目的:包蟲(chóng)病的治療目前以苯并咪唑類(lèi)藥物為主,阿苯達(dá)唑是國(guó)際公認(rèn)最有效的抗包蟲(chóng)藥物,但由于阿苯達(dá)唑治療周期長(zhǎng)(6個(gè)月以上),對(duì)人體產(chǎn)生明顯的毒副作用。因此尋找新的有效抗包蟲(chóng)藥物是目前亟待解決的問(wèn)題。本實(shí)驗(yàn)研究基于計(jì)算機(jī)模擬分子對(duì)接技術(shù)通過(guò)目前臨床推薦使用的有效抗包蟲(chóng)藥物與包蟲(chóng)β-tubulin結(jié)合能,驗(yàn)證抗包蟲(chóng)藥物與包蟲(chóng)β-tubulin結(jié)合能的大小與對(duì)包蟲(chóng)的治療效果是否正相關(guān),進(jìn)一步驗(yàn)證計(jì)算機(jī)模擬分子對(duì)接技術(shù)在抗包蟲(chóng)藥物篩選上應(yīng)用的可行性,進(jìn)而利用計(jì)算機(jī)模擬分子對(duì)接技術(shù)篩選抗包蟲(chóng)的中藥單體。隨后通過(guò)體外實(shí)驗(yàn),驗(yàn)證所篩選出的中藥單體實(shí)際抗包蟲(chóng)效果,并從細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)方面進(jìn)一步篩選未來(lái)可能進(jìn)入臨床應(yīng)用的藥物。方法:利用Schrodinger 9.3.5軟件對(duì)細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)β-tubulin計(jì)算機(jī)同源建模,用Schrodinger 9.3.5軟件分子對(duì)接驗(yàn)證苯并咪唑類(lèi)藥物,用AutoDock軟件分子對(duì)接篩選中藥單體的篩選。通過(guò)已篩選苯并咪唑類(lèi)藥物和中藥單體處理體外培養(yǎng)細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)原頭蚴,觀察原頭節(jié)形態(tài)學(xué)變化及計(jì)算死亡率。堿性磷酸酶檢測(cè)試劑盒檢測(cè)藥物處理原頭節(jié)培養(yǎng)液堿性磷酸酶活性,Western ...

【文章頁(yè)數(shù)】：102 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第一章 前言
    1.1 包蟲(chóng)病
        1.1.1 囊型包蟲(chóng)病
        1.1.2 泡型包蟲(chóng)病
    1.2 包蟲(chóng)病的治療
        1.2.1 外科手術(shù)治療
        1.2.2 西藥治療
        1.2.3 中藥治療
        1.2.4 中西藥聯(lián)合治療
    1.3 計(jì)算機(jī)模擬分子對(duì)接技術(shù)
        1.3.1 分子對(duì)接技術(shù)
        1.3.2 分子對(duì)接技術(shù)原理
        1.3.3 計(jì)算機(jī)模擬分子對(duì)接技術(shù)在中藥篩選中的應(yīng)用
    1.4 微管蛋白
        1.4.1 微管蛋白的結(jié)構(gòu)和作用
        1.4.2 藥物的靶蛋白——微管蛋白
        1.4.3 抗寄生蟲(chóng)藥苯并咪唑類(lèi)藥物與微管蛋白
    1.5 研究目的與意義
第二章 計(jì)算機(jī)模擬分子對(duì)接技術(shù)對(duì)抗包蟲(chóng)藥物的篩選
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)β-tubulin計(jì)算機(jī)同源建模
        2.2.2 并苯咪唑類(lèi)藥物與細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)β-Tublin蛋白分子對(duì)接的驗(yàn)證..
        2.2.3 中藥單體與細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)β-Tublin蛋白分子對(duì)接的篩選
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)β-tubulin三維結(jié)構(gòu)模型
        2.3.2 計(jì)算機(jī)模擬驗(yàn)證苯并咪唑類(lèi)藥物與細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)β-tubulin分子對(duì)接
        2.3.3 計(jì)算機(jī)模擬對(duì)接示意圖
        2.3.4 計(jì)算機(jī)模擬篩選中藥單體庫(kù)與細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)β-tubulin分子對(duì)接.
