目的探討在雷公藤甲素(Triptolide,TPL)誘導(dǎo)肝細(xì)胞癌細(xì)胞株Hep G2凋亡過程中剪接因子Serine/arginine splicing factor 3(SRSF3)基因轉(zhuǎn)錄和翻譯的變化,探討SRSF3在肝細(xì)胞癌凋亡機(jī)制所發(fā)揮的作用。方法分組:肝正常細(xì)胞株L02細(xì)胞;肝細(xì)胞癌細(xì)胞株Hep G2未處理組;肝細(xì)胞癌細(xì)胞株Hep G2TPL處理組。Western Blot檢測SRSF3蛋白表達(dá)量的變化;流式細(xì)胞儀(FCM)Annexin V/PI雙染法檢測細(xì)胞凋亡率的變化;熒光定量PCR測定SRSF3基因表達(dá)量的變化。結(jié)果TPL對人肝細(xì)胞癌細(xì)胞HepG2細(xì)胞有明顯的抑制增殖作用,且有明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系。TPL對Hep G2細(xì)胞作用72h的IC50為3.85±1.24ng/ml。流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果示TPL誘導(dǎo)Hep G2細(xì)胞凋亡,且在一定范圍內(nèi)有劑量效應(yīng)關(guān)系。Western blot結(jié)果顯示人正常肝細(xì)胞L02細(xì)胞內(nèi)的SRSF3蛋白表達(dá)量相對較低,而人肝細(xì)胞癌Hep G2細(xì)胞則有較高的SRSF3蛋白表達(dá),當(dāng)用不同濃度的TPL處理肝細(xì)胞癌Hep G2細(xì)胞72h后,Hep G2細(xì)胞內(nèi)S...

【文章頁數(shù)】：42 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中英文對照表
中文摘要
英文摘要
前言
材料和方法
    1. 實驗材料
        1.1 細(xì)胞株
        1.2 主要實驗試劑
        1.3 實驗儀器和設(shè)備
    2. 實驗方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)與傳代
        2.2 MTT細(xì)胞增殖實驗
        2.3 流式細(xì)胞儀檢測TPL處理72h后HepG2細(xì)胞凋亡率的變化
        2.4 Western blot檢測不同濃度TPL對肝癌細(xì)胞株HepG2細(xì)胞內(nèi)SRSF3蛋白表達(dá)的影響
        2.5 熒光定量PCR檢測不同濃度TPL對HepG2細(xì)胞mRNA表達(dá)水平的影響
    3. 統(tǒng)計學(xué)分析
結(jié)果
    1. 顯微鏡下觀察不同濃度TPL處理72h后HepG2細(xì)胞形態(tài)的變化
    2. MTT檢測不同濃度TPL處理72h后HepG2細(xì)胞生長抑制率的變化
    3. 流式細(xì)胞儀檢測不同濃度TPL處理HepG2細(xì)胞72h后細(xì)胞凋亡率的變化
    4. Westernblot檢測不同濃度TPL處理細(xì)胞72h后細(xì)胞內(nèi)SRSF3蛋白的表達(dá)變化
    5. 熒光定量PCR檢測不同濃度TPL處理細(xì)胞后細(xì)胞內(nèi)SRSF3 mRNA表達(dá)量的變化
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
綜述 SRSF3:人類疾病中扮演著重要角色
    參考文獻(xiàn)



本文編號：3832342