【目的】研究茯苓菌液態(tài)發(fā)酵合成三萜的過(guò)程,通過(guò)最佳調(diào)控金屬離子及條件篩選、培養(yǎng)基優(yōu)化、轉(zhuǎn)錄組分析優(yōu)選出最佳液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)條件。【方法】1.最佳調(diào)控條件研究:以菌絲體干重及茯苓三萜含量為考察指標(biāo),優(yōu)選出最佳調(diào)控金屬離子、最佳濃度、最佳添加時(shí)間。2.培養(yǎng)基優(yōu)化研究:在最佳調(diào)控條件的基礎(chǔ)上,使用Box-Benhnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)得出最佳培養(yǎng)基配比。3.轉(zhuǎn)錄組分析研究:通過(guò)轉(zhuǎn)錄組測(cè)序,分析鋅離子調(diào)節(jié)茯苓代謝的機(jī)制,找出鋅離子調(diào)控茯苓三萜合成的核心位點(diǎn)�！窘Y(jié)果】1.在發(fā)酵48h時(shí)加入200μmol/L ZnSO₄時(shí)茯苓菌在液態(tài)發(fā)酵體系中細(xì)胞生長(zhǎng)與三萜類合成能得到最好的促進(jìn)作用,結(jié)果為DCW2.99g/L、三萜27.22mg/L。2.通過(guò)采用Box-Benhnken試驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)茯苓三萜發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行四因素三水平的響應(yīng)面分析,得出最佳培養(yǎng)基配方:葡萄糖濃度為25.81g/L、酵母浸膏濃度為9.90g/L、硝酸鉀濃度為7.50g/L、硫酸鋅濃度為265.43μmol/L。該最優(yōu)條件下茯苓三萜的產(chǎn)量為31.37±2.29mg/L。3.通過(guò)轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析,得出5個(gè)關(guān)鍵基因參與萜類代謝調(diào)控,...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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圖2-1金屬離子對(duì)茯苓三萜合成的影響

圖2-1金屬離子對(duì)茯苓三萜合成的影響Fig.2-1EffectofmetalionsontriterpenesofPoriacocos2.3.2不同ZnSO4濃度對(duì)茯苓三萜合成的影響上述試驗(yàn)可知鋅離子可顯著促進(jìn)液態(tài)發(fā)酵體系下茯苓三萜的合成，本實(shí)驗(yàn)著

圖2-2不同濃度ZnSO4對(duì)茯苓三萜合成的影響

圖2-2不同濃度ZnSO4對(duì)茯苓三萜合成的影響Fig.2-2EffectofdifferentconcentrationZnSO4ontriterpenesofPoriacocos2.3.3不同ZnSO4添加時(shí)間對(duì)茯苓三萜合成的影響

圖2-3不同發(fā)酵時(shí)間添加ZnSO4對(duì)茯苓三萜合成的影響

圖2-3不同發(fā)酵時(shí)間添加ZnSO4對(duì)茯苓三萜合成的影響Fig.2-3EffectsofaddingZnSO4atdifferenttimesontriterpenesofPoriacocos2.4討論與小結(jié)

圖4-1信息分析流程圖

圖4-1信息分析流程圖Fig.4-1Informationanalysisflow

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