目的采用HPLC法測定復(fù)方甘草片中甘草苷和甘草酸的含量。方法采用替代對照品內(nèi)加入法,以橙皮苷為替代對照品,通過測定甘草苷和甘草酸銨與橙皮苷的相對校正因子,利用相對校正因子計算復(fù)方甘草片中甘草苷和甘草酸的含量。采用Welch Ultimate C18色譜柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%三乙胺溶液(用磷酸調(diào)p H2.5)為流動相,梯度洗脫,甘草苷、橙皮苷、甘草酸銨的檢測波長分別為276、284、252 nm,柱溫30℃,流速1.0 m L·min-1。結(jié)果33.22～498.30 ng甘草苷、49.35～740.20 ng橙皮苷、0.4330～6.4951μg甘草酸銨與其峰面積有良好的線性關(guān)系(r分別為0.9995、0.9992、0.9993);甘草苷和甘草酸銨與橙皮苷的相對校正因子分別為1.0814、0.4492;甘草苷和甘草酸的平均回收率分別為98.82%、99.05%。結(jié)論所用方法經(jīng)濟(jì)、快速、實用,可用于復(fù)方甘草片中甘草苷和甘草酸的含量測定。

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【部分圖文】：

圖1混合對照品(A)和橙皮苷-供試品混合(B)溶液的紫外光譜圖

在溶液A色譜圖提取的甘草苷、橙皮苷、甘草酸銨紫外光譜圖中，甘草苷、橙皮苷、甘草酸銨分別在276、284、252nm處有最大吸收(圖1)，故選擇這3個波長。1.2.3色譜條件

圖2各溶液在252(A)、276(B)、284(C)nm處的高效液相色譜圖

取適量溶液A～C、空白溶劑，按“1.2.3”項色譜條件測定，記錄色譜圖，在溶液C的色譜圖中有與溶液A色譜圖中甘草苷、橙皮苷和甘草酸銨對應(yīng)的色譜峰，各組分色譜峰與其相鄰色譜峰的分離度均大于1.5，在溶液B的色譜圖中有與溶液A色譜圖中甘草苷和甘草酸銨相對應(yīng)的色譜峰，且溶液B的色譜圖中....

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