目的本課題應(yīng)用雙環(huán)己酮草酰二腙(Cuprizone,CPZ)誘導(dǎo)C57BL/6小鼠建立中樞神經(jīng)系統(tǒng)(Central nervous system,CNS)脫髓鞘模型,給予白果內(nèi)酯(Bilobalide,BB)進(jìn)行干預(yù)。觀察給藥后動(dòng)物的行為學(xué)表現(xiàn)、髓鞘保護(hù)、外周免疫調(diào)節(jié)及抑制小膠質(zhì)細(xì)胞向M1型活化的細(xì)胞和分子機(jī)制。闡明BB治療CNS脫髓鞘損害的靶點(diǎn)和途徑,為今后應(yīng)用BB治療多發(fā)性硬化(multiple sclerosis,MS)提供科學(xué)的理論依據(jù)。方法本實(shí)驗(yàn)采用6周齡C57BL/6雄性小鼠,建立CPZ誘導(dǎo)的C57/BL6小鼠脫髓鞘模型。小鼠分為正常組、模型組、BB治療組,每組8只小鼠,正常組小鼠正常飼料飼育6周,模型組和BB治療組小鼠用含0.2%CPZ的粉末飼料飼育6周。在喂食后的第四周末(第28天)開(kāi)始,BB治療組腹腔注射給予BB,每日給藥一次,連續(xù)給藥至喂食后的第六周末(第42天),同時(shí)正常組、模型組每日給予生理鹽水腹腔注射,并在給藥期間進(jìn)行行為學(xué)檢測(cè),并從造模開(kāi)始記錄動(dòng)物的體重。在第六周結(jié)束時(shí)處死動(dòng)物,眼眶取血,取脾臟、腦組織,分離脾臟單個(gè)核細(xì)胞(mononuclear cells...

【文章頁(yè)數(shù)】：52 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.BB治療CPZ誘導(dǎo)脫髓鞘小鼠的臨床和病理學(xué)表現(xiàn)（a）CPZ喂養(yǎng)4周后，腹腔注射BB，在持續(xù)2周的治療期間仍用含0.2％CPZ粉末的毒餅干喂養(yǎng)

11圖1.BB治療CPZ誘導(dǎo)脫髓鞘小鼠的臨床和病理學(xué)表現(xiàn)（a）CPZ喂養(yǎng)4周后，腹腔注射BB，在持續(xù)2周的治療期間仍用含0.2％CPZ粉末的毒垂直木測(cè)試和高架十字迷宮測(cè)試用于檢測(cè)小鼠的行為學(xué)表現(xiàn)。（b）在CPZ喂養(yǎng)6周后，染色評(píng)估脫髓鞘的病理學(xué)變....

圖2.三組動(dòng)物脾臟的體積和重量在CPZ喂養(yǎng)的小鼠中，BB恢復(fù)了脾臟的體積和重量

模型組胼胝體內(nèi)著色面積為（9.67±2.13）*102，BB治療組為（19.86，兩組比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性差異（p＜0.05）。我們進(jìn)一步利用成熟少突標(biāo)志物O4+抗體進(jìn)行免疫熒光染色，與正常小鼠相比，CPZ喂養(yǎng)小鼠的大的表達(dá)和O4少突膠質(zhì)細(xì)胞的表達(dá)明顯減少（圖1d....

圖3.三組小鼠MOG抗體檢測(cè)結(jié)果

圖3.三組小鼠MOG抗體檢測(cè)結(jié)果(a)ELISA測(cè)定血清、培養(yǎng)上清液和腦組織勻漿中MOG35-55抗體的濃度。（b和c）通過(guò)斑點(diǎn)印檢測(cè)MOG35-55抗體的濃度和特異性。（d）通過(guò)ELISA測(cè)量培養(yǎng)上清液中IL-1β、IL-6和TNF-α濃度。（....

圖4.三組小鼠IgG和O4+少突膠質(zhì)細(xì)胞染色結(jié)果

16圖4.三組小鼠IgG和O4+少突膠質(zhì)細(xì)胞染色結(jié)果（a）小鼠腦中MBP免疫組織化學(xué)染色的計(jì)算機(jī)繪圖。藍(lán)色方塊連接b和c中的免疫組織化學(xué)位點(diǎn)（b）在正常小鼠腦中，通過(guò)使用來(lái)自CPZ喂養(yǎng)的小鼠的MOG抗體+血清檢測(cè)MOGIgG與腦的紋體和腹側(cè)蒼白....

本文編號(hào)：3964532