目的制備花旗松素單體并測定花旗松素在不同介質(zhì)中的表觀油水分配系數(shù),研究其在結(jié)腸癌Caco-2細胞模型中吸收轉(zhuǎn)運機制。方法酶解法制備花旗松素,采用高效液相色譜法測定花旗松素在37℃、不同pH值緩沖鹽溶液和水中的飽和溶解度,通過油水分配系數(shù)計算公式得花旗松素表觀油水分配系數(shù);CCK-8實驗考察花旗松素在Caco-2細胞中的安全濃度范圍,再利用Caco-2細胞單層模型研究其雙側(cè)跨膜吸收轉(zhuǎn)運機制;CCK-8實驗考察花旗松素在人臍血管內(nèi)皮細胞HDMEC細胞中的安全濃度范圍,采用脂多糖誘導(dǎo)的HDMEC細胞建立炎癥模型,用花旗松素進行干預(yù),乳酸脫氫酶(LDH)試劑盒檢測LDH的活力。結(jié)果花旗松素在不同溶劑中的lgP分別為0.29(0.1 mol/L鹽酸)、0.48(pH 2.0)、0.46(pH 5.8)、0.34(pH 6.8)、0.26(pH 7.4)、0.38(水);花旗松素質(zhì)量濃度在50～500μg/mL對Caco-2細胞無明顯毒性作用;不同質(zhì)量濃度花旗松素在Caco-2單層細胞模型中的轉(zhuǎn)運具有時間依賴性,不同質(zhì)量濃度花旗松素雙側(cè)轉(zhuǎn)運P_app值無顯著性差異,且均小于1×...

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料
    1.1 細胞株
    1.2 試藥
    1.3 儀器
2 方法
    2.1 花旗松素的制備
    2.2 不同p H值緩沖鹽溶液中花旗松素油水分配系數(shù)（P）測定
        2.2.1 色譜條件
        2.2.2 對照品溶液配制
        2.2.3 供試品溶液配制
        2.2.4 線性關(guān)系考察
        2.2.5 精密度考察
        2.2.6 穩(wěn)定性考察
        2.2.7 不同p H值緩沖鹽溶液中花旗松素P的測定
    2.3 Caco-2細胞單層模型的建立
    2.4 CCK-8實驗
    2.5 花旗松素跨膜轉(zhuǎn)運樣品含量測定
        2.5.1 色譜條件
        2.5.2 線性關(guān)系考察
        2.5.3 精密度試驗
        2.5.4 穩(wěn)定性試驗
    2.6 花旗松素在Caco-2單層的雙側(cè)轉(zhuǎn)運實驗
    2.7 花旗松素抗炎活性研究
        2.7.1 不同質(zhì)量濃度花旗松素對HDMEC生長的影響
        2.7.2 不同質(zhì)量濃度花旗松素對LPS誘導(dǎo)的損傷HDMEC細胞中LDH活性的影響
    2.8 數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果
    3.1 不同溶液中花旗松素P值測定
    3.2 Caco-2單層細胞模型的建立
    3.3 CCK-8法檢測花旗松素對Caco-2細胞的毒性
    3.4 花旗松素在Caco-2單層細胞雙側(cè)轉(zhuǎn)運特征
    3.5 花旗松素抗炎活性研究
        3.5.1 不同質(zhì)量濃度花旗松素對HDMEC細胞的毒性實驗
        3.5.2 不同質(zhì)量濃度花旗松素對LPS誘導(dǎo)的損傷HDMEC細胞中LDH的活性影響
4 討論



本文編號：3833781