β-欖香烯對人胃癌細胞的影響及其部分機制
發(fā)布時間:2023-06-04 02:05
胃癌是一種常見的惡性腫瘤,尤其在我國其發(fā)病率和死亡率位居全國第二[1]。胃癌臨床治療的模式以早期癌癥的手術(shù)切除為主。但大量的胃癌患者被確診時即進入了進展期。對于這些患者,通常采取全身化療、放療的方式治療,但存在著嚴重的不良反應(yīng),且生存率低的問題。胃癌侵襲、轉(zhuǎn)移是胃癌患者治愈率差主要原因。腫瘤轉(zhuǎn)移的過程十分復雜,主要包括腫瘤細胞脫離原發(fā)部位,逐步浸潤周邊組織以及進入血液循環(huán)系統(tǒng)和淋巴循環(huán)系統(tǒng),通過循環(huán)轉(zhuǎn)移到遠處靶器官和組織,形成轉(zhuǎn)移灶。胃癌的侵襲、轉(zhuǎn)移嚴重威脅著人類的健康,因此,探究抗胃癌的分子機制以及尋找天然的治療胃癌的有效藥物顯得尤為迫切。欖香烯是從中醫(yī)草本姜黃屬莪術(shù)的根莖中分離出的化合物,作為化療輔助藥物廣泛用于各種實體腫瘤的治療。欖香烯抗腫瘤機制十分復雜,包括直接抑制殺傷腫瘤細胞、誘導腫瘤細胞凋亡分化、抗腫瘤細胞浸潤和轉(zhuǎn)移等。β-欖香烯是欖香烯的主要活性成分,作為一種新型的抗腫瘤單體化合物也已顯現(xiàn)出其獨特優(yōu)勢。β-欖香烯可以調(diào)控多條信號通路,參與多種激酶的磷酸化過程,如Ras/MARK/ERK和PI3K/Akt/m TOR通路。研究已證實了β-欖香烯能誘導腫瘤細胞凋亡和機體保護性...
【文章頁數(shù)】:81 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
英文縮略詞表(Abbreviation)
中文摘要
英文摘要
前言
實驗
實驗一 β-欖香烯對人胃癌細胞的增殖、凋亡和周期的影響
1 實驗材料
1.1 實驗用細胞株
1.2 實驗藥物
1.3 實驗試劑
1.4 主要試劑配制
2 儀器與設(shè)備
3 實驗方法
3.1 細胞培養(yǎng)
3.1.1 細胞復蘇
3.1.2 細胞換液
3.1.3 細胞傳代
3.1.4 細胞凍存
3.2 MTS法檢測β-欖香烯對細胞的增殖抑制作用
3.3 檢測細胞凋亡
3.3.1 Hoechst染色檢測細胞凋亡
3.3.2 流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡
3.4 流式細胞術(shù)檢測細胞周期
3.5 統(tǒng)計學處理
4 實驗結(jié)果
4.1 β-欖香烯對細胞的增殖抑制作用
4.1.1 β-欖香烯對人胃癌細胞 SGC7901 細胞的增殖抑制作用
4.1.2 β-欖香烯對人胃癌細胞 BGC823 細胞的增殖抑制作用
4.2 β-欖香烯對胃癌細胞凋亡的影響
4.2.1 Hoechst 33342 細胞染色法測定β-欖香烯對SGC7901、BGC823細胞凋亡的影響
4.2.2 流式細胞儀檢測β-欖香烯對人胃癌 SGC7901、BGC823 細胞凋亡的影響
4.3 β-欖香烯對胃癌細胞周期的影響
4.3.1 β-欖香烯對胃癌SGC7901細胞周期的影響
4.3.2 β-欖香烯對胃癌BGC7901細胞周期的影響
實驗二 β-欖香烯抑制胃癌細胞的侵襲和遷移
1 實驗材料
1.1 實驗用細胞株
1.2 實驗藥物
1.3 實驗試劑
1.4 主要試劑配制
2 儀器與設(shè)備
3 實驗方法
3.1 細胞劃痕實驗
3.2 Transwell細胞遷移實驗
3.3 Transwell體外侵襲實驗
3.4 統(tǒng)計學處理
4 實驗結(jié)果
4.1 劃痕實驗測定β-欖香烯對SGC7901、BGC823遷移抑制作用
4.2 Transwell實驗測定β-欖香烯對SGC7901、BGC823遷移、侵襲抑制作用
實驗三 β-欖香烯對胃癌作用的的部分機制
1 實驗材料
1.1 實驗用細胞株
1.2 實驗藥物
1.3 實驗試劑
1.4 實驗主要試劑配制
2 儀器與設(shè)備
3 實驗方法
3.1 LOX酶活性檢測
3.2 Western blot法檢測LOX蛋白表達
3.2.1 胃癌細胞系SGC7901的計數(shù)
3.2.2 胃癌細胞系SGC7901的總蛋白提取
3.2.3 BCA蛋白定量
3.2.4 Western blot實驗方法
3.3 熒光定量PCR檢測LOX mRNA
