目的:探討山莨菪堿(Ani)對(duì)5-氟尿嘧啶(5-Fu)誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)作用,為從細(xì)胞水平逐步深入到分子生物學(xué)的基因、蛋白表達(dá)的研究提供依據(jù)。方法:體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞株(HUVECs),建立5-Fu誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷模型。將HUVECs隨機(jī)分為對(duì)照組、Ani組、5-Fu組、Ani+5-Fu組。采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞活力;采用流式細(xì)胞術(shù)和測(cè)定試劑盒分別檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)和過(guò)氧化氫酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性;采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡。結(jié)果:10mmol/L 5-Fu作用HUVECs 24 h時(shí)為最佳損傷濃度。當(dāng)Ani濃度為25 mg/L,作用時(shí)間為4 h時(shí),對(duì)細(xì)胞的保護(hù)效果最佳。與對(duì)照組相比,5-Fu組中ROS水平顯著升高,SOD、CAT的活性顯著降低(P<0.05);與5-Fu組相比,Ani+5-Fu組中ROS水平顯著降低,SOD、CAT活性顯著升高(P<0.05)。與對(duì)照組相比,5-Fu組可見(jiàn)大量早期凋亡細(xì)胞(P<0.05);Ani+5-Fu組的細(xì)胞凋亡率較5-Fu組顯著降低(P<0.05)。結(jié)論:Ani可通過(guò)抑制氧化應(yīng)激...

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圖1Ani對(duì)5-Fu誘導(dǎo)HUVECs內(nèi)ROS產(chǎn)生的影響

由檢測(cè)結(jié)果得知，對(duì)照組、Ani組、5-Fu組、Ani+5-Fu組中ROS陽(yáng)性細(xì)胞率分別為(0.090±0.010)%、(5.823±0.107)%、(70.227±0.650)%和(59.373±0.593)%。與對(duì)照組相比，5-Fu組中ROS水平顯著升高（P<0.05）；與5-....

圖2Ani對(duì)5-Fu誘導(dǎo)HUVECs內(nèi)ROS產(chǎn)生的影響

圖1Ani對(duì)5-Fu誘導(dǎo)HUVECs內(nèi)ROS產(chǎn)生的影響2.4.2Ani對(duì)5-Fu誘導(dǎo)HUVECs內(nèi)SOD、CAT活性的影響

圖3Ani對(duì)5-Fu誘導(dǎo)HUVECs凋亡的影響

散點(diǎn)圖結(jié)果顯示，對(duì)照組可見(jiàn)少量早期凋亡細(xì)胞，細(xì)胞凋亡率為(4.427±0.031)%，與對(duì)照組相比，5-Fu組可見(jiàn)大量早期凋亡細(xì)胞，凋亡率為(23.617±0.202)%(P<0.05);Ani+5-Fu組的細(xì)胞凋亡率為(16.200±0.289)%，較5-Fu組顯著降低（P<0....

圖4Ani對(duì)5-Fu誘導(dǎo)HUVECs凋亡的影響

圖3Ani對(duì)5-Fu誘導(dǎo)HUVECs凋亡的影響3討論

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