目的探討在雷公藤甲素(Triptolide,TPL)誘導(dǎo)肝細胞癌細胞株Hep G2凋亡過程中剪接因子Serine/arginine splicing factor 3(SRSF3)基因轉(zhuǎn)錄和翻譯的變化,探討SRSF3在肝細胞癌凋亡機制所發(fā)揮的作用。方法分組:肝正常細胞株L02細胞;肝細胞癌細胞株Hep G2未處理組;肝細胞癌細胞株Hep G2TPL處理組。Western Blot檢測SRSF3蛋白表達量的變化;流式細胞儀(FCM)Annexin V/PI雙染法檢測細胞凋亡率的變化;熒光定量PCR測定SRSF3基因表達量的變化。結(jié)果TPL對人肝細胞癌細胞HepG2細胞有明顯的抑制增殖作用,且有明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系。TPL對Hep G2細胞作用72h的IC50為3.85±1.24ng/ml。流式細胞術(shù)檢測結(jié)果示TPL誘導(dǎo)Hep G2細胞凋亡,且在一定范圍內(nèi)有劑量效應(yīng)關(guān)系。Western blot結(jié)果顯示人正常肝細胞L02細胞內(nèi)的SRSF3蛋白表達量相對較低,而人肝細胞癌Hep G2細胞則有較高的SRSF3蛋白表達,當(dāng)用不同濃度的TPL處理肝細胞癌Hep G2細胞72h后,Hep G2細胞內(nèi)S...

【文章頁數(shù)】：42 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中英文對照表
中文摘要
英文摘要
前言
材料和方法
    1. 實驗材料
        1.1 細胞株
        1.2 主要實驗試劑
        1.3 實驗儀器和設(shè)備
    2. 實驗方法
        2.1 細胞培養(yǎng)與傳代
        2.2 MTT細胞增殖實驗
        2.3 流式細胞儀檢測TPL處理72h后HepG2細胞凋亡率的變化
        2.4 Western blot檢測不同濃度TPL對肝癌細胞株HepG2細胞內(nèi)SRSF3蛋白表達的影響
        2.5 熒光定量PCR檢測不同濃度TPL對HepG2細胞mRNA表達水平的影響
    3. 統(tǒng)計學(xué)分析
結(jié)果
    1. 顯微鏡下觀察不同濃度TPL處理72h后HepG2細胞形態(tài)的變化
    2. MTT檢測不同濃度TPL處理72h后HepG2細胞生長抑制率的變化
    3. 流式細胞儀檢測不同濃度TPL處理HepG2細胞72h后細胞凋亡率的變化
    4. Westernblot檢測不同濃度TPL處理細胞72h后細胞內(nèi)SRSF3蛋白的表達變化
    5. 熒光定量PCR檢測不同濃度TPL處理細胞后細胞內(nèi)SRSF3 mRNA表達量的變化
討論
結(jié)論
參考文獻
致謝
綜述 SRSF3:人類疾病中扮演著重要角色
    參考文獻



本文編號：3832342