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抗菌中藥、氯己定、抗生素介導(dǎo)金黃色葡萄球菌交叉耐藥及其機(jī)制研究

發(fā)布時間:2023-03-07 18:25
  目的:通過分析三類抗菌藥物(消毒劑、抗生素和抗菌中藥)介導(dǎo)金黃色葡萄球菌產(chǎn)生交叉耐藥,揭示這三類抗菌藥物與細(xì)菌耐藥性之間的內(nèi)在聯(lián)系,并深入研究抗菌中藥引起細(xì)菌對抗生素產(chǎn)生交叉耐藥的機(jī)制,為指導(dǎo)新型抗菌試劑與抗菌中藥復(fù)方的研發(fā)提供理論依據(jù)。這對規(guī)范我國抗菌藥物尤其是抗菌中藥的臨床用藥有重要意義,也對中藥的長遠(yuǎn)發(fā)展起到揚(yáng)長避短的作用。方法:1.根據(jù)抗性分析結(jié)果,選擇亞致死劑量的氯己定(Chlohexidine diacetate,CHX)、四環(huán)素(Tetracycline,TET)、黃連水提液(Rhizoma coptidis extract,RCE)和三種中成藥(葛根芩連丸(GGQL)、香連丸(XLW)和雙黃連口服液(SHL))連續(xù)誘導(dǎo)細(xì)菌12天,通過最低抑菌濃度(MIC)檢測細(xì)菌藥敏變化,分析交叉耐藥情況,實(shí)驗(yàn)平行誘導(dǎo)細(xì)菌3次。取誘導(dǎo)后的菌株進(jìn)行回復(fù)突變,分析MIC的變化情況。通過藥物接觸菌株和回復(fù)突變菌株的抗性分析,與各自初始菌株的MIC值比較,發(fā)生交叉耐藥的菌株,標(biāo)記為變異菌株。2.分析變異菌株的生理生化特征變化,并通過16S r DNA的PCR擴(kuò)增后,在Blast網(wǎng)站分析比對變異...

【文章頁數(shù)】:81 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
ABSTRACT
引言
第一章 金黃色葡萄球菌的耐藥誘導(dǎo)試驗(yàn)
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)菌種
        1.2 實(shí)驗(yàn)藥品與試劑
        1.3 儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 藥液及培養(yǎng)液的配制
        2.2 菌液的制備
        2.3 最低抑菌濃度(MIC)的測定
        2.4 耐藥誘導(dǎo)實(shí)驗(yàn)
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        3.1 CHX誘導(dǎo)細(xì)菌交叉耐藥結(jié)果
        3.2 TET誘導(dǎo)細(xì)菌交叉耐藥結(jié)果
        3.3 中藥誘導(dǎo)細(xì)菌交叉耐藥結(jié)果
    4 討論
第二章 藥物接觸菌株的回復(fù)突變試驗(yàn)
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)菌種
        1.2 實(shí)驗(yàn)藥品與試劑
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 藥液及培養(yǎng)液的制備
        2.2 菌液的制備
        2.3 最低抑菌濃度(MIC)的測定
        2.4 回復(fù)突變實(shí)驗(yàn)
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
    4 討論
第三章 變異菌株的生理生化試驗(yàn)
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)菌種
        1.2 實(shí)驗(yàn)藥品與試劑
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 藥液及培養(yǎng)液的制備
        2.2 菌液的制備
        2.3 誘導(dǎo)前后菌落形態(tài)的比較
        2.4 蜂群運(yùn)動能力測定
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        3.1 誘導(dǎo)前后菌落形態(tài)的比較
        3.2 蜂群運(yùn)動能力測定
    4 討論
第四章 變異菌株的 16S rDNA序列分析試驗(yàn)
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)菌種
        1.2 實(shí)驗(yàn)藥品與試劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 培養(yǎng)液的制備
        2.2 菌液及緩沖液的制備
        2.3 細(xì)菌基因組DNA的提取
        2.4 細(xì)菌基因組DNA產(chǎn)物的濃度及純度檢測
        2.5 PCR擴(kuò)增
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
        3.1 PCR產(chǎn)物的電泳檢測
        3.2 根據(jù)測序結(jié)果,到NCBI Blast項(xiàng)目上進(jìn)行比對
    4 討論
第五章 變異菌株對阿米卡星耐藥機(jī)制分析
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)菌種
        1.2 實(shí)驗(yàn)藥品與試劑
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 培養(yǎng)液的制備
        2.2 菌液及緩沖液的制備
        2.3 細(xì)菌基因組DNA的提取
        2.4 細(xì)菌基因組DNA產(chǎn)物的濃度及純度測定
        2.5 PCR擴(kuò)增
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
    4 討論
參考文獻(xiàn)
縮略詞表
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡歷及攻讀學(xué)位期間獲得的科研成果



本文編號:3757666

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