人體對抗損傷性刺激過程中發(fā)揮積極作用，腎上腺皮質所分泌的糖皮質激素對機體抵抗有害刺激是必需的。若腎上腺皮質功能低下，則機體抵抗力降低。皮質醇是腎上腺皮質束狀帶及網狀帶細胞合成和分泌的一種激素，其分泌受HPA調控。皮質醇在清晨血液濃度最高，在白天逐漸下降，至夜間降到最低點，大約是峰值的一半。皮質醇對人體糖、脂肪和蛋白質的代謝及維持機體水、電解質平衡等一系列生命活動起重要的調節(jié)作用。眾多學者認可皮質醇測定是了解腎上腺皮質功能的一項重要參數，是反映腎陽虛的重要指標。皮質酮作為一種糖皮質激素，能提高人體對各種不良刺激的抵抗能力，具有抗炎癥、抗過敏和抗毒性作用。應激可以使血中皮質酮升高。 皮質酮、皮質醇和ACTH是現代陰虛和陽虛研究中常選的觀測指標。有研究［1，68］證實，“陽虛”與HPA軸功能減退有密切關系，表現為血中ACTH、皮質酮和皮質醇含量降低。本研究結果顯示，與平和質比較，陽虛質血清皮質醇和ACTH含量較低，而皮質酮含量則較高，與既往陽虛證的臨床及實驗研究不盡相符。造成這種不一致的原因，與3個因素有關：（1）陽虛證臨床研究的受試對象是患有各種疾病的人，而陽虛質的受試對象為無病的人；（2）陽虛證實驗動物模型的復制方法多利用藥物如氫化可的松的不良反應；（3）皮質酮在鼠等動物體內分泌中占優(yōu)勢，而皮質醇在人體內分泌中占優(yōu)勢。陽虛質主要為腎上腺皮質功能減退，多表現為性格沉靜內向，不好運動，對寒冷環(huán)境的耐受性差。陽虛質腎上腺皮質功能低下也許可揭示其對寒冷環(huán)境的耐受性差，并反映陽虛質對外界環(huán)境的應激能力減退。 3.2 陽虛質血清環(huán)核苷酸水平的變化 環(huán)核苷酸（cAMP和cGMP）是機體傳遞信息，調節(jié)細胞代謝和影響細胞功能的重要物質，是體內兒茶酚胺和肽類激素及各種藥物作用的中間環(huán)節(jié)。神經遞質、激素及其他一些生命活性物質是通過增多或減少細胞內環(huán)核苷酸含量來對靶細胞發(fā)揮生理效應。機體的一切生命現象都依賴細胞內外信息的傳遞和調控。環(huán)核苷酸作為生物體細胞內重要的第二信使，不僅參與調節(jié)不同的生化代謝和生理功能，而且在病理反應過程中也起介導作用。cAMP和cGMP所引起的作用是相反的，如cAMP能促進脂肪、糖原分解和心肌收縮，使溶酶體酶和組胺減少；而cGMP恰恰相反。因此，有人認為環(huán)核苷酸是調節(jié)體內相對平衡的關鍵性物質，兩者關系類似中醫(yī)陰陽的對立、互根和消長［1］。 在應激反應中，cAMP和cGMP可傳遞第一信使激素的信息，從而引起靶細胞特定的生理反應。作為激素的第二信使，cAMP和cGMP含量的變化實質上是在分子生物學水平上反映了機體在應激狀態(tài)下的生理及病理狀態(tài)的改變［9］。 20世紀70年代后期，鄺安堃經過對20多種疾病的研究發(fā)現，陰虛血漿cAMP占優(yōu)勢，陽虛血漿cGMP占優(yōu)勢，提示血漿cAMP和cGMP含量改變是陰虛和陽虛的特征之一［1］。目前較一致的看法是cAMP含量升高與陰虛及cGMP含量升高或cAMP/cGMP下降與陽虛有一定的對應關系［1］。但后來有些學者的研究卻得出不同的結論。如朱新華等［10］的實驗結果提示，陽虛證小鼠血漿cAMP含量及cAMP/cGMP比值明顯增高。 