目的:研究脈絡(luò)寧注射液于SD大鼠神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞在糖氧剝奪/復(fù)供損傷后發(fā)揮的保護(hù)作用和抗炎機(jī)制。方法:將神經(jīng)元和星形膠質(zhì)進(jìn)行分離提取及鑒定,運(yùn)用Transwell建立二者的共培養(yǎng)體系。通過(guò)顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),用共聚焦顯微鏡對(duì)神經(jīng)元和星形膠質(zhì)進(jìn)行鑒定。用物理法(95%N₂+5%CO₂)建立SD大鼠神經(jīng)元與星形膠質(zhì)糖氧剝奪/復(fù)供損傷模型.用CCK-8法篩選脈絡(luò)寧最佳保護(hù)濃度并測(cè)定脈絡(luò)寧不同濃度的干預(yù)對(duì)糖氧剝奪/復(fù)供損傷后的神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞保護(hù)作用。用試劑盒法測(cè)不同濃度的脈絡(luò)寧預(yù)處理后對(duì)神經(jīng)元和星形膠質(zhì)漏出量的影響。采用western blot檢測(cè)GLT-1及加入其抑制劑DHK后GLT-1的蛋白表達(dá)量。試劑盒法測(cè)糖氧剝奪/復(fù)供損傷后神經(jīng)元和星形膠質(zhì)共培養(yǎng)分泌的上清液中TNF-α、IL-1β的表達(dá)量。蛋白免疫印跡法檢測(cè)各個(gè)濃度的脈絡(luò)寧預(yù)處理的星形膠質(zhì)細(xì)胞糖氧剝奪/復(fù)供損傷后p-NF-κB p65及IκBα蛋白表達(dá)的變化。結(jié)果:提取分離并培養(yǎng)出了高純度的SD大鼠的神經(jīng)元和星形膠質(zhì),神經(jīng)元和星形膠質(zhì)共培養(yǎng)的體系成功得以建立;脈絡(luò)寧干預(yù)過(guò)的糖氧剝...

【文章頁(yè)數(shù)】：61 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英漢縮略詞名詞對(duì)照
前言
第一部分 SD大鼠星形膠質(zhì)與神經(jīng)元的共培養(yǎng)體系的建立
    1 引言
    2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.2 試劑與藥品
        2.3 主要儀器
        2.4 試劑與藥品的配制方法
    3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1 SD大鼠神經(jīng)元與星形膠質(zhì)細(xì)胞的分離方法
        3.2 神經(jīng)元與星形膠質(zhì)細(xì)胞的鑒定
        3.3 神經(jīng)元與星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)體系的建立
    4 結(jié)果
        4.1 神經(jīng)元與星形膠質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞形態(tài)的觀察
        4.2 SD大鼠神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞的鑒定
    5 討論
    6 小結(jié)
第二部分 脈絡(luò)寧對(duì)SD大鼠神經(jīng)元與星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)糖氧剝奪/復(fù)供損傷的保護(hù)作用
    1 引言
    2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1 試劑
        2.2 儀器
        2.3 試劑與藥品的配制方法
    3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1 CCK-8 法檢測(cè)脈絡(luò)寧對(duì)星形膠質(zhì)的毒性影響
        3.2 脈絡(luò)寧對(duì)神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞糖氧剝奪/復(fù)供損傷的保護(hù)作用
        3.3 脈絡(luò)寧對(duì)SD大鼠神經(jīng)元與星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)糖氧剝奪/復(fù)供損傷的保護(hù)作用
        3.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
    4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.1 脈絡(luò)寧對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞的毒性試驗(yàn)
        4.2 脈絡(luò)寧對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元糖氧剝奪/復(fù)供損傷的保護(hù)作用
        4.3 脈絡(luò)寧對(duì)SD大鼠神經(jīng)元與星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)糖氧剝奪/復(fù)供損傷的保護(hù)作用
    5 討論
    6 小結(jié)
第三部分 脈絡(luò)寧對(duì)SD大鼠神經(jīng)元細(xì)胞與星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)糖氧剝奪/復(fù)供損傷的保護(hù)機(jī)制研究
    引言
    第一節(jié) 脈絡(luò)寧對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體表達(dá)的研究
        1 實(shí)驗(yàn)材料
        2 實(shí)驗(yàn)方法
        3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4 討論
        5 小結(jié)
    第二節(jié) 脈絡(luò)寧對(duì)神經(jīng)元與星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)糖氧剝奪/復(fù)供損傷時(shí)IL-1β、TNF-α炎癥因子的影響
        1 實(shí)驗(yàn)材料
        2 實(shí)驗(yàn)方法
        3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4 討論
    第三節(jié) 谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體抑制劑DHK對(duì)神經(jīng)元與星形膠質(zhì)細(xì)胞共培養(yǎng)糖氧剝奪/復(fù)供損傷時(shí)TNF-α、IL-1β 炎癥因子的影響
        1 實(shí)驗(yàn)材料
        2 實(shí)驗(yàn)方法
        3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4 討論
        5 小結(jié)
第四部分 脈絡(luò)寧對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞糖氧剝奪/復(fù)供損傷時(shí)p-NF-κB p65和IκBα 蛋白表達(dá)的影響
    1 引言
    2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1 試劑與儀器
        2.2 試劑與藥品的配制方法
    3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.1 脈絡(luò)寧對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞糖氧剝奪/復(fù)供損傷模型IκBα 和p-NF-κB p65蛋白表達(dá)的影響
        3.2 BCA蛋白定量
        3.3 western blot檢測(cè)目的蛋白的表達(dá)量
        3.4 數(shù)理統(tǒng)計(jì)
    4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.1 脈絡(luò)寧對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞糖氧剝奪/復(fù)供損傷IκBα 蛋白表達(dá)的影響
        4.2 脈絡(luò)寧對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞糖氧剝奪/復(fù)供損傷p-NF-κB p65蛋白表達(dá)的影響
    5 小結(jié)
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3745486