阿爾茨海默癥(Alzheimer’s disease,AD)是一種漸進(jìn)性神經(jīng)功能退行性疾病,通常會(huì)在海馬、皮質(zhì)等組織出現(xiàn)選擇性神經(jīng)元丟失和變性、大量淀粉樣斑塊(SP)沉積以及神經(jīng)原纖維纏結(jié)(NFTs),甚至導(dǎo)致神經(jīng)死亡。由于發(fā)病機(jī)理復(fù)雜,目前還沒有有效的預(yù)防及治療措施,AD已成為老年人的健康和正常的生活的一大威脅。近年來研究發(fā)現(xiàn),5-甲基胞嘧啶(5mC)會(huì)被TET蛋白家族氧化形成5-羥甲基胞嘧啶(5hmC),而5hmC作為DNA去甲基化的關(guān)鍵中間體對(duì)于維持機(jī)體的正常生理功能具有重要意義。已有一系列研究證實(shí),DNA甲基化失調(diào)(5mC/5hmC)現(xiàn)象與一些疾病發(fā)生和發(fā)展關(guān)系密切,在AD等神經(jīng)退行性疾病中,存在DNA甲基化失調(diào)現(xiàn)象。本研究選擇了5種已被證實(shí)具有改善記憶、神經(jīng)保護(hù)以及增強(qiáng)免疫等作用的天然化合物(蟲草素、蟲草酸、梔子苷、藏紅花素以及麥角甾醇)以及目前研究較深入的天然化合物白藜蘆醇為陽性對(duì)照進(jìn)行細(xì)胞水平的研究,以發(fā)掘具有能調(diào)控5hmC水平以及改善AD神經(jīng)元狀態(tài)的天然化合物。通過Dot Blot實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),高濃度的蟲草素、蟲草酸、白藜蘆醇和藏紅花素均能顯著的增加5hmC的表達(dá)水平;結(jié)合...

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 研究背景
    1.阿爾茨海默癥
    2.DNA甲基化與神經(jīng)退行性疾病
    3.阿爾茨海默癥相關(guān)藥物
    4.技術(shù)路線
    5.研究目的及意義
第二章 不同化合物處理對(duì)SHSY-5Y細(xì)胞甲基化的影響
    1.實(shí)驗(yàn)材料與方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)儀器及試劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)方法
            1.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            1.3.2 結(jié)晶紫染色法檢測(cè)細(xì)胞成活率
            1.3.3 提取細(xì)胞DNA及DotBlot檢測(cè)
            1.3.4 細(xì)胞RNA提取和RT-PCR
    2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.1 細(xì)胞存活率測(cè)試
            2.1.1 不同劑量化合物處理?xiàng)l件下293T細(xì)胞存活率
            2.1.2 不同劑量化合物處理?xiàng)l件下SHSY-5Y細(xì)胞存活率
        2.2 SHSY-5Y在不同化合物處理后5hmC表達(dá)情況
        2.3 DNA甲基化相關(guān)基因檢測(cè)
            2.3.1 semi-qPCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果
            2.3.2 RT-PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.討論
第三章 不同化合物對(duì)SHSY-5Y及原代神經(jīng)元形態(tài)的影響
    1.實(shí)驗(yàn)材料及方法
        1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.2 實(shí)驗(yàn)方法
            1.2.1 小鼠原代神經(jīng)元培養(yǎng)
            1.2.2 細(xì)胞免疫熒光方法
    2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.1 不同化合物處理后對(duì)神經(jīng)細(xì)胞誘導(dǎo)分化的影響
            2.1.1 蟲草素對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的誘導(dǎo)分化
            2.1.2 蟲草酸對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的誘導(dǎo)分化
            2.1.3 白藜蘆醇對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的誘導(dǎo)分化
        2.2 不同化合物處理后對(duì)SHSY-5Y細(xì)胞DNA的損傷
        2.3 不同化合物處理對(duì)小鼠原代神經(jīng)元的影響
            2.3.1 不同化合物處理對(duì)WT小鼠原代神經(jīng)元的影響
            2.3.2 不同化合物處理對(duì)AD小鼠原代神經(jīng)元的影響
    3.討論
第四章 總結(jié)與展望
參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間完成的科研成果
致謝



本文編號(hào)：3814294