目的探討山楂葉總黃酮通過調(diào)控miR-133b改善缺氧復(fù)氧誘導(dǎo)的神經(jīng)細胞損傷。方法山楂葉總黃酮(10、30、90 mg/L)培養(yǎng)SH-SY5Y細胞24 h后,構(gòu)建缺氧復(fù)氧(H/R)細胞模型;將miR-NC、miR-133b、anti-miR-NC、anti-miR-133b質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至SH-SY5Y細胞6 h,加入90 mg/L山楂葉總黃酮處理24 h,再進行缺氧復(fù)氧處理。RT-PCR檢測miR-133b、RBMX mRNA表達,Western blot檢測RBMX、Bax、Bcl-2蛋白表達,采用試劑盒分別檢測LDH、SOD、MDA水平,流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡,雙熒光素酶報告基因?qū)嶒灆z測熒光活性。結(jié)果預(yù)處理SH-SY5Y細胞,山楂葉總黃酮能上調(diào)H/R誘導(dǎo)的神經(jīng)細胞SOD水平,下調(diào)LDH、MDA水平,抑制Bax、RBMX表達及細胞凋亡率,促進Bcl-2、miR-133b表達(P<0.05),與H/R誘導(dǎo)的神經(jīng)細胞過表達miR-133b結(jié)果一致。且miR-133b靶向調(diào)控RBMX的表達,抑制miR-133b表達逆轉(zhuǎn)了山楂葉總黃酮對H/R誘導(dǎo)的神經(jīng)細胞損傷的改善作用。結(jié)論山楂葉總黃酮通過...

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【文章目錄】：
1 材料
    1.1 細胞株
    1.2 藥物與試劑
    1.3 儀器
2 方法
    2.1 H/R模型建立
    2.2 細胞轉(zhuǎn)染及分組
    2.3 RT-PCR檢測細胞miR-133b、RBMXmRNA表達
    2.4 Western blot法檢測RBMX、Bax、Bcl-2蛋白表達
    2.5 檢測LDH、SOD、MDA水平
    2.6 流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡
    2.7 熒光素酶報告基因?qū)嶒灆z測miR-133b對RBMX的靶向調(diào)控
    2.8 統(tǒng)計學分析
3 結(jié)果
    3.1 山楂葉總黃酮對H/R誘導(dǎo)的神經(jīng)細胞損傷的影響
    3.2 山楂葉總黃酮對H/R誘導(dǎo)的神經(jīng)細胞中miR-133b、RBMX表達的影響
    3.3 miR-133b靶向調(diào)控RBMX的表達
    3.4 miR-133b過表達對H/R誘導(dǎo)的神經(jīng)細胞損傷的影響
    3.5 抑制miR-133b表達逆轉(zhuǎn)了山楂葉總黃酮對H/R誘導(dǎo)的神經(jīng)細胞損傷的作用
4 討論



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