目的:黨參(Codonopsis Radix)為中醫(yī)治病常用的補中益氣良藥。2010版《中國藥典》規(guī)定,黨參來源于Codonopsis pilosula(Franch.)Nannf.、素花黨參Codonopsis pilosula Nannf.var.modesta(Nannf.)L.T.Shen.或川黨參Codonopsis tangshen Oliv.[1],栽培歷史悠久,目前市面上多為栽培品。由于黨參種植范圍廣,產(chǎn)地自然環(huán)境、栽培加工方式等不同,黨參藥材質(zhì)量參差不齊。藥典還對黨參的性狀鑒別、顯微鑒別、黨參炔苷TLC鑒別和浸出物等檢查項做了規(guī)定。產(chǎn)于山西古潞州(今長治市、晉城市等地)的黨參統(tǒng)稱為“潞黨參”。潞黨參是著名的山西省道地藥材,質(zhì)量上乘,栽培歷史悠久。有關(guān)黨參的各地方標準及不同基源黨參鑒別的文獻報道,多性狀鑒別和顯微鑒別項。因此,在現(xiàn)有質(zhì)量標準基礎(chǔ)上,以高效液相色譜指紋圖譜入手,為進一步完善潞黨參地方質(zhì)量標準提供方法技術(shù),為黨參(潞黨參)標準制訂和質(zhì)量控制提供方法,同時為不同基源黨參鑒別、黨參藥材生產(chǎn)加工等提供理論依據(jù)。方法:采用反相高效液相色譜法(RP-HPLC色譜法),測定74批次黨參藥材中主要成分黨參炔苷和蒼術(shù)內(nèi)酯III的含量,并比較差異;通過RP-HPLC色譜法,研究三種基源的54批次黨參藥材的HPLC特征圖譜,采用中藥色譜指紋圖譜相似度評價軟件(2.0版)進行相似度評價,比較潞黨參與其他來源黨參特征圖譜的差異;潞黨參甲醇超聲提取物經(jīng)D101大孔樹脂、ODS柱層析等反復(fù)分離純化后,得到8個化合物,通過質(zhì)譜、核磁共振氫譜和碳譜等光譜學(xué)方法檢測及查閱相關(guān)等,確定化合物分子結(jié)構(gòu)。結(jié)果:1不同來源黨參成分含量測定不同來源黨參樣品含量差異明顯。不同基源黨參,均可檢測到黨參炔苷,部分可檢測到蒼術(shù)內(nèi)酯III。潞黨參中黨參炔苷和蒼術(shù)內(nèi)酯III含量分別為0.356mg·g-1和0.035mg·g-1,含量較高,品質(zhì)較好,但噴施壯根靈后,兩種成分均顯著降低。素花黨參中10年生鳳黨含量最高,為2.236 mg·g-1,其次為紋黨(3~4年生),顯著高于其他產(chǎn)地、基源黨參,推測生長年限對黨參炔苷含量影響較大。而蒼術(shù)內(nèi)酯III,在基源為黨參的野生臺黨中含量最高,為0.174 mg·g-1,潞黨參次之,為0.035 mg·g-1,顯著高于同基源白條黨,川黨參未檢測到,素花黨參中含量較低或檢測不到,認為基源對蒼術(shù)內(nèi)酯III含量影響最大,可將蒼術(shù)內(nèi)酯III作為反映潞黨參道地性的特征成分。結(jié)果表明,潞黨參品質(zhì)好,具有道地性。2不同來源黨參HPLC特征圖譜研究2.1潞黨參HPLC特征圖譜通過對20批次潞黨參的特征圖譜進行匹配,建立了潞黨參對照藥材的HPLC特征圖譜,將5號峰(黨參炔苷)作為參照峰,確定7個特征峰的相對保留時間,分別為:0.195(峰1)、0.323(峰2)、0.443(峰3)、0.616(峰4)、1.00(峰5)、1.01(峰6)、1.36(峰7)。將codonopyrrolidium B、黨參苷I、黨參炔苷、紫丁香苷和蒼術(shù)內(nèi)酯III通過標準品加入法,指認了HPLC特征圖譜中的5個特征峰分別為:1號峰—codonopyrrolidium B、2號峰—紫丁香苷,4號峰—黨參苷I,5號峰—黨參炔苷,7號峰—蒼術(shù)內(nèi)酯III。