發(fā)布時(shí)間：2023-03-21 19:52

　　實(shí)驗(yàn)?zāi)康谋菊n題運(yùn)用血清藥理學(xué)方法,觀察葆菁口服液含藥血清對體外培養(yǎng)人正常黑素細(xì)胞體系中黑素合成,及其對黑素細(xì)胞與角質(zhì)形成細(xì)胞共培養(yǎng)體系中黑素小體轉(zhuǎn)運(yùn)的影響,并探討其作用機(jī)制,為葆菁口服液改善黃褐斑癥狀提供理論依據(jù)。實(shí)驗(yàn)方法血清藥理學(xué)方法制備中藥含藥血清。建立人正常黑素細(xì)胞體外培養(yǎng)體系,分別采用MTT比色法、酪氨酸酶多速率氧化法、NaOH裂解法測定黑素細(xì)胞增殖、酪氨酸酶活性、黑素含量,RT-PCR測定酪氨酸酶mRNA表達(dá)量;建立體外黑素細(xì)胞與角質(zhì)形成細(xì)胞共培養(yǎng)體系,pull-down法檢測黑素細(xì)胞RhoA及Rac1蛋白的表達(dá)情況、應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測黑素小體轉(zhuǎn)運(yùn)的情況。以維生素C作為對照組。應(yīng)用SPSS16.0軟件對實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果1MTT法測定黑素細(xì)胞增殖,與生理鹽水組相比較,葆菁口服液組、維生素C組對黑素細(xì)胞的增殖的影響無明顯差異,組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。NaOH裂解法測定黑素含量,與生理鹽水組比較,葆菁口服液、維生素C含藥血清可降低黑素合成量,兩組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。多巴氧化法對酪氨酸酶活性進(jìn)行測定,與生理鹽水組比較,葆菁口服...

【文章頁數(shù)】：51 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
第一章 理論研究
    1. 中醫(yī)學(xué)對黃褐斑的認(rèn)識(shí)
        1.1 黃褐斑病名的歷史沿革
        1.2 黃褐斑的病因
        1.3 黃褐斑的病機(jī)
        1.4 黃褐斑的中醫(yī)治療
    2. 西醫(yī)對黃褐斑的認(rèn)識(shí)
        2.1 西醫(yī)對黃褐斑病因及發(fā)病機(jī)制的研究
        2.2 西醫(yī)對黃褐斑治療方法的研究
    3. 當(dāng)歸芍藥散治療黃褐斑的研究
        3.1 當(dāng)歸芍藥散治療黃褐斑的臨床研究
        3.2 當(dāng)歸芍藥散治療黃褐斑的基礎(chǔ)研究
        3.3 當(dāng)歸芍藥散所涉及單味中藥的研究
第二章 實(shí)驗(yàn)研究
    第一部分 葆菁口服液含藥血清對黑素合成的影響
        1 實(shí)驗(yàn)材料
            1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            1.2 藥物和試劑
            1.3 主要儀器
        2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 中藥含藥血清的制備
            2.2 黑素細(xì)胞的培養(yǎng)
            2.3 細(xì)胞含藥血清處理及數(shù)據(jù)測定
        3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
        4 結(jié)果
            4.1 黑素細(xì)胞鑒定
            4.2 葆菁口服液含藥血清對黑素細(xì)胞增殖的影響
            4.3 葆菁口服液含藥血清對黑素含量的影響
            4.4 葆菁口服液含藥血清對TYR活性及TYRmRNA表達(dá)的影響
    第二部分 葆菁口服液含藥血清對黑素轉(zhuǎn)運(yùn)的影響
        1 實(shí)驗(yàn)材料
            1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
            1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.1 含藥血清的制備、細(xì)胞原代培養(yǎng)、黑素細(xì)胞培養(yǎng)
            2.2 角質(zhì)形成細(xì)胞培養(yǎng)
            2.3 角質(zhì)形成細(xì)胞的鑒定
            2.4 顯微鏡下觀察黑素細(xì)胞樹突生成的情況
            2.5 Pull-down法檢黑素細(xì)胞RhoA和Rac1蛋白的表達(dá)
            2.6 流式細(xì)胞術(shù)檢測共培養(yǎng)細(xì)胞體系中黑素轉(zhuǎn)運(yùn)的情況
        3 統(tǒng)計(jì)
        4 結(jié)果
            4.1 角質(zhì)形成細(xì)胞鑒定
            4.2 葆菁口服液對黑素細(xì)胞形態(tài)的影響
            4.3 葆菁口服液含藥血清對RhoA、Rac1蛋白表達(dá)的影響
            4.4 葆菁口服液含藥血清對黑素轉(zhuǎn)運(yùn)的影響
第三章 討論
    1. 導(dǎo)師對黃褐斑的病機(jī)認(rèn)識(shí)及特色治療
        1.1 整體觀念、注重肝脾
        1.2 肝脾同治、氣血同調(diào)
    2. 葆菁口服液組方特色
        2.1 配伍意義
        2.2 復(fù)方特色
    3. 研究結(jié)果分析
        3.1 葆菁口服液含藥血清對黑素細(xì)胞增殖、黑素合成、酪氨酸酶活性及其mRNA表達(dá)的影響
        3.2 葆菁口服液含藥血清對樹突形態(tài)、RhoA、Rac1蛋白表達(dá)及黑素小體轉(zhuǎn)運(yùn)的影響
    4. 不足與展望
參考文獻(xiàn)
附錄
攻讀碩士學(xué)位期間取得的學(xué)術(shù)成果
致謝



本文編號：3767191