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基于JAK1/STAT6通路探討安腸愈瘍湯對HT-29細(xì)胞炎癥模型的影響及機(jī)制研究

發(fā)布時間:2023-05-10 19:38
  [目的]觀察安腸愈瘍湯對脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的HT-29細(xì)胞炎癥模型蛋白酪氨酸激酶1(JAK1)/信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄活化因子6(STAT6)通路的影響,并探討其作用機(jī)制。[方法]實(shí)驗(yàn)分為6組,空白組、模型組、安腸愈瘍湯低、中、高濃度組(0.1、1、10 mg/mL)、美沙拉秦組(1 mg/L),空白組不做任何處理,模型組給予LPS誘導(dǎo),其余各組在LPS誘導(dǎo)后分別給予相應(yīng)藥物干預(yù)。干預(yù)24 h后分別應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法、免疫熒光技術(shù)檢測各組白細(xì)胞介素(IL)-13、腸三葉因子3(TFF3)的表達(dá),分別應(yīng)用實(shí)時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(Q-RT-PCR)技術(shù)、蛋白免疫印跡(Western Blot)法檢測各組IL-13、JAK1、STAT6、TFF3 mRNA及蛋白的表達(dá)。[結(jié)果]與空白組比較,模型組IL-8水平上調(diào)(P<0.01),IL-13水平下調(diào)(P<0.01),提示炎癥模型構(gòu)建成功,模型組JAK1、STAT6、TFF3的水平也不同程度降低(P<0.05或P<0.01)。與模型組比較,各用藥組IL-13、TFF3分泌水平增加、熒光強(qiáng)度增強(qiáng)(P<0.0...

【文章頁數(shù)】:7 頁

【文章目錄】:
1 材料
    1.1 細(xì)胞
    1.2 藥物制備
    1.3 試劑
    1.4 儀器
2 方法
    2.1 HT-29細(xì)胞炎癥模型建立
    2.2 安腸愈瘍湯濃度的篩選
    2.3 分組及干預(yù)
    2.4 應(yīng)用ELISA法檢測各組IL-13、TFF3的分泌水平
    2.5 應(yīng)用免疫熒光檢測各組IL-13、TFF3的熒光強(qiáng)度
    2.6 Q-RT-PCR檢測各組IL-13、JAK1、STAT6、TFF3mRNA的表達(dá)
    2.7 應(yīng)用蛋白免疫印跡(Western Blot)法檢測IL-13、JAK1、STAT6、TFF3蛋白的表達(dá)
    2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
3 結(jié)果
    3.1 HT-29細(xì)胞炎癥模型的建立
    3.2 不同濃度安腸愈瘍湯對HT-29細(xì)胞活力的影響
    3.3 安腸愈瘍湯對LPS誘導(dǎo)的HT-29細(xì)胞IL-13、TFF3分泌水平的影響
    3.4安腸愈瘍湯對LPS誘導(dǎo)HT-29細(xì)胞IL-13、TFF3熒光強(qiáng)度的影響
    3.5 安腸愈瘍湯對LPS誘導(dǎo)的HT-29細(xì)胞IL-13、JAK1、STAT6、TFF3 mRNA和蛋白表達(dá)的影響
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