藤茶中二氫楊梅素的提取及其金屬配合物制備、生物活性研究
發(fā)布時間:2023-10-22 11:42
藤茶,學名顯齒蛇葡萄(Ampelopsis grossedentata),廣泛分布于我國南方。由于其廣泛的生物學活性而備受關注,在其莖葉中含有的主要黃酮是二氫楊梅素(Dihydromyricetin,DMY)。DMY具有清除氧自由基、消炎、抑菌、降脂、抗腫瘤等生理活性,其化學結構具有很高的超離域度和大π鍵共軛體系,能與金屬離子形成穩(wěn)定的配合物。本文探討了藤茶中DMY的提取及優(yōu)化工藝,設計合成了釩、鋅和鉻等系列二氫楊梅素金屬配合物。此外,初步測試了這些金屬配合物與DNA的相互作用、抗氧化性和抗腫瘤作用。主要的研究內容如下:1.對提取溶劑進行初篩后,再通過正交設計實驗優(yōu)化了DMY的提取工藝。實驗顯示,乙酸乙酯為所選中的最佳提取溶劑。當提取時間50 min、提取溫度50℃、料液比1:20時,DMY的提取率可達14.28%左右。方差分析結果顯示,影響DMY提取率的幾種因素的大小順序為:料液比>提取溫度>提取時間。2.為了考察相關二氫楊梅素金屬配合物的生物活性,合成了Zn-DMY、Cr-DMY和VO-DMY,以元素分析、IR、ESI-MS和1H NMR對化合物進行了結構表征。采用紫外...
【文章頁數(shù)】:66 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
1.1 民間藤茶藥用概況
1.2 藤茶化學成分研究進展
1.2.1 黃酮類
1.2.2 低聚芪類、酚類及蹂質
1.3 藥理作用研究進展
1.3.1 抗炎和鎮(zhèn)痛作用
1.3.2 抗氧化作用
1.3.3 免疫調節(jié)作用
1.3.4 抗菌作用
1.3.5 降血糖、降血脂及降壓作用
1.3.6 抗腫瘤作用
1.4 二氫楊梅素-金屬配合物的研究
1.5 選題意義
第二章 藤茶中二氫楊梅素的提取及工藝優(yōu)化
2.1 儀器試劑
2.1.1 主要儀器
2.1.2 實驗材料與試劑
2.2 實驗方法
2.2.1 DMY對照品溶液的制備
2.2.2 HPLC操作方法的確定
2.2.3 線性關系考察
2.2.4 樣品處理方法
2.2.5 單因素考察
2.2.6 正交實驗設計
2.3 結果與討論
2.3.1 HPLC測定DMY含量
2.3.2 單因素實驗
2.3.3 正交試驗
2.4 本章小結
第三章 二氫楊梅素金屬配合物的合成及其與DNA的相互作用
3.1 實驗部分
3.1.1 儀器與試劑
3.1.2 緩沖溶液的配制
3.1.3 配合物溶液以及DNA溶液的配制
3.1.4 金屬配合物與DNA相互作用的研究方法
3.1.5 金屬配合物與DNA作用流體力學實驗
3.1.6 瓊脂糖凝膠電泳分析實驗
3.1.7 金屬配合物的合成
3.2 結果與討論
3.2.1 配合物結構表征
3.2.2 質譜與氫譜
3.2.3 配合物與DNA作用的電子吸收光譜
3.2.4 配合物與DNA作用的熒光淬滅實驗
3.2.5 配合物與DNA相互作用的粘度測定
3.2.6 瓊脂糖凝膠電泳分析實驗
3.3 本章小結
第四章 二氫楊梅素配合物抗肝癌活性的研究
4.1 實驗儀器與試劑
4.2 實驗方法與步驟
4.2.1 無菌操作
4.2.2 細胞操作及試劑配制
4.2.3 MTT實驗
4.2.4 Annexin V- FITC/PI細胞凋亡檢測
4.2.5 PI單染檢測細胞周期
4.2.6 統(tǒng)計分析
4.2.7 抗氧化性實驗
4.3 結果與討論
4.3.1 MTT法檢測細胞毒性
4.3.2 細胞凋亡率
4.3.3 細胞周期檢測
4.3.4 抗氧化性實驗
4.4 本章小結
參考文獻
攻讀碩士學位期間發(fā)表的論文
致謝
附錄 化合物的部分表征圖譜
本文編號:3856449
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第一章 緒論
1.1 民間藤茶藥用概況
1.2 藤茶化學成分研究進展
1.2.1 黃酮類
1.2.2 低聚芪類、酚類及蹂質
1.3 藥理作用研究進展
1.3.1 抗炎和鎮(zhèn)痛作用
1.3.2 抗氧化作用
1.3.3 免疫調節(jié)作用
1.3.4 抗菌作用
1.3.5 降血糖、降血脂及降壓作用
1.3.6 抗腫瘤作用
1.4 二氫楊梅素-金屬配合物的研究
1.5 選題意義
第二章 藤茶中二氫楊梅素的提取及工藝優(yōu)化
2.1 儀器試劑
2.1.1 主要儀器
2.1.2 實驗材料與試劑
2.2 實驗方法
2.2.1 DMY對照品溶液的制備
2.2.2 HPLC操作方法的確定
2.2.3 線性關系考察
2.2.4 樣品處理方法
2.2.5 單因素考察
2.2.6 正交實驗設計
2.3 結果與討論
2.3.1 HPLC測定DMY含量
2.3.2 單因素實驗
2.3.3 正交試驗
2.4 本章小結
第三章 二氫楊梅素金屬配合物的合成及其與DNA的相互作用
3.1 實驗部分
3.1.1 儀器與試劑
3.1.2 緩沖溶液的配制
3.1.3 配合物溶液以及DNA溶液的配制
3.1.4 金屬配合物與DNA相互作用的研究方法
3.1.5 金屬配合物與DNA作用流體力學實驗
3.1.6 瓊脂糖凝膠電泳分析實驗
3.1.7 金屬配合物的合成
3.2 結果與討論
3.2.1 配合物結構表征
3.2.2 質譜與氫譜
3.2.3 配合物與DNA作用的電子吸收光譜
3.2.4 配合物與DNA作用的熒光淬滅實驗
3.2.5 配合物與DNA相互作用的粘度測定
3.2.6 瓊脂糖凝膠電泳分析實驗
3.3 本章小結
第四章 二氫楊梅素配合物抗肝癌活性的研究
4.1 實驗儀器與試劑
4.2 實驗方法與步驟
4.2.1 無菌操作
4.2.2 細胞操作及試劑配制
4.2.3 MTT實驗
4.2.4 Annexin V- FITC/PI細胞凋亡檢測
4.2.5 PI單染檢測細胞周期
4.2.6 統(tǒng)計分析
4.2.7 抗氧化性實驗
4.3 結果與討論
4.3.1 MTT法檢測細胞毒性
4.3.2 細胞凋亡率
4.3.3 細胞周期檢測
4.3.4 抗氧化性實驗
4.4 本章小結
參考文獻
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附錄 化合物的部分表征圖譜
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