發(fā)布時(shí)間：2024-01-25 14:46

　　目的:基于前期本課題組抗炎活性篩選結(jié)果,進(jìn)一步研究新型查耳酮衍生物MW-9抗炎作用及防治多發(fā)性硬化的作用機(jī)理,為開發(fā)具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)新型查耳酮衍生物MW-9候選藥物提供科學(xué)依據(jù)。方法:1.體外研究部分,構(gòu)建小鼠巨噬細(xì)胞株Raw264.7炎癥細(xì)胞模型和原代巨噬細(xì)胞模型,MTT法檢測(cè)MW-9對(duì)炎癥細(xì)胞細(xì)胞毒性作用;采用Griss方法檢測(cè)MW-9對(duì)炎癥細(xì)胞模型NO產(chǎn)生的影響;Western blot法測(cè)定MW-9對(duì)NF-kB信號(hào)通路磷酸化狀態(tài)水平。2.體內(nèi)實(shí)驗(yàn),采用MOG35-55誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎(EAE)模型,Knoz評(píng)分法評(píng)價(jià)治療作用,HE染色法觀察小鼠脊髓病理?yè)p傷程度;ELISA法檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清中IL-17A、IFN-g和TGF-b產(chǎn)生濃度;基因芯片和q-PCR法檢測(cè)EAE小鼠脊髓組織中細(xì)胞因子和趨化因子mRNA的表達(dá)情況。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志(CD25、CD44、CD11b、Gr1)及T細(xì)胞亞群細(xì)胞(Th17、Th1細(xì)胞和Treg細(xì)胞)比例。3.體外Th17分化實(shí)驗(yàn),采用免疫磁珠陰性選擇分選CD4⁺T細(xì)胞細(xì)胞。在Th17極化條件下,誘導(dǎo)初...

【文章頁(yè)數(shù)】：78 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

圖1-1查耳酮衍生物MW-9對(duì)Raw264.7巨噬細(xì)胞細(xì)胞毒性作用

圖1-2查耳酮衍生物MW-9抑制Raw264.7巨噬細(xì)胞中NO的產(chǎn)生

圖1-4查耳酮衍生物MW-9抑制Raw264.7巨噬細(xì)胞中NF-kB信號(hào)通路磷酸化水平將Raw264.7巨噬細(xì)胞隨機(jī)空白組、對(duì)照組（1.5g/mlLPS），藥物干預(yù)（6、3、1.5g/ml）

圖2-1MW-9減輕EAE小鼠的臨床癥狀免疫抑制后，對(duì)EAE小鼠體重、臨床評(píng)分以及發(fā)病率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)

本文編號(hào)：3885012