本研究結果顯示，與平和質比較，陽虛質血清cAMP含量變化不大，cGMP水平較低，cAMP/cGMP比值則較高；進一步分析顯示，與男性陽虛質比較，女性陽虛質血清cGMP含量較低，cAMP/cGMP比值較高。本研究結果與鄺安堃等的研究結果［1］相左，與朱新華等［10］相似。其原因可能與本研究的陽虛質受試對象為無病人群及女性為主有關。本研究提示陽虛質與其血清環(huán)核苷酸系統的變化具有一定的關聯性，但血清環(huán)核苷酸系統的變化如何影響陽虛質“體質性狀”，尚有待進一步探索。 3.3 陽虛質HPT軸功能的變化 甲狀腺是參與機體能量代謝的內分泌腺體，三碘甲腺原氨酸（triiodothyronine, T3）和甲狀腺素（thyroxine, T4）是體內主要發(fā)揮生理效應的甲狀腺激素。T4經脫碘后轉變?yōu)門3。在生理情況下，幾乎所有的T3和T4都呈結合型，血漿中僅有0.3%的FT3和0.04%的FT4，其余部分以非共價鍵與血漿蛋白結合。FT3和FT4可以通過細胞膜進入細胞，并與細胞內受體結合而影響蛋白質合成和調節(jié)代謝。FT3和FT4不受甲狀腺結合蛋白的影響，甲狀腺功能狀態(tài)與血循環(huán)中FT3和FT4含量有密切關系，因此血清FT3和FT4含量是反映甲狀腺功能的靈敏指標。垂體分泌的TSH可刺激甲狀腺分泌T3和T4，T3和T4又反饋調節(jié)TSH的釋放。 既往研究［11，12］提示陽虛證者血清T4水平下降。本研究結果顯示，陽虛質血清FT3水平與平和質比較，差異無統計學意義；陽虛質FT4水平較平和質低，而TSH水平則較平和質高。TSH水平顯著升高與長期FT4水平顯著下降有關，這是血液循環(huán)中T4水平對TSH的正反饋調節(jié)。陽虛質多表現為形寒肢冷，與血清FT4水平顯著降低有關。但是，陽虛質是否與甲狀腺功能減退具有關聯性，尚不能得出結論。 3.4 陽虛質免疫功能的變化 IL1是各種細胞產生的低分子蛋白，是炎癥和免疫的一個重要因子，其作用為調節(jié)中性白細胞和C反應蛋白的釋放，刺激內皮細胞與中性白細胞高度黏附，促使中性白細胞脫顆粒，誘發(fā)炎性免疫反應，加重組織損傷。IL1能誘導其他炎癥細胞因子如IL6、趨化因子、黏附分子、急性時相蛋白和組織重建酶等的合成。IL1β是IL1家族的一個重要成員，可以由多種細胞如內皮細胞、B細胞或纖維細胞、表皮細胞等分泌合成，但主要由單核巨噬細胞合成。 本研究結果提示，陽虛質血清IL1β水平顯著升高。而陽虛質外周血基因表達譜研究結果也顯示陽虛質外周血白細胞IL1β基因IL1B表達顯著上調［13］。陽虛質存在體內免疫功能紊亂，血清中致炎性細胞因子水平上調。陽虛質除表現為對外界致病因子的防御能力減退外，還表現為對內源性致病因素的調節(jié)能力障礙，導致HPA軸和HPT軸的功能減退，及環(huán)核苷酸系統和細胞免疫功能的紊亂。 【參考文獻】 1 Li DT, Tian JY, Wang SH, et al. 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  本文關鍵詞：陽虛體質者內分泌及免疫功能變化，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。