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基于TLR4/MyD88/NF-κB信號(hào)通路研究黃連素對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞極化的干預(yù)作用

發(fā)布時(shí)間:2024-02-18 03:23
  目的:基于Toll樣受體4(TLR4)/髓樣分化因子88(MyD88)/核因子κB(NF-κB)信號(hào)通路研究黃連素對(duì)小鼠巨噬細(xì)胞極化的影響。方法:以小鼠巨噬細(xì)胞RAW264.7為對(duì)象,以阿托伐他汀鈣為陽(yáng)性對(duì)照,經(jīng)脂多糖(LPS)誘導(dǎo)以復(fù)制炎癥細(xì)胞模型,采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法檢測(cè)低、中、高劑量黃連素(5、10、20μmol/L)作用24 h后細(xì)胞培養(yǎng)液中腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細(xì)胞介素6(IL-6)、NF-κB含量,采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)法檢測(cè)細(xì)胞中TLR4、MyD88 mRNA的表達(dá)水平,采用Western blotting法檢測(cè)細(xì)胞中TLR4、MyD88、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)、CD206蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果:與空白對(duì)照組比較,LPS誘導(dǎo)組細(xì)胞培養(yǎng)液中TNF-α、IL-6、NF-κB含量,細(xì)胞中TLR4、MyD88 mRNA的相對(duì)表達(dá)量以及TLR4、MyD88、iNOS蛋白相對(duì)表達(dá)量均顯著升高(P<0.05)。與LPS誘導(dǎo)組比較,阿托伐他汀鈣組和黃連素中、高劑量組TNF-α、IL-6含量,TRL4、MyD88 mRNA及其蛋白的相對(duì)表達(dá)量以及各給藥組NF-...

【文章頁(yè)數(shù)】:6 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料
    1.1 儀器
    1.2 藥品與試劑
    1.3 細(xì)胞
2 方法
    2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
    2.2 分組、造模與給藥
    2.3 相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)
        2.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)液中TNF-α、IL-6、NF-κB的含量
        2.3.2 細(xì)胞中TLR4、MyD88 mRNA的表達(dá)量
        2.3.3 細(xì)胞中TLR4、MyD88、i NOS、CD206蛋白的表達(dá)量
    2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
3 結(jié)果
    3.1 黃連素對(duì)RAW264.7細(xì)胞培養(yǎng)液中TNF-α、IL-6、NF-κB含量的影響
    3.2 黃連素對(duì)RAW264.7細(xì)胞中TLR4、MyD88 mRNA表達(dá)的影響
    3.3 黃連素對(duì)RAW264.7細(xì)胞中TLR4、MyD88、iNOS、CD206蛋白表達(dá)的影響
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本文編號(hào):3901811

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