3.3.1 RNA提取
3.3.2 設(shè)計并合成引物
3.4 統(tǒng)計學處理
4 實驗結(jié)果
4.1 β-欖香烯抑制LOX酶活性
4.2 Western blot分析β-欖香烯對SGC7901細胞LOX蛋白表達的影響
4.3 β- 欖香烯對SGC7901細 胞integrinβ1、FAK、E-cadherin、N-cadherin表達的影響
4.4 熒光定量PCR檢測β-欖香烯對SGC7901細胞LOX mRNA的影響
討論
結(jié)論
本研究的不足
附錄
致謝
參考文獻
綜述 賴氨酰氧化酶家族與腫瘤微環(huán)境的研究進展
參考文獻
本文編號:3830473
【文章頁數(shù)】:81 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
英文縮略詞表(Abbreviation)
中文摘要
英文摘要
前言
實驗
實驗一 β-欖香烯對人胃癌細胞的增殖、凋亡和周期的影響
1 實驗材料
1.1 實驗用細胞株
1.2 實驗藥物
1.3 實驗試劑
1.4 主要試劑配制
2 儀器與設(shè)備
3 實驗方法
3.1 細胞培養(yǎng)
3.1.1 細胞復蘇
3.1.2 細胞換液
3.1.3 細胞傳代
3.1.4 細胞凍存
3.2 MTS法檢測β-欖香烯對細胞的增殖抑制作用
3.3 檢測細胞凋亡
3.3.1 Hoechst染色檢測細胞凋亡
3.3.2 流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡
3.4 流式細胞術(shù)檢測細胞周期
3.5 統(tǒng)計學處理
4 實驗結(jié)果
4.1 β-欖香烯對細胞的增殖抑制作用
4.1.1 β-欖香烯對人胃癌細胞 SGC7901 細胞的增殖抑制作用
4.1.2 β-欖香烯對人胃癌細胞 BGC823 細胞的增殖抑制作用
4.2 β-欖香烯對胃癌細胞凋亡的影響
4.2.1 Hoechst 33342 細胞染色法測定β-欖香烯對SGC7901、BGC823細胞凋亡的影響
4.2.2 流式細胞儀檢測β-欖香烯對人胃癌 SGC7901、BGC823 細胞凋亡的影響
4.3 β-欖香烯對胃癌細胞周期的影響
4.3.1 β-欖香烯對胃癌SGC7901細胞周期的影響
4.3.2 β-欖香烯對胃癌BGC7901細胞周期的影響
實驗二 β-欖香烯抑制胃癌細胞的侵襲和遷移
1 實驗材料
1.1 實驗用細胞株
1.2 實驗藥物
1.3 實驗試劑
1.4 主要試劑配制
2 儀器與設(shè)備
3 實驗方法
3.1 細胞劃痕實驗
3.2 Transwell細胞遷移實驗
3.3 Transwell體外侵襲實驗
3.4 統(tǒng)計學處理
4 實驗結(jié)果
4.1 劃痕實驗測定β-欖香烯對SGC7901、BGC823遷移抑制作用
4.2 Transwell實驗測定β-欖香烯對SGC7901、BGC823遷移、侵襲抑制作用
實驗三 β-欖香烯對胃癌作用的的部分機制
1 實驗材料
1.1 實驗用細胞株
1.2 實驗藥物
1.3 實驗試劑
1.4 實驗主要試劑配制
2 儀器與設(shè)備
3 實驗方法
3.1 LOX酶活性檢測
3.2 Western blot法檢測LOX蛋白表達
3.2.1 胃癌細胞系SGC7901的計數(shù)
3.2.2 胃癌細胞系SGC7901的總蛋白提取
3.2.3 BCA蛋白定量
3.2.4 Western blot實驗方法
3.3 熒光定量PCR檢測LOX mRNA
3.3.1 RNA提取
3.3.2 設(shè)計并合成引物
3.4 統(tǒng)計學處理
4 實驗結(jié)果
4.1 β-欖香烯抑制LOX酶活性
4.2 Western blot分析β-欖香烯對SGC7901細胞LOX蛋白表達的影響
4.3 β- 欖香烯對SGC7901細 胞integrinβ1、FAK、E-cadherin、N-cadherin表達的影響
4.4 熒光定量PCR檢測β-欖香烯對SGC7901細胞LOX mRNA的影響
討論
結(jié)論
本研究的不足
附錄
致謝
參考文獻
綜述 賴氨酰氧化酶家族與腫瘤微環(huán)境的研究進展
參考文獻
本文編號:3830473
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