    2.4 討論
        2.4.1 細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)β-tubulin計(jì)算機(jī)同源建模
        2.4.2 苯并咪唑藥物與細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)β-tubulin模型分子對(duì)接的驗(yàn)證
        2.4.3 通過(guò)分子對(duì)接技術(shù)篩選與β-tubulin結(jié)合的中藥單體
第三章 分子對(duì)接驗(yàn)證苯并咪唑類(lèi)藥物與篩選中藥單體體外抗原頭蚴的研究
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 細(xì)粒棘球絳蟲(chóng)原頭蚴
        3.1.2 阿苯達(dá)唑亞砜對(duì)映體拆分試劑
        3.1.3 藥物配置
        3.1.4 主要試劑
        3.1.5 主要儀器及設(shè)備
        3.1.6 主要試劑的配制
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 阿苯達(dá)唑亞砜對(duì)映體拆分
        3.2.2 細(xì)粒棘球蚴原頭節(jié)體外培養(yǎng)
        3.2.3 堿性磷酸酶的檢測(cè)
        3.2.4 Westernbloting檢測(cè)原頭節(jié)β-TublinmRNA的表達(dá)
        3.2.5 qPCR檢測(cè)原頭節(jié)β-TublinmRNA的含量
        3.2.6 數(shù)據(jù)處理及實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.1 阿苯達(dá)唑亞砜拆分
        3.3.2 苯并咪唑類(lèi)藥物體外抗包蟲(chóng)的觀察
        3.3.3 苯并咪唑類(lèi)藥物對(duì)原頭節(jié)的抑制率
        3.3.4 并苯咪唑類(lèi)藥物對(duì)堿性磷酸酶的影響
        3.3.5 并苯咪唑類(lèi)藥物對(duì)原頭節(jié)β-Tublin蛋白表達(dá)的影響
        3.3.6 并苯咪唑類(lèi)藥物對(duì)包蟲(chóng)β-TublinmRNA表達(dá)的影響
        3.3.7 中藥單體體外抗包蟲(chóng)的觀察
        3.3.8 中藥單體對(duì)原頭節(jié)的抑制率
        3.3.9 中藥單體對(duì)堿性磷酸酶的影響
        3.3.10 中藥單體對(duì)包蟲(chóng)β-Tublin蛋白表達(dá)的影響
        3.3.11 中藥單體對(duì)包蟲(chóng)β-TublinmRNA表達(dá)的影響
    3.4 討論
        3.4.1 體外藥物處理原頭節(jié)的實(shí)驗(yàn)研究
        3.4.2 分子對(duì)接技術(shù)驗(yàn)證苯并咪唑類(lèi)藥物體外抗包蟲(chóng)的實(shí)驗(yàn)研究
        3.4.3 分子對(duì)接技術(shù)篩選中藥單體體外抗包蟲(chóng)的實(shí)驗(yàn)研究
第四章 阿苯達(dá)唑亞砜與中藥單體的細(xì)胞毒性研究
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料
        4.1.1 HepG2細(xì)胞
        4.1.2 藥物配置
        4.1.3 主要試劑
        4.1.4 主要儀器及設(shè)備
        4.1.5 主要試劑的配制
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)分組
        4.2.3 HepG2細(xì)胞增殖的檢測(cè)
        4.2.4 HepG2細(xì)胞周期影響的檢測(cè)
        4.2.5 HepG2細(xì)胞早期凋亡的檢測(cè)
        4.2.6 Westernblot檢測(cè)HepG2細(xì)胞的凋亡相關(guān)蛋白
        4.2.7 qPCR檢測(cè)HepG2細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白mRNA的含量
        4.2.8 細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)HepG2細(xì)胞的微管形成
        4.2.10 數(shù)據(jù)處理及實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.1 阿苯達(dá)唑亞砜及其對(duì)映體對(duì)HepG2細(xì)胞增殖的影響
        4.3.2 阿苯達(dá)唑亞砜及其對(duì)映體對(duì)HepG2形態(tài)及細(xì)胞凋亡的影響
        4.3.3 阿苯達(dá)唑亞砜及其對(duì)映體對(duì)HepG2細(xì)胞周期的影響
        4.3.4 阿苯達(dá)唑亞砜及其對(duì)映體對(duì)HepG2細(xì)胞凋亡的影響
        4.3.5 阿苯達(dá)唑亞砜及其對(duì)映體對(duì)HepG2細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
        4.3.6 阿苯達(dá)唑亞砜及對(duì)映體對(duì)HepG2細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白mRNA表達(dá)的影響
        4.3.7 阿苯達(dá)唑亞砜及其對(duì)映體對(duì)HepG2細(xì)胞微管的影響
        4.3.8 中藥單體PFM和NIP對(duì)HepG2細(xì)胞增殖的影響
        4.3.9 中藥單體PFM和NIP對(duì)HepG2細(xì)胞凋亡及其形態(tài)的影響
        4.3.10 中藥單體PFM與NIP對(duì)HepG2細(xì)胞周期的影響
        4.3.11 中藥單體PFM與NIP對(duì)HepG2細(xì)胞凋亡的影響
        4.3.12 中藥單體PFM與NIP對(duì)HepG2細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白的影響
        4.3.13 中藥單體PFM和NIP對(duì)HepG2細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白mRNA的影響
        4.3.14 中藥單體PFM與NIP對(duì)HepG2細(xì)胞微管的影響
    4.4 討論
        4.4.1 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
        4.4.2 阿苯達(dá)唑亞砜及其對(duì)映體細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
        4.4.3 中藥單體PFM、NIP細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
第五章 結(jié)論
    5.1 主要結(jié)論
    5.2 研究展望
參考文獻(xiàn)
在校期間的研究成果
縮略詞表
致謝



本文編號(hào)：3875229