本文關(guān)鍵詞：基于UPLC Q-TOF MS技術(shù)對(duì)四物湯藥效物質(zhì)基礎(chǔ)深入研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《安徽醫(yī)科大學(xué)》 2015年

基于UPLC-QTOF MS技術(shù)的四物湯灌胃大鼠代謝組學(xué)初步研究

徐王彥君  

【摘要】：目的：建立SD大鼠血清、尿液固有成分標(biāo)簽庫(kù),用以區(qū)分內(nèi)源性代謝物與外源性物質(zhì),為大鼠灌胃四物湯后的代謝組學(xué)研究提供基礎(chǔ)；對(duì)大鼠進(jìn)行單次和多次四物湯灌胃,展開(kāi)血清、尿液代謝組學(xué)初步研究,探討正常大鼠灌胃四物湯后血清、尿液代謝物的變化,并以?xún)?nèi)源性代謝物的變化情況探索四物湯的藥效機(jī)制。方法：本研究主要采用UPLC-QTOF MS技術(shù),對(duì)正常SD大鼠的血清、尿液成分進(jìn)行檢測(cè)。首先,通過(guò)自主建立的Searcher軟件將實(shí)測(cè)結(jié)果與離線(xiàn)HMDB數(shù)據(jù)庫(kù)相匹配,進(jìn)而建立包括大鼠血清、尿液成分全部實(shí)測(cè)數(shù)據(jù)及預(yù)鑒別化學(xué)結(jié)構(gòu)等多種信息在內(nèi)的SD大鼠血清、尿液固有成分?jǐn)?shù)據(jù)庫(kù);再利用UPLC-QTOF MS技術(shù)對(duì)單次和多次灌胃四物湯的SD大鼠血清、尿液進(jìn)行檢測(cè),將給藥組大鼠血清、尿液數(shù)據(jù)與空白組大鼠血清、尿液數(shù)據(jù)分別進(jìn)行PCA, OPLS-DA分析,選取差異化合物與SD大鼠血清、尿液固有成分?jǐn)?shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行匹配；最后對(duì)通過(guò)一級(jí)質(zhì)譜精確質(zhì)荷比分析得到的預(yù)鑒別結(jié)構(gòu)進(jìn)行與標(biāo)準(zhǔn)品比較,二級(jí)質(zhì)譜碎片分析,進(jìn)一步驗(yàn)證鑒別結(jié)果。結(jié)果：本研究建立了SD大鼠固有成分?jǐn)?shù)據(jù)庫(kù),不僅包含大鼠血清、尿液成分的全部實(shí)測(cè)數(shù)據(jù),還通過(guò)自主建立的預(yù)鑒別軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理。血清樣品在正離子模式下得到950個(gè)有效信號(hào),其中155個(gè)信號(hào)可推測(cè)化學(xué)結(jié)構(gòu)；在負(fù)離子模式下得到1280個(gè)有效信號(hào),其中190個(gè)可推測(cè)化學(xué)結(jié)構(gòu);得到15種經(jīng)多態(tài)離子互證的化學(xué)成分。尿液樣品在正離子模式下得到2260個(gè)有效信號(hào),其中1060個(gè)可推測(cè)化學(xué)結(jié)構(gòu)；在負(fù)離子模式下得到3000個(gè)有效信號(hào),其中1270個(gè)可推測(cè)化學(xué)結(jié)構(gòu)；得到92種經(jīng)多態(tài)離子互證的化學(xué)成分。七個(gè)不同時(shí)間點(diǎn)四物湯單次灌胃給藥后,在大鼠血清中共得到821種差異性成分,其中正離子模式下得到437種差異物,負(fù)離子模式下得到384種差異物。多次灌胃四物湯后,在大鼠血清中共得到182種差異性成分,正離子模式140種,負(fù)離子模式42種。通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)品比較和二級(jí)質(zhì)譜分析,進(jìn)一步驗(yàn)證了包含肌酸結(jié)構(gòu)的化合物,檸檬酸,11-脫氫皮甾醇等多種內(nèi)源性成分在血清中的含量發(fā)生了變化。單次和多次灌胃四物湯后的大鼠尿液中,正、負(fù)離子模式下共得到136種和77種差異化合物。通過(guò)二級(jí)質(zhì)譜分析進(jìn)一步驗(yàn)證了4-庚酮,癸二酸,3-Hydroxysebacic acid或2-Hydroxydecanedioic acid,甲基腺嘌呤,5-Hydroxy-6-methoxyindole glucuronide或6-Hydroxy-5-methoxyindole glucuronide, N-Acetyl-7-O-acetylneuraminic acid 及 Formylanthranilic acid或Noradrenochrome等多種成分在給予四物湯后在體內(nèi)的含量產(chǎn)生了變化。結(jié)論：本研究建立了SD大鼠血清、尿液固有成分?jǐn)?shù)據(jù)庫(kù),為進(jìn)行四物湯灌胃后的大鼠代謝組學(xué)研究提供了前提條件,有效地區(qū)分了生物體內(nèi)源性成分與四物湯藥源性成分；鑒別并探討了多種灌胃四物湯后在大鼠血清、尿液中發(fā)生含量變化的內(nèi)源性成分及其生理意義,進(jìn)一步推測(cè)了四物湯可能發(fā)揮的功效。本研究從內(nèi)源性代謝物含量變化的角度為探討四物湯的藥理作用提供了參考。

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：安徽醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R965;O657.63
【目錄】：

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中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 徐王彥君;基于UPLC-QTOF MS技術(shù)的四物湯灌胃大鼠代謝組學(xué)初步研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2015年

2 尤卓瑩;“四物湯”中藥美白化妝品的開(kāi)發(fā)及其美白作用機(jī)制研究[D];廣東藥學(xué)院;2015年

3 李明;四物湯及其加味方的藥效作用比較[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2002年

4 李偉;基于顯微圖像技術(shù)的四物湯調(diào)節(jié)微循環(huán)機(jī)制研究[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2010年

5 王玥;四物湯證治規(guī)律理論研究[D];河南中醫(yī)學(xué)院;2014年

6 佟麗;應(yīng)用基因芯片技術(shù)研究四物湯補(bǔ)血作用機(jī)理[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2003年

7 練杭蕓;基于UPLC Q-TOF MS技術(shù)對(duì)四物湯藥效物質(zhì)基礎(chǔ)深入研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2014年

8 葉亮;四物湯產(chǎn)生源流及其組成藥物的相關(guān)研究[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2009年

9 袁海梅;芩術(shù)四物湯治療原發(fā)性痛經(jīng)的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2013年

10 錢(qián)志平;四物湯對(duì)血虛大鼠血管內(nèi)皮損傷的干預(yù)作用[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2009年

  本文關(guān)鍵詞：基于UPLC Q-TOF MS技術(shù)對(duì)四物湯藥效物質(zhì)基礎(chǔ)深入研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號(hào)：120618