發(fā)布時間：2023-02-20 20:51

　　目的探討芍藥苷-6′-O-苯磺酸酯(CP-25)對胰島素抵抗人主動脈平滑肌細胞(HASMC)的作用及部分機制。方法 1μmol/L胰島素誘導(dǎo)建立胰島素抵抗HASMC模型;葡萄糖氧化酶法檢測CP-25對胰島素抵抗HASMC葡萄糖消耗量的影響;CCK-8法、Transwell、流式細胞術(shù)檢測細胞的增殖、遷移和凋亡變化;Western blot法測定G蛋白偶聯(lián)受體激酶2(GRK2)、胰島素受體(INSR)、磷酸化胰島素受體底物(p-IRS)、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)和葡萄糖轉(zhuǎn)運體4(GLUT4)的表達;免疫共沉淀法測定GRK2與INSR、GRK2與p-IRS的相互作用。結(jié)果與胰島素模型組相比,CP-25可增加HASMC的葡萄糖消耗,抑制其異常增殖和遷移、促進凋亡;1μmol/L胰島素作用細胞后,CP-25下調(diào)胰島素所致的GRK2的胞膜表達增高,上調(diào)IR-HASMC時INSR、p-IRS、PI3K的表達和GLUT4的胞膜表達;CP-25下調(diào)IR-HASMC時增高的GRK2與INSR、GRK2與p-IRS的共表達。結(jié)論 CP-25可能通過抑制GRK2的膜轉(zhuǎn)位和表達水平,促進INSR/IR...

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 細胞
        1.1.2 主要試劑及儀器
    1.2 方法
        1.2.1 IR模型的建立
        1.2.2 葡萄糖消耗量的檢測
        1.2.3 增殖檢測
        1.2.4 遷移檢測
        1.2.5 凋亡檢測
        1.2.6 蛋白表達檢測
        1.2.7 免疫共沉淀(CO-immunoprecipitation, CO-IP)檢測蛋白相互作用
    1.3 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 CP-25對IR-HASMC葡萄糖消耗的影響
    2.2 CP-25對IR-HASMC增殖、遷移及凋亡的影響
    2.3 CP-25對IR-HASMC GRK2胞膜表達的影響
    2.4 CP-25對IR-HASMC GLUT4胞膜表達水平、INSR、PI3K、IRS和p-IRS表達水平的影響
    2.5 CP-25 對IR-HASMC GRK2 與INSR和GRK2與p-IRS相互作用的影響
3 討論



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