目的觀察加味丹參飲預(yù)處理對(duì)離體大鼠心臟缺血再灌注調(diào)節(jié)心肌細(xì)胞自噬相關(guān)基因蛋白表達(dá)的影響。方法將60只SD大鼠隨性別隨機(jī)分為6組:空白組,缺血預(yù)適應(yīng)組,模型組,全方組(加味丹參飲組),全方+自噬抑制劑組,全方+雷帕霉素組,實(shí)驗(yàn)2周前予以灌胃處理,換算預(yù)處理200g大鼠每日灌胃藥量為1.2g,藥物濃度1g/ml,每日劑量1.2ml,分兩次灌胃。空白組、模型組、缺血預(yù)適應(yīng)組予以等量生理鹽水,全方組、自噬抑制劑組、雷帕霉素組均灌胃中藥,自噬抑制劑組同時(shí)予以腹腔注射3-MA(2mmol/L),給藥劑量3.0mg/200g,其余各組等量腹腔注射生理鹽水;雷帕霉素組同時(shí)予以灌胃雷帕霉素,濃度0.2mg/ml,給藥劑量0.4mg/200g,其余各組灌胃等量生理鹽水。采用Langendorff灌流系統(tǒng)建立離體心臟心肌缺血再灌注模型,對(duì)照組:大鼠心臟用K-H液平衡灌注180 min;缺血再灌注模型組:大鼠心臟先預(yù)灌注20 min,然后再無氧、無灌流液的情況下停止灌流40 min(缺血),心臟始終保持在37℃恒溫槽中,之后再?gòu)?fù)灌2小時(shí)(再灌);缺血預(yù)適應(yīng)組:大鼠心臟預(yù)灌注平衡20 min,缺血5 min,再...

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮寫
前言
第一部分 材料和方法
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.2 實(shí)驗(yàn)藥物
        1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.4 實(shí)驗(yàn)儀器
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 離體心臟缺血再灌注模型建立
        2.2 大鼠離體心臟缺血再灌注模型制備成功的入選標(biāo)準(zhǔn)
        2.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及處理
        2.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物給藥
    3 指標(biāo)檢測(cè)及方法
        3.1 血清心肌酶測(cè)定
        3.2 心功能評(píng)價(jià)
        3.3 光鏡觀察心肌組織病理標(biāo)本的制作
        3.4 透射電子顯微鏡檢測(cè)的標(biāo)本制作
        3.5 實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR法檢測(cè)自噬相關(guān)基因Beclin-1、Atg5m RNA的表達(dá)
        3.6 免疫印跡法檢測(cè)自噬體膜標(biāo)志性蛋白質(zhì)LC3，Beclin-1 表達(dá)
        3.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第二部分 結(jié)果
    1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        1.1 實(shí)驗(yàn)大鼠的情況
        1.2 大鼠心肌缺血再灌注損傷心功能評(píng)價(jià)
        1.3 實(shí)驗(yàn)各組K-H液中心肌酶的變化
        1.4 大鼠心肌病理形態(tài)學(xué)觀察
        1.5 透射電鏡下觀察心肌細(xì)胞超顯微結(jié)構(gòu)
        1.6 加味丹參飲對(duì)離體大鼠缺血再灌注中心肌細(xì)胞自噬Beclin-1、Atg5 m RNA的表達(dá)
        1.7 加味丹參飲對(duì)離體大鼠缺血/再灌注心肌自噬Beclin-1、LC3B蛋白表達(dá)量的影響
第三部分 討論
    1、心肌缺血再灌注損傷的認(rèn)識(shí)
        1.1 西醫(yī)對(duì)心肌缺血再灌注損傷的認(rèn)識(shí)
        1.2 中醫(yī)對(duì)心肌缺血再灌注損傷的認(rèn)識(shí)
    2、自噬的認(rèn)識(shí)
        2.1 西醫(yī)對(duì)細(xì)胞自噬的認(rèn)識(shí)
        2.2 中醫(yī)對(duì)細(xì)胞自噬的認(rèn)識(shí)
        2.3 自噬對(duì)心肌細(xì)胞的作用
    3、加味丹參飲
        3.1 加味丹參飲由來方解
        3.2 加味丹參飲現(xiàn)代藥理研究
        3.3 加味丹參飲前期研究
    4、小結(jié)
        4.1 改善心功能降低CK、LDH的釋放
        4.2 心肌缺血再灌注中Beclin-1、Atg5 m RNA的表達(dá)及Beclin-1、LC3B蛋白的表達(dá)
    5、結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào)：3749591