目的細菌感染是時刻困擾著醫(yī)學(xué)臨床治療的主要問題之一,抗生素的濫用導(dǎo)致多重耐藥菌問題日益突出。當前,尋找新抑菌途徑和研發(fā)新型抗菌藥是藥學(xué)發(fā)展的重要方向之一。群體感應(yīng)抑制劑(Quorum sensing inhibitors,QSI)能通過不同途徑干預(yù)群體感應(yīng)系統(tǒng)中的自誘導(dǎo)信號分子,達到抑制毒力因子產(chǎn)生與生物膜形成。本研究針對銅綠假單胞菌(Pseudomonas Aeruginosa)的群體感應(yīng)系統(tǒng),選擇了15種中成藥進行篩選,獲得具有QSI活性的冬凌草甲素并進行初步探究作用機制。方法紫色桿菌(Chromobacterium violaceum)CV026作為報告菌株,用報告平板和紫色菌素產(chǎn)量分析對15種中成藥提取液進行初步篩選,獲得潛在的群體感應(yīng)抑制劑。進一步檢驗初篩獲得的中成藥提取液對銅綠假單胞菌PA01的綠膿菌素釋放量、鼠李糖酯釋放量、水解蛋白酶活性、彈性蛋白酶活性以及生物膜形成的影響。選擇冬凌草中主要活性成分——冬凌草甲素,進行進一步的驗證,并且用熒光定量PCR檢測群體感應(yīng)相關(guān)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子lasR基因和rhlR基因的表達量變化。結(jié)果通過報告菌株CV026初步篩選,冬凌草片醇提液在最...

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1群體感應(yīng)抑制劑作用途徑Fig.1-1ThepathwaysofQuorumsensinginhibitors

廣東藥科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文一步啟動特定基因并協(xié)調(diào)表達。QS系統(tǒng)屬于一種通訊系統(tǒng)存在于細菌與細菌間，并由細菌群體內(nèi)生長密度激活的調(diào)控系統(tǒng)。細菌可通過QS系統(tǒng)利用AHLs調(diào)控下游靶基因達到種群環(huán)境生存適應(yīng)性調(diào)節(jié)[33,34]。在1.3中所提到的群體感應(yīng)系統(tǒng)分類中，不....

圖1-2群體感應(yīng)系統(tǒng)對銅綠假單胞菌生物膜與毒素的影響

6圖1-2群體感應(yīng)系統(tǒng)對銅綠假單胞菌生物膜與毒素的影響Fig.1-2TheinfluencesofQuorumsensingtobiofilmandvirulencefactorsinPseudomonasaeruginosa1.6群體感應(yīng)抑制劑國內(nèi)....

圖2-1報告平板法檢測中藥醇提取物

廣東藥科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文2.5.2打孔法初篩水提液水提液有6種藥物能透明抑菌圈，但其中有菌生長的有2炎可寧片、8葛根岑連片、9牛黃解毒片。（見圖2-2和表2-3）

圖3-1提取液對銅綠假單胞菌的MIC

并用滅菌PBS洗滌，再加入5％AgNO3溶液作用15m顯色2min后用蒸餾水洗滌1min，最后再用5％NaS2O3PBS清洗，光學(xué)顯微鏡100×與400×下觀察。結(jié)果最低抑菌濃度的測定菌株CV026的初篩中，發(fā)現(xiàn)冬凌草片醇提液與炎可寧片因此，為了進一....

本文編號：3927723