目的研究九龍?zhí)倏傸S酮(Bauhinia championii flavones,BCF)對心肌缺血/缺氧損傷的抑制作用及機制。方法培養(yǎng)H9c2大鼠心肌細胞,建立OGD模型模擬心肌缺血/缺氧,給予或不給予BCF預(yù)處理。以Giemsa染色法觀察細胞形態(tài);CCK-8檢測細胞活力;ELISA檢測細胞培養(yǎng)上清液中心肌肌鈣蛋I(cTnI)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量;腺病毒(Ad-mRFP-GFP-LC3)轉(zhuǎn)染觀察自噬體及自噬溶酶體數(shù)量;RT-qPCR檢測LC3、P62 mRNA表達;Western blot檢測自噬相關(guān)蛋白表達。結(jié)果與模型組相比,BCF預(yù)處理明顯改善心肌細胞形態(tài)和細胞活力,降低cTnI及CK-MB含量,下調(diào)LC3、P62基因及Cathepsin D蛋白表達,上調(diào)P62蛋白表達,減少LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,抑制自噬(P<0.05 or P<0.01)。結(jié)論 BCF通過抑制自噬減輕心肌缺血/缺氧損傷。

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料
    1.1 H9c2大鼠心肌細胞
    1.2 試劑
    1.3 儀器
2 方法
    2.1 細胞培養(yǎng)與OGD模型的建立
    2.2 藥物預(yù)處理與分組
    2.3 Giemsa染色法觀察H9c2心肌細胞形態(tài)
    2.4 CCK-8檢測細胞活力
    2.5 Elisa檢測cTnI和CK-MB含量
    2.6 腺病毒(Ad-mRFP-GFP-LC3)轉(zhuǎn)染觀察自噬體及自噬溶酶體數(shù)量
    2.7 RT-qPCR檢測基因的表達
    2.8 Western blot 檢測蛋白表達
    2.9 統(tǒng)計學(xué)分析
3 結(jié)果
    3.1 BCF對缺氧H9c2心肌細胞形態(tài)的影響
    3.2 BCF對缺氧心肌細胞活力的影響
    3.3 BCF對缺氧心肌細胞培養(yǎng)液中cTnI和CK-MB含量的影響
    3.4 BCF對自噬體與自噬溶酶體形成的影響
    3.5 BCF對缺氧心肌細胞LC3、P62 mRNA表達的影響
    3.6 BCF對自噬通量的影響
4 討論



本文編號：3755909