艾葉為多年生草本植物艾（Artemisia argyi Lévl.et Vant.）的干燥葉,艾葉揮發(fā)油（Artemisia argyi essential oils,AAEO）是艾葉主要的有效成分群之一,主要含有桉油精、樟腦和龍腦等成分,本實(shí)驗(yàn)所用AAEO通過(guò)水蒸氣蒸餾法提得。預(yù)實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)AAEO具有抑制肝癌SMMC-7721細(xì)胞增殖的作用,本課題將深入研究AAEO抗肝癌活性及其β-環(huán)糊精聚合物（β-cyclodextrinpoly mer,β-CDP）微球的制備與評(píng)價(jià)。實(shí)驗(yàn)分為以下四部分:1.AAEO體外抗肝癌活性采用MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖抑制率。結(jié)果表明:在24、48和72 h的IC₅₀分別為353.83、330.88和295.50μg/mL,72 h增殖抑制率最高。通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。結(jié)果顯示:早期凋亡率隨著藥物濃度增加而增大,晚期凋亡率在AAEO濃度高于382.5μg/mL時(shí)驟增,最高可達(dá)到80.84%。熒光倒置顯微鏡觀察AAEO作用于SMMC-7721細(xì)胞后,細(xì)胞形態(tài)變化。結(jié)果表明:AAEO促進(jìn)凋亡過(guò)程發(fā)生發(fā)展,細(xì)胞經(jīng)歷了核呈致密斑塊或碎片狀... 

【文章頁(yè)數(shù)】：100 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
第一章 AAEO體外抗肝癌活性研究
    1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 MTT法檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率
            2.1.1 AAEO溶液的配制
            2.1.2 MTT溶液的配制
            2.1.3 實(shí)驗(yàn)步驟
                2.1.3.1 鋪板給藥
                2.1.3.2 誘導(dǎo)培養(yǎng)
                2.1.3.3 檢測(cè)并計(jì)算抑制率
        2.2 AnnerxinV-FITC/PI雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡率
            2.2.1 誘導(dǎo)培養(yǎng)
            2.2.2 細(xì)胞染色
            2.2.3 流式細(xì)胞儀檢測(cè)
        2.3 熒光顯微鏡觀察細(xì)胞凋亡形態(tài)
            2.3.1 誘導(dǎo)培養(yǎng)
            2.3.2 細(xì)胞染色
            2.3.3 熒光顯微鏡觀察
        2.4 PI單染法檢測(cè)細(xì)胞周期
            2.4.1 誘導(dǎo)培養(yǎng)
            2.4.2 細(xì)胞固定
            2.4.3 細(xì)胞染色
            2.4.4 流式細(xì)胞儀檢測(cè)
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 MTT法檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率
        3.2 AnnerxinV-FITC/PI雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡率
        3.3 熒光顯微鏡觀察細(xì)胞凋亡形態(tài)
        3.4 PI單染法檢測(cè)細(xì)胞周期
    4 討論與小結(jié)
第二章 AAEO體內(nèi)抗肝癌藥效學(xué)研究
    1 實(shí)驗(yàn)儀器、材料與試劑
        1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及瘤株
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 AAEO小鼠體內(nèi)急性毒性實(shí)驗(yàn)
            2.1.1 AAEO溶液的配制
            2.1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2 AAEO體內(nèi)抗肝癌藥效學(xué)研究
            2.2.1 溶液的配制
            2.2.2 建立SMMC-7721肝癌小鼠模型
            2.2.3 分組給藥
            2.2.4 測(cè)量指標(biāo)
            2.2.5 病理切片
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 AAEO小鼠體內(nèi)急性毒性實(shí)驗(yàn)
        3.2 AAEO體內(nèi)抗肝癌藥效學(xué)研究
            3.2.1 荷瘤小鼠腫瘤體積和體重變化
            3.2.2 腫瘤重量及抑瘤率
            3.2.3 腫瘤病理學(xué)分析
    4 討論與小結(jié)
第三章 AAEO-CDP微球的制備及制劑評(píng)價(jià)
    1 實(shí)驗(yàn)儀器、材料與試劑