2.2不同來源黨參HPLC特征圖譜相似度比較通過中藥色譜指紋圖譜相似度評價軟件(2.0版)對54批次不同來源黨參HPLC特征圖譜進行相似度評價,結(jié)果顯示,潞黨參與臺黨相似度最高在0.8以上,與白條黨相似度為0.4~0.8,不同產(chǎn)地白條黨之間相似度差異明顯;與素花黨參和川黨參的相似度僅為0.1~0.4。表明黨參基源差異大于產(chǎn)地差異,不同來源黨參質(zhì)量存在明顯差異。2.3潞黨參與其他來源黨參HPLC特征圖譜比較相同基源黨參比較。潞黨參與白條黨和臺黨,基源植物相同,均為黨參。白條黨HPLC特征圖譜中7個峰面積均值顯著低于潞黨參,尤其是1號(codonopyrrolidium B)、4號(黨參苷I)、6號和7號峰(蒼術(shù)內(nèi)酯III),而且相對峰面積顯著區(qū)別于潞黨參;與臺黨差異主要為野生黨參未檢測到6號峰,1號(codonopyrrolidium B)、3號、7號(蒼術(shù)內(nèi)酯III)峰面積均值顯著高于潞黨參。不同基源黨參比較,川黨參HPLC特征圖譜中,未檢測到6號和7號峰(蒼術(shù)內(nèi)酯III),1號(codonopyrrolidium B)、3號和4號(黨參苷I)峰的峰面積均值顯著低于潞黨參,相對峰面積差異顯著。素花黨參HPLC特征圖譜均未檢測到6號峰,1號(codonopyrrolidium B)、4號(黨參苷I)和7號(蒼術(shù)內(nèi)酯III)峰面積均值顯著低于潞黨參,相對峰面積差異顯著,但2號(紫丁香苷)和5號(黨參炔苷)峰的峰面積均值高于潞黨參。2.4不同栽培與加工處理方式黨參比較噴施壯根靈后,黨參HPLC特征圖譜發(fā)生顯著變化,相似度降低;不同采收年限黨參HPLC特征圖譜比較,4號(黨參苷I)、6號和7號(蒼術(shù)內(nèi)酯III)峰差異明顯;生長年限較長的黨參中未檢測到6號峰。熏硫后黨參與白條黨相似度僅為0.4~0.5,特征圖譜中,僅主要檢測到2號(紫丁香苷)、4號(黨參苷I)和5號(黨參炔苷)峰,峰面積顯著低于潞黨參。3黨參特征性成分的分離鑒定潞黨參中分離確定3個化合物結(jié)構(gòu)分別為codonopyrrolidium B、黨參苷I、黨參炔苷,和5個疑似成分為三個寡糖和β-槐糖正己醇苷、9,10,13-三羥基-反-11-十八烯酸。codonopyrrolidium B在潞黨參中首次分離到。結(jié)論:潞黨參中黨參炔苷和蒼術(shù)內(nèi)酯III含量較高,質(zhì)量好,具有道地性。黨參因基源、產(chǎn)地和栽培、加工處理方式的不同,特征圖譜有明顯差異;不同基源、產(chǎn)地黨參HPLC特征圖譜差異明顯,潞黨參比川黨參多檢測到6號和7號(蒼術(shù)內(nèi)酯III)峰,比素花黨參多未檢測到6號峰,比白條黨峰面積高;而且,潞黨參中4號峰(黨參苷I)峰面積最高,均可檢測到6號和7號峰(蒼術(shù)內(nèi)酯III)且峰面積明顯較高,可作為反映潞黨參道地性的特征成分。潞黨參HPLC特征圖譜,能夠體現(xiàn)潞黨參的獨特性和道地性,為潞黨參質(zhì)量控制、標準制訂提供了依據(jù),同時也可以鑒別潞黨參與川黨參和素花黨參,為黨參生產(chǎn)加工方式的研究提供理論依據(jù)。

【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R284;O657.72
【目錄】：

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