鷹嘴豆芽素A緩解PM 2.5 有機提取物所致炎癥作用機制研究
發(fā)布時間：2023-03-23 23:56
炎癥是機體受到PM2.5刺激時發(fā)生的防御性應激反應,在PM2.5所致肺損傷的發(fā)生和發(fā)展中扮演關鍵作用。鷹嘴豆芽素A(biochanin A)是具有抗炎、抗氧化活性的異黃酮類化合物,能夠有效干預PM2.5所致肺損傷。本論文通過建立體外細胞模型,并結合計算機模擬分子對接理論和方法,探究鷹嘴豆芽素A緩解PM2.5有機提取物所致炎癥的作用機制。基于A549人肺腺癌細胞,評價PM2.5有機提取物致炎效果及biochanin A抗炎活性。結果表明,biochanin A(10μM和20μM)能顯著抑制PM2.5有機提取物(150μg/mL)引起的炎癥因子IL-8、IL-6、IL-1β、TNFα的表達及釋放,促進NO和PGE2的合成及其對應的關鍵合成酶基因iNOS和COX2的轉錄。通過GC-MS技術對PM2.5有機提取物主要成分進行分析,結果顯示:PM2.5樣品有機溶出物成分復雜,共分離出13個色譜峰,鑒...
【文章頁數(shù)】：93 頁
【學位級別】：碩士
【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 文獻綜述
1.1 PM2.5概述
1.1.1 PM2.5成分及危害
1.1.2 PM2.5作用機制
1.1.3 PM2.5損傷干預
1.2 炎癥信號通路
1.2.1 NF-κB信號通路概述
1.2.2 NF-κB信號與PM2.5所致炎癥
1.2.3 MAPK信號與PM2.5所致炎癥
1.2.4 MEK5/ERK5信號概述
1.2.5 MEK5/ERK5信號調控炎癥與免疫
1.2.6 MEK5/ERK5信號調控NF-κB
1.3 鷹嘴豆芽素A
1.4 研究目的及意義
1.5 研究內容和技術路線
1.5.1 研究內容
1.5.2 技術路線
第2章 鷹嘴豆芽素A對PM2.5有機提取物所致炎癥作用研究
2.1 材料與儀器
2.1.1 細胞株
2.1.2 實驗試劑與耗材
2.1.3 實驗儀器
2.2 實驗方法
2.2.1 PM2.5采集及有機組分提取
2.2.2 PM2.5有機提取物成分分析
2.2.3 細胞培養(yǎng)
2.2.4 細胞分組及處理
2.2.5 MTT實驗
2.2.6 LDH實驗
2.2.7 炎癥因子/介質的測定
2.2.8 基因表達測定
2.2.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
2.3 實驗結果與討論
2.3.1 PM2.5有機提取物致細胞損傷作用評價
2.3.2 biochanin A安全作用劑量考察
2.3.3 PM2.5暴露-biochanin A保護體外細胞模型的建立
2.3.4 biochanin A抗炎作用評價
2.3.5 PM2.5有機提取物化學成分分析結果
2.3.6 PM2.5有機提取物化學成分與炎癥反應相關性
2.4 本章小結
第3章 鷹嘴豆芽素A緩解PM2.5有機提取物所致炎癥作用機制
3.1 材料與儀器
3.1.1 細胞株
3.1.2 實驗試劑與耗材
3.1.3 實驗儀器
3.2 實驗方法
3.2.1 細胞總蛋白提取
3.2.2 細胞核蛋白提取
3.2.3 蛋白濃度測定及變性處理
3.2.4 蛋白質免疫印記實驗
3.2.5 基因表達測定
3.2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
3.3 實驗結果與討論
3.3.1 biochanin A抑制MEK5/ERK5信號通路
3.3.2 biochanin A抑制NF-κB信號通路
3.3.3 biochanin A通過抑制MEK5/ERK5和NF-κB通路緩解炎癥
3.4 本章小結
第4章 鷹嘴豆芽素A與MEK5靶點分子互作機制研究
4.1 分子模擬平臺
4.2 分子對接
4.2.1 準備文件
4.2.2 biochanin A與MEK5的分子對接
4.3 結果與討論
4.4 本章小結
第5章 全文結論
參考文獻
附錄A
發(fā)表論文和參加科研情況說明
致謝
本文編號：3769015
【文章頁數(shù)】：93 頁
【學位級別】：碩士
【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 文獻綜述
1.1 PM2.5概述
1.1.1 PM2.5成分及危害
1.1.2 PM2.5作用機制
1.1.3 PM2.5損傷干預
1.2 炎癥信號通路
1.2.1 NF-κB信號通路概述
1.2.2 NF-κB信號與PM2.5所致炎癥
1.2.3 MAPK信號與PM2.5所致炎癥
1.2.4 MEK5/ERK5信號概述
1.2.5 MEK5/ERK5信號調控炎癥與免疫
1.2.6 MEK5/ERK5信號調控NF-κB
1.3 鷹嘴豆芽素A
1.4 研究目的及意義
1.5 研究內容和技術路線
1.5.1 研究內容
1.5.2 技術路線
第2章 鷹嘴豆芽素A對PM2.5有機提取物所致炎癥作用研究
2.1 材料與儀器
2.1.1 細胞株
2.1.2 實驗試劑與耗材
2.1.3 實驗儀器
2.2 實驗方法
2.2.1 PM2.5采集及有機組分提取
2.2.2 PM2.5有機提取物成分分析
2.2.3 細胞培養(yǎng)
2.2.4 細胞分組及處理
2.2.5 MTT實驗
2.2.6 LDH實驗
2.2.7 炎癥因子/介質的測定
2.2.8 基因表達測定
2.2.9 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
2.3 實驗結果與討論
2.3.1 PM2.5有機提取物致細胞損傷作用評價
2.3.2 biochanin A安全作用劑量考察
2.3.3 PM2.5暴露-biochanin A保護體外細胞模型的建立
2.3.4 biochanin A抗炎作用評價
2.3.5 PM2.5有機提取物化學成分分析結果
2.3.6 PM2.5有機提取物化學成分與炎癥反應相關性
2.4 本章小結
第3章 鷹嘴豆芽素A緩解PM2.5有機提取物所致炎癥作用機制
3.1 材料與儀器
3.1.1 細胞株
3.1.2 實驗試劑與耗材
3.1.3 實驗儀器
3.2 實驗方法
3.2.1 細胞總蛋白提取
3.2.2 細胞核蛋白提取
3.2.3 蛋白濃度測定及變性處理
3.2.4 蛋白質免疫印記實驗
3.2.5 基因表達測定
3.2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析
3.3 實驗結果與討論
3.3.1 biochanin A抑制MEK5/ERK5信號通路
3.3.2 biochanin A抑制NF-κB信號通路
3.3.3 biochanin A通過抑制MEK5/ERK5和NF-κB通路緩解炎癥
3.4 本章小結
第4章 鷹嘴豆芽素A與MEK5靶點分子互作機制研究
4.1 分子模擬平臺
4.2 分子對接
4.2.1 準備文件
4.2.2 biochanin A與MEK5的分子對接
4.3 結果與討論
4.4 本章小結
第5章 全文結論
參考文獻
附錄A
發(fā)表論文和參加科研情況說明
致謝
本文編號：3769015
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