目的制備花旗松素單體并測(cè)定花旗松素在不同介質(zhì)中的表觀油水分配系數(shù),研究其在結(jié)腸癌Caco-2細(xì)胞模型中吸收轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制。方法酶解法制備花旗松素,采用高效液相色譜法測(cè)定花旗松素在37℃、不同pH值緩沖鹽溶液和水中的飽和溶解度,通過油水分配系數(shù)計(jì)算公式得花旗松素表觀油水分配系數(shù);CCK-8實(shí)驗(yàn)考察花旗松素在Caco-2細(xì)胞中的安全濃度范圍,再利用Caco-2細(xì)胞單層模型研究其雙側(cè)跨膜吸收轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制;CCK-8實(shí)驗(yàn)考察花旗松素在人臍血管內(nèi)皮細(xì)胞HDMEC細(xì)胞中的安全濃度范圍,采用脂多糖誘導(dǎo)的HDMEC細(xì)胞建立炎癥模型,用花旗松素進(jìn)行干預(yù),乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒檢測(cè)LDH的活力。結(jié)果花旗松素在不同溶劑中的lgP分別為0.29(0.1 mol/L鹽酸)、0.48(pH 2.0)、0.46(pH 5.8)、0.34(pH 6.8)、0.26(pH 7.4)、0.38(水);花旗松素質(zhì)量濃度在50～500μg/mL對(duì)Caco-2細(xì)胞無明顯毒性作用;不同質(zhì)量濃度花旗松素在Caco-2單層細(xì)胞模型中的轉(zhuǎn)運(yùn)具有時(shí)間依賴性,不同質(zhì)量濃度花旗松素雙側(cè)轉(zhuǎn)運(yùn)P_app值無顯著性差異,且均小于1×...

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料
    1.1 細(xì)胞株
    1.2 試藥
    1.3 儀器
2 方法
    2.1 花旗松素的制備
    2.2 不同p H值緩沖鹽溶液中花旗松素油水分配系數(shù)（P）測(cè)定
        2.2.1 色譜條件
        2.2.2 對(duì)照品溶液配制
        2.2.3 供試品溶液配制
        2.2.4 線性關(guān)系考察
        2.2.5 精密度考察
        2.2.6 穩(wěn)定性考察
        2.2.7 不同p H值緩沖鹽溶液中花旗松素P的測(cè)定
    2.3 Caco-2細(xì)胞單層模型的建立
    2.4 CCK-8實(shí)驗(yàn)
    2.5 花旗松素跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)樣品含量測(cè)定
        2.5.1 色譜條件
        2.5.2 線性關(guān)系考察
        2.5.3 精密度試驗(yàn)
        2.5.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)
    2.6 花旗松素在Caco-2單層的雙側(cè)轉(zhuǎn)運(yùn)實(shí)驗(yàn)
    2.7 花旗松素抗炎活性研究
        2.7.1 不同質(zhì)量濃度花旗松素對(duì)HDMEC生長的影響
        2.7.2 不同質(zhì)量濃度花旗松素對(duì)LPS誘導(dǎo)的損傷HDMEC細(xì)胞中LDH活性的影響
    2.8 數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果
    3.1 不同溶液中花旗松素P值測(cè)定
    3.2 Caco-2單層細(xì)胞模型的建立
    3.3 CCK-8法檢測(cè)花旗松素對(duì)Caco-2細(xì)胞的毒性
    3.4 花旗松素在Caco-2單層細(xì)胞雙側(cè)轉(zhuǎn)運(yùn)特征
    3.5 花旗松素抗炎活性研究
        3.5.1 不同質(zhì)量濃度花旗松素對(duì)HDMEC細(xì)胞的毒性實(shí)驗(yàn)
        3.5.2 不同質(zhì)量濃度花旗松素對(duì)LPS誘導(dǎo)的損傷HDMEC細(xì)胞中LDH的活性影響
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