目的:去乙酰氧母菊素(leucodin)是一種倍半萜內(nèi)酯,分離于茵陳蒿的地上部分。研究發(fā)現(xiàn)茵陳蒿具有一定的抗炎和保肝活性,但仍未確定來自茵陳蒿的生物活性成分leucodin是否能改善乙醇誘導(dǎo)的肝細(xì)胞損傷并伴有炎癥。本研究采用了脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)聯(lián)合刺激幾種類型的巨噬細(xì)胞,以及肝細(xì)胞暴露于乙醇的模型,以研究leucodin如何通過嘌呤受體P2X配體門控性離子通道7(purinergic receptor P2Xligand-gated ion channel 7,P2X7R)途徑抑制巨噬細(xì)胞中的炎癥反應(yīng),并減輕乙醇誘導(dǎo)的肝細(xì)胞中的脂質(zhì)蓄積。方法:采用小鼠腹腔巨噬細(xì)胞,小鼠骨髓來源的巨噬細(xì)胞和人巨噬細(xì)胞THP-1細(xì)胞等若干種類巨噬細(xì)胞,用不同濃度leucodin(1μM和5μM)預(yù)處理1小時(shí),然后用LPS和ATP刺激。通過蛋白印跡分析IL-1β、P2x7R和NLRP3的蛋白表達(dá)水平。將對(duì)數(shù)生長期的HepG2細(xì)胞暴露于乙醇以誘導(dǎo)脂質(zhì)沉積。在此之前用不同濃度的leucodin(1μM和5μM...

【文章頁數(shù)】：39 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
前言
第一章 實(shí)驗(yàn)材料和方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑
        1.1.1 主要實(shí)驗(yàn)器材
        1.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的分離
        1.2.2 小鼠骨髓源巨噬細(xì)胞的分離
        1.2.3 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.4 細(xì)胞存活率測定
        1.2.5 一氧化氮(NO)的測定
        1.2.6 蛋白質(zhì)印跡分析
        1.2.7 免疫細(xì)胞化學(xué)染色
        1.2.8 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)
        1.2.9 統(tǒng)計(jì)分析
第二章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    2.1 LPS/ATP刺激小鼠腹腔巨噬細(xì)胞釋放成熟IL-1β
    2.2 去乙酰氧母菊素在小鼠腹腔巨噬細(xì)胞中通過P2x7R抑制炎癥反應(yīng)
    2.3 去乙酰氧母菊素通過P2x7R-NLRP3軸抑制THP-1巨噬細(xì)胞中LPS/ATP誘導(dǎo)的IL-1β裂解
    2.4 去乙酰氧母菊素通過P2x7R-NLRP3軸抑制小鼠BMDMs中LPS/ATP誘導(dǎo)的IL-1β裂解
    2.5 去乙酰氧母菊素抑制乙醇暴露的脂肪肝細(xì)胞中的脂質(zhì)沉積
第三章 討論
第四章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3928408