本文關(guān)鍵詞：黨參多糖的分析及抗腫瘤活性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《蘭州大學(xué)》 2013年

一種酸性黨參多糖CPP1b的結(jié)構(gòu)分析及抗腫瘤活性研究

楊春霞  

【摘要】：黨參(Codonopsis pilosula)是一種常用中藥。含有多糖,皂甙,倍半萜類,多酚類,甙類,生物堿類,揮發(fā)油等多種成分。黨參多糖作為黨參中重要活性成分之一,因具有廣泛的生理活性而引起了藥學(xué)和相關(guān)工作者的廣泛關(guān)注,然而均一性的黨參多糖的研究鮮有報(bào)道。本研究系統(tǒng)的研究了黨參多糖提取、分離及純化工藝及其抗腫瘤和抗氧化活性。以期對黨參多糖的進(jìn)一步開發(fā)利用提供理論基礎(chǔ)。具體研究內(nèi)容如下： (1)黨參多糖的提取工藝研究：采用中心組合設(shè)計(jì)及響應(yīng)曲面法,以粗多糖產(chǎn)率及糖含量雙指標(biāo)進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明,兩個指標(biāo)的優(yōu)化條件有一定的的差異,而最終確定的提取工藝為：提取溫度91℃,提取時(shí)間120min,液料比9,提取次數(shù)4次。該工藝下粗多糖產(chǎn)率為為47.15%,糖含量為18.89%。 (2)黨參多糖中硒含量測定：按(1)工藝進(jìn)行黨參多糖提取,黨參多糖提取液濃縮至適當(dāng)提及,分取]/2體積,用80%乙醇沉淀多糖,冷凍干燥后得黨參總多糖CPP(粗糖),其余1/2提及一次用30%,50%,70%,80%的乙醇進(jìn)行分級沉淀,冷凍干燥后的黨參多糖CPP1、CPP2、CPP3、CPP4。采用氫化物發(fā)生原子熒光分光度法測定了CPP1,CPP2,CPP3和CPP4中的硒含量,及不同產(chǎn)地黨參總糖中的有機(jī)硒含量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)黨參中的有機(jī)硒主要分布于黨參多糖中,分級沉淀的黨參多糖硒含量主要集中在分子量較小部分 (3)黨參多糖的抗氧化作用研究：系統(tǒng)研究了不同產(chǎn)地的黨參總糖及分級黨參多糖CPP1,CPP2,CPP3,CPP4對O2-、·OH及DPPH的清除作用。對比各產(chǎn)地黨參總糖對三種自由基的清除率,文黨總糖對三種自由基的清除作用均較強(qiáng),其對自由基的清除能力依次為：·OH·DPPH·O2-.不同級分多糖對·OH及DPPH三種自由基的清除作用用顯強(qiáng)于黨參總糖。本實(shí)驗(yàn)還對比研究了CPP1純化前后的抗氧化活性。結(jié)果顯示,純化后CPP1對·O2-及·OH的清除作用變強(qiáng),而對DPPH的清除作用變?nèi)?說明多糖的純化過程對其抗氧化活性影響較大 (4)黨參多糖CPP1b的分離純化、結(jié)構(gòu)表征及抗腫瘤活性研究：A. CPP1b結(jié)構(gòu)表征：CPP1經(jīng)除蛋白、脫色素、透析、DE-52及Sephadex G200洗脫,得到三個純化的酸性黨參多糖(CPPla, CPPlb.CPP1c),重點(diǎn)研究了其中一個酸性多糖(CPPlb)的結(jié)構(gòu)。凝膠滲透色譜—多角度激光散射儀連用技術(shù)(HPGPC—MALLS)研究結(jié)果顯示其重均分子量(Mw)及均方根半徑(Rg)分別大約為1.45×105Da,29.7nm,聚分散系數(shù)Mw/Mn為1.20,在0.9%NaCl溶液中呈無規(guī)線團(tuán)結(jié)構(gòu)。進(jìn)一步通過甲基化分析、氣質(zhì)連用、一維及二維核磁分析,確定CPP1b的分子結(jié)構(gòu)為：主鏈由1→4連接的含乙酰氧基半乳糖醛酸(α-D-GalpA3Ac),1→6連接的含乙酰氧基和乙酰氨基的半乳糖(α-D-Galp3Ac4NAc),及1→2連接的鼠李糖(β-L-Rhap)組成,支鏈α-L-Arap連接于半乳糖2位。推斷CPP1b結(jié)構(gòu)的重復(fù)單元為：CPP1b的掃描電鏡(SEM)圖、透射電鏡(TEM)圖、原子力顯微鏡(AFM)圖進(jìn)一步驗(yàn)證了CPP1b的結(jié)構(gòu)。 B.CPP1b的抗腫瘤活性研究：采用噻唑藍(lán)(MTT)法研究了CPP1b在不同濃度下對人肺癌細(xì)胞A549的抑制作用,結(jié)果顯示CPP1b具有較強(qiáng)的抗腫瘤活性,且隨著濃度增加抑制活性增強(qiáng)。實(shí)驗(yàn)還研究了CPP1b對甲氨蝶呤(MTX)的輔助抗腫瘤活性結(jié)果表明CPP1b對MTX的抗腫瘤活性具有明顯的協(xié)同作用。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R284;R285
【目錄】：

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8 周林;裂褶多糖的制備與理化特性及化學(xué)改性研究[D];華南理工大學(xué);2006年

9 劉紅椿;桔霉素三聚體Tricitrinol B的抗腫瘤活性及機(jī)制研究[D];中國海洋大學(xué);2009年

10 崔巖;Edenia gomezpompae的抗腫瘤活性及其生物學(xué)特性研究[D];吉林大學(xué);2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 楊春霞;一種酸性黨參多糖CPP1b的結(jié)構(gòu)分析及抗腫瘤活性研究[D];蘭州大學(xué);2013年

2 王毅;黨參多糖硫酸酯的制備及生物學(xué)活性初步研究[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2013年

3 朱瑞;黨參多糖的分析及抗腫瘤活性研究[D];東北師范大學(xué);2013年

4 王廣;黨參多糖對腸道菌群失調(diào)小鼠的調(diào)整作用機(jī)制的初步研究[D];佳木斯大學(xué);2010年

5 王鑫瀅;黃芩與黨參多糖的提取及其體外抗NDV活性研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

6 閆莉萍;抗腫瘤活性海洋放線菌的分離篩選及其16S rDNA多樣性分析[D];華南熱帶農(nóng)業(yè)大學(xué);2003年

7 孫晶波;多皺軟海綿抗腫瘤活性成分研究[D];延邊大學(xué);2005年

8 于志斌;利用核糖體工程技術(shù)開拓海洋微生物藥用新資源的研究[D];中國海洋大學(xué);2005年

9 高林;MCP多糖的制備、分析鑒定及其抗腫瘤作用的研究[D];天津大學(xué);2005年

10 徐仲淼;含氮類黃酮衍生物的設(shè)計(jì)、合成和抗腫瘤活性研究[D];浙江大學(xué);2006年

  本文關(guān)鍵詞：黨參多糖的分析及抗腫瘤活性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：172993