        1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 AAEO-CDP微球的制備及多成分含量測(cè)定方法的建立
            2.1.1 β-CDP微球的制備
            2.1.2 AAEO-CDP微球的制備
            2.1.3 AAEO-CDP微球多成分含量測(cè)定方法的建立
                2.1.3.1 氣相色譜條件
                2.1.3.2 溶液的配制
                2.1.3.3 方法學(xué)考察
        2.2 BOX-響應(yīng)曲面法
            2.2.1 單因素考察
            2.2.2 BOX-響應(yīng)曲面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
            2.2.3 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)
        2.3 表征與質(zhì)量評(píng)價(jià)
            2.3.1 外觀及形態(tài)
            2.3.2 粒徑及分布
            2.3.3 溶脹率(SR)
            2.3.4 β-CD的含量
            2.3.5 紅外光譜圖(IR)
            2.3.6 差示掃描量熱圖(DSC)
            2.3.7 包封率及載藥量
            2.3.8 體外釋藥研究
            2.3.9 藥物穩(wěn)定性研究
                2.3.9.1 影響因素實(shí)驗(yàn)
                2.3.9.2 初步穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 AAEO-CDP微球的制備及多成分含量測(cè)定方法的建立
            3.1.1 專屬性
            3.1.2 線性關(guān)系與范圍
            3.1.3 最低檢測(cè)限及定量限
            3.1.4 精密度
            3.1.5 重復(fù)性
            3.1.6 加樣回收率實(shí)驗(yàn)
        3.2 BOX-響應(yīng)曲面法
            3.2.1 單因素考察
            3.2.2 BOX-響應(yīng)曲面實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
            3.2.3 BOX-響應(yīng)曲面實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
                3.2.3.1 包封率(Y1)
                3.2.3.2 產(chǎn)率(Y2)
                3.2.3.3 驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)
        3.3 質(zhì)量評(píng)價(jià)
            3.3.1 外觀和形態(tài)
            3.3.2 粒徑及分布
            3.3.3 溶脹率
            3.3.4 β-CD的含量
            3.3.5 紅外光譜圖(IR)
            3.3.6 差示掃描量熱圖(DSC)
            3.3.7 包封率及載藥量
            3.3.8 體外釋藥研究
            3.3.9 藥物穩(wěn)定性研究
                3.3.9.1 影響因素實(shí)驗(yàn)
                3.3.9.2 初步穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)
    4 討論與小結(jié)
第四章 AAEO及其β-CDP微球體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)研究
    1 實(shí)驗(yàn)儀器、材料與試劑
        1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.1 色譜條件
        2.2 溶液的配制
        2.3 血漿樣品預(yù)處理
        2.4 方法學(xué)考察
            2.4.1 專屬性
            2.4.2 線性關(guān)系與范圍
            2.4.3 方法回收率
            2.4.4 精密度
            2.4.5 穩(wěn)定性
        2.5 AAEO體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)
            2.5.1 給藥方式
            2.5.2 樣品采集
            2.5.3 數(shù)據(jù)處理
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 方法學(xué)考察
            3.1.1 專屬性
            3.1.2 線性關(guān)系與范圍
            3.1.3 方法回收率
            3.1.4 精密度
            3.1.5 穩(wěn)定性
        3.2 體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)結(jié)果及參數(shù)
