研究背景肺纖維化是一種以肺部結(jié)構(gòu)病變?yōu)樘卣鞯募膊?是正常的肺泡組織在受到損傷的情況下異常修復(fù)導(dǎo)致的結(jié)果,當(dāng)肺組織結(jié)構(gòu)受到損傷時(shí)會出現(xiàn)輕微的炎癥反應(yīng),然后分泌膠原蛋白對肺間質(zhì)組織進(jìn)行修復(fù),如果肺泡內(nèi)的滲出物和碎屑不能被有效的清除,就會使過量的膠原沉積,引起肺部發(fā)生瘢痕性纖維化。MicroRNAs(miRNAs)在機(jī)體組織與細(xì)胞內(nèi)廣泛參與多種生理、病理過程的調(diào)控,與細(xì)胞增殖、分化、凋亡調(diào)控及組織器官發(fā)育、代謝等過程密切相關(guān)。已經(jīng)有研究證實(shí),miRNA廣泛參與了腫瘤、自身免疫性疾病及其他系統(tǒng)疾病的發(fā)生發(fā)展,并在多種疾病中起重要作用。研究表明,miR-21在肺纖維化的發(fā)病機(jī)制中起著重要的作用。核因子κB(NF-κB)是一個(gè)與炎癥性細(xì)胞因子密切相關(guān)的核轉(zhuǎn)錄因子,它調(diào)控許多炎癥性細(xì)胞因子mRNA的表達(dá),與炎癥性疾病關(guān)系密切。NF-κB激活炎性細(xì)胞因子TNF-α和IL-1β,引起肺泡炎,并誘導(dǎo)產(chǎn)生TGF-β,激活TGF-β/Smad信號通路,引起膠原分泌,最終導(dǎo)致肺纖維化。本實(shí)驗(yàn)通過建立肺纖維化模型,并給予白藜蘆醇干預(yù),研究白藜蘆醇對肺纖維化的作用,探討白藜蘆醇對miR-21和NF-κB的影響,了解...

【文章頁數(shù)】：92 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略詞表
第一章 緒論
    1.1 肺纖維化的概述
        1.1.1 肺纖維化的病因
        1.1.2 肺纖維化的病理
        1.1.3 肺纖維化的發(fā)病機(jī)制
        1.1.4 肺纖維化的治療
    1.2 白藜蘆醇(Resveratrol)
        1.2.1 白藜蘆醇的理化性質(zhì)
        1.2.2 白藜蘆醇的提取
        1.2.3 白藜蘆醇的制備方法
        1.2.4 白藜蘆醇的藥理作用
        1.2.5 白藜蘆醇與肺纖維化的關(guān)系
    1.3 NF-κB
        1.3.1 NF-κB的簡述
        1.3.2 NF-κB的抑制蛋白IκB(inhibitory κB)
        1.3.3 IKK/N F-κB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路
        1.3.4 TNF-α介導(dǎo)的IKK/N F-κB信號通路
        1.3.5 NF-κB的活性抑制
        1.3.6 NF-κB與TGF-β
        1.3.7 NF-κB與肺纖維化
    1.4 MicroRNAs
        1.4.1 miRNA的生物學(xué)特性
        1.4.2 miRNA的生物合成
        1.4.3 miRNA的作用機(jī)制
        1.4.4 miRNA和肺纖維化
        1.4.5 miR-21
    1.5 本實(shí)驗(yàn)研究的內(nèi)容、目的意義及技術(shù)路線
        1.5.1 研究的內(nèi)容
        1.5.2 目的意義
        1.5.3 技術(shù)路線
第二章 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)動物
        2.1.2 主要藥物與實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.4 主要液體的配制
        2.1.5 引物
    2.2 方法
        2.2.1 動物模型的建立
        2.2.2 羥脯氨酸含量的測定
        2.2.3 肺組織病理切片及染色
        2.2.4 Western Blotting蛋白質(zhì)免疫印跡分析
        2.2.5 RT-PCR檢測mRNA
        2.2.6 RT-PCR檢測miRNA
        2.2.7 RNA的質(zhì)量檢測
        2.2.8 Real-time PCR的數(shù)據(jù)分析
第三章 結(jié)果
    3.1 肺組織的大體觀察
    3.2 肺組織病理切片的染色觀察
        3.2.1 HE染色觀察
        3.2.2 Masson染色觀察
        3.2.3 根據(jù)染色評分分級分析染色結(jié)果
    3.3 羥脯氨酸含量(HYP)測定
    3.4 Western blotting檢測蛋白表達(dá)結(jié)果
    3.5 PCR檢測各組中RNA的表達(dá)結(jié)果
        3.5.1 大鼠的肺組織中Ⅰ型膠原mRNA表達(dá)量的變化
        3.5.2 大鼠的肺組織中Ⅲ型膠原mRNA表達(dá)量的變化
        3.5.3 大鼠的肺組織中miR-21表達(dá)量的變化
第四章 討論
    4.1 博萊霉素誘導(dǎo)大鼠的肺纖維化的動物模型的建立
    4.2 大鼠的肺纖維化模型中NF-κB與miR-21表達(dá)變化
    4.3 白藜蘆醇對大鼠的肺纖維化的影響
    4.4 白藜蘆醇對NF-κB與miR-21表達(dá)變化的影響
第五章 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄 A 發(fā)表的論文



本文編號：3922936