樺木酸是一種天然的五環(huán)三萜類(lèi)化合物,可抑制多種腫瘤細(xì)胞系的增殖,且抑制機(jī)制具有細(xì)胞特異性,在不同細(xì)胞中的抑制靶點(diǎn)不盡相同。以往研究發(fā)現(xiàn)樺木酸可抑制宮頸癌細(xì)胞系生長(zhǎng),但抑制機(jī)理并不清楚,因此本論文以人宮頸癌細(xì)胞系HeLa為研究對(duì)象,解析樺木酸抑制細(xì)胞增殖和促進(jìn)凋亡作用及其介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路,為深入闡明樺木酸抑制人宮頸癌細(xì)胞的增殖機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。1.不同濃度樺木酸處理HeLa細(xì)胞不同時(shí)間的結(jié)果證實(shí)樺木酸可有效抑制HeLa細(xì)胞增殖并引起細(xì)胞凋亡,且呈現(xiàn)時(shí)間和劑量依賴性。計(jì)算不同處理時(shí)間點(diǎn)下的半數(shù)抑制濃度(IC50),并結(jié)合細(xì)胞凋亡檢測(cè)結(jié)果,為保證蛋白總量能夠滿足雙向電泳要求,確定以30 μmol/L樺木酸處理HeLa細(xì)胞系48 h為雙向電泳實(shí)驗(yàn)的處理?xiàng)l件。2.蛋白質(zhì)組學(xué)分析顯示,HeLa細(xì)胞中有36個(gè)蛋白質(zhì)受樺木酸誘導(dǎo)差異表達(dá),其中有6個(gè)上調(diào)蛋白質(zhì),30個(gè)下調(diào)蛋白質(zhì)。功能學(xué)分析表明這些蛋白分別參與了細(xì)胞代謝、生化反應(yīng)、蛋白定位等不同的生物學(xué)過(guò)程,而依據(jù)蛋白質(zhì)的功能不同,又可將其分成催化功能型蛋白、氧化還原型蛋白、翻譯調(diào)控型蛋白等。遺憾的是,依據(jù)蛋白質(zhì)組學(xué)分析結(jié)果未能推測(cè)出與細(xì)胞增殖和凋亡直...

【文章頁(yè)數(shù)】：94 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 樺木酸及其抗腫瘤活性
        1.1.1 樺木酸結(jié)構(gòu)與理化性質(zhì)
        1.1.2 樺木酸抗腫瘤活性
        1.1.3 樺木酸誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡機(jī)制
    1.2 細(xì)胞增殖機(jī)制與腫瘤發(fā)展
        1.2.1 細(xì)胞增殖
        1.2.2 宮頸癌
    1.3 蛋白質(zhì)組學(xué)概述
        1.3.1 蛋白質(zhì)組學(xué)在不同疾病研究中的應(yīng)用
        1.3.2 蛋白質(zhì)組學(xué)在藥物研發(fā)中的應(yīng)用
    1.4 立題依據(jù)
2 樺木酸抑制HeLa細(xì)胞系增殖的蛋白質(zhì)組學(xué)分析
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試驗(yàn)材料
        2.1.2 試驗(yàn)試劑
        2.1.3 常用試劑配方
        2.1.4 試驗(yàn)儀器
        2.1.5 試驗(yàn)方法
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 樺木酸對(duì)HeLa細(xì)胞增殖和凋亡的影響
        2.2.2 樺木酸誘導(dǎo)的HeLa細(xì)胞蛋白質(zhì)差異表達(dá)
        2.2.3 差異蛋白質(zhì)定位及功能分類(lèi)
        2.2.4 qRT-PCR驗(yàn)證
    2.3 討論
    2.4 本章小結(jié)
3 樺木酸抑制HeLa細(xì)胞系增殖的信號(hào)途徑分析
    3.1 材料與方法
        3.1.1 試驗(yàn)材料
        3.1.2 試驗(yàn)試劑
        3.1.3 常用試劑配方
        3.1.4 試驗(yàn)儀器
        3.1.5 試驗(yàn)方法
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 樺木酸抑制HeLa細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)凋亡的時(shí)間節(jié)點(diǎn)
        3.2.2 樺木酸對(duì)PI3K/Akt信號(hào)途徑的影響
        3.2.3 樺木酸促進(jìn)p21^Waf1/Cip1和p27^Kip蛋白表達(dá)并導(dǎo)致細(xì)胞周期停滯
        3.2.4 樺木酸促進(jìn)線粒體依賴的凋亡途徑
        3.2.5 樺木酸可誘發(fā)HeLa細(xì)胞內(nèi)的ROS產(chǎn)生
        3.2.6 抗氧化物維持PI3K/Akt的磷酸化活性并阻斷細(xì)胞凋亡
    3.3 討論
    3.4 本章小結(jié)
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝
附件



本文編號(hào)：3850468