            3.2.1 體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)結(jié)果
            3.2.2 體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)
    4 討論與小結(jié)
第五章 總論與展望
    1 總論
    2 展望
綜述
    1 環(huán)糊精
        1.1 環(huán)糊精概述
            1.1.1 環(huán)糊精結(jié)構(gòu)與性質(zhì)
            1.1.2 環(huán)糊精在醫(yī)藥應(yīng)用
        1.2 β-環(huán)糊精聚合物微球
        1.3 β-環(huán)糊精聚合物微球制備方法
    2 AAEO的研究概況
        2.1 艾葉的本草考證
        2.2 AAEO的成分
        2.3 AAEO的藥理作用及其臨床應(yīng)用
            2.3.1 抗炎作用
            2.3.2 抗菌作用
            2.3.3 抗病毒作用
            2.3.4 增強(qiáng)免疫作用
            2.3.5 鎮(zhèn)咳平喘作用
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]艾葉揮發(fā)油對(duì)HBV的抑制作用[J]. 趙志鴻,王麗陽(yáng),鄭立運(yùn),耿楠,趙雪杰,李錦玉,王桂芳,張壯麗,張小俊.  鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2015(02)
[3]艾葉揮發(fā)油提取工藝的優(yōu)化[J]. 趙志鴻,耿楠,黃勇勇,吳芳,李錦玉,王桂芳,張壯麗,張小俊.  中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào). 2014(35)
[4]HS-SPME-GC-MS測(cè)定艾葉揮發(fā)性成分方法優(yōu)化[J]. 張小俊,趙志鴻,張壯麗,王桂芳,陳慧平,鄒敏.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2014(21)
[5]艾葉頂空萃取的揮發(fā)油指紋圖譜[J]. 張小俊,趙志鴻,張壯麗,王桂芳,陳慧平,鄒敏.  中成藥. 2014(06)
[6]艾葉乙酸乙酯提取物對(duì)HBV的抑制作用[J]. 趙志鴻,侯迎迎,鄭立運(yùn),王麗陽(yáng),王桂芳,張小俊,張壯麗.  鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2013(06)
[7]河南駐馬店產(chǎn)艾葉揮發(fā)油的GC-MS分析[J]. 趙志鴻,黃勇勇,張小俊,王麗陽(yáng),張壯麗,王桂芳.  鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(理學(xué)版). 2013(02)
[8]響應(yīng)曲面法優(yōu)化茴香油β-環(huán)糊精微球包合物的制備工藝研究[J]. 楊黎燕,楊欣雨,趙靈芝,尤靜.  食品工業(yè)科技. 2013(07)
[9]乳化溶劑揮發(fā)法及在微囊化制劑中的應(yīng)用[J]. 舒丹丹,張淑娟,金麗娜,王鐵闖,李大吉.  北方藥學(xué). 2012(04)
[10]艾葉揮發(fā)油治療大鼠變應(yīng)性鼻炎的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 張樞,王宇,張宇.  中國(guó)免疫學(xué)雜志. 2011(09)

博士論文
[1]β-環(huán)糊精聚合物的合成、自組裝及作為藥物/基因載體的應(yīng)用研究[D]. 熊青青.北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 2014
[2]環(huán)糊精聚合物微球及球形聚電解質(zhì)刷選擇性吸附苯酚和重金屬離子的研究[D]. 陳晴川.華東理工大學(xué) 2013
[3]新型功能聚合物微球的制備、表征及其應(yīng)用研究[D]. 潘元佳.復(fù)旦大學(xué) 2013
[4]用于新型抗癌藥物定向控制釋放的高分子載體的合成與表征[D]. 劉郁楊.西北工業(yè)大學(xué) 2003

碩士論文
[1]魚(yú)腥草揮發(fā)油抗淋巴瘤藥效學(xué)及其固體脂質(zhì)納米粒的制備研究[D]. 榮曉哲.鄭州大學(xué) 2017
[2]艾葉揮發(fā)油納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體的制備及其抗乙肝病毒活性的研究[D]. 馮詩(shī)楊.鄭州大學(xué) 2017
[3]艾葉EA部位抗HBV活性成分分析[D]. 吳芳.鄭州大學(xué) 2016
[4]薏苡仁油交聯(lián)環(huán)糊精包合物的制備及質(zhì)量研究[D]. 周云龍.揚(yáng)州大學(xué) 2016
[5]莪術(shù)油交聯(lián)環(huán)糊精包合物制備工藝研究[D]. 謝飛.揚(yáng)州大學(xué) 2015
[6]Rab27A/B在四種不同人肝癌細(xì)胞株中的表達(dá)[D]. 劉鼎.山西醫(yī)科大學(xué) 2015
[7]艾葉油的抗炎活性研究[D]. 李波.山西農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[8]聚β-環(huán)糊精載藥微球的制備及藥物釋放性能的研究[D]. 曹蕾.廣東藥學(xué)院 2009
[9]環(huán)糊精衍生物對(duì)丹皮酚包合特性研究[D]. 張榮發(fā).重慶大學(xué) 2009



本文編號(hào)：3732114