目的:探討輔助降糖片改善細(xì)胞胰島素抵抗可能的作用機(jī)制,鑒定輔助降糖片的化學(xué)成分,利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測(cè)其改善胰島素抵抗的相關(guān)作用靶點(diǎn),為輔助降糖片改善胰島素抵抗提供科學(xué)依據(jù)。方法:高分辨液質(zhì)聯(lián)用方法對(duì)輔助降糖片進(jìn)行初步化學(xué)成分分析;網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)預(yù)測(cè)其可能的降糖作用靶點(diǎn);高濃度胰島素誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞、棕櫚酸誘導(dǎo)C2C12使其產(chǎn)生胰島素抵抗,CCK-8法檢測(cè)輔助降糖片對(duì)HepG2細(xì)胞、C2C12細(xì)胞活性的影響篩選合適的藥物濃度并用葡萄糖氧化酶—過(guò)氧化物酶法（GOD-POD法）測(cè)定各組HepG2細(xì)胞、C2C12細(xì)胞的葡萄糖消耗量;Annexin V-FITC/PI雙染法,檢測(cè)造模方法和輔助降糖片對(duì)HepG2細(xì)胞凋亡的影響;實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)HepG2細(xì)胞胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中InsRβTyr1135/1136、PI3Kp85等mRNA的表達(dá);Western Blot法檢測(cè)該通路中InsRβTyr1135/1136、IRS1、等關(guān)鍵蛋白在HepG2細(xì)胞、C2C12細(xì)胞中的表達(dá)水平。結(jié)果:1.輔助降糖片化學(xué)成分分析:通過(guò)對(duì)比化合物對(duì)照品的的質(zhì)譜裂解規(guī)律和結(jié)合參考文獻(xiàn)及數(shù)據(jù)庫(kù)質(zhì)譜裂解信息,本實(shí)驗(yàn)快速... 

【文章頁(yè)數(shù)】：114 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
中英文縮略詞表
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 輔助降糖片概述
        1.1.1 輔助降糖片概述
        1.1.2 組方中各味藥材化學(xué)成分及降糖作用研究概況
        1.1.3 小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
    1.2 中醫(yī)藥干預(yù)PI3K/AKT信號(hào)通路改善胰島素抵抗研究進(jìn)展
        1.2.1 PI3K/AKT信號(hào)通路與胰島素抵抗的關(guān)系
        1.2.2 PI3K/AKT信號(hào)通路在中藥復(fù)方干預(yù)2型糖尿病IR作用中的應(yīng)用
        1.2.3 PI3K/AKT信號(hào)通路在中藥提取物及單體干預(yù)2型糖尿病IR作用中的應(yīng)用
        1.2.4 小結(jié)
        參考文獻(xiàn)
前言
第二章 輔助降糖片化學(xué)成分研究
    2.1 儀器和材料
        2.1.1 儀器
        2.1.2 材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 溶液的配置
        2.2.2 檢測(cè)條件
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)鑒定
        2.3.2 黃酮苷類化合物的結(jié)構(gòu)鑒定
        2.3.3 皂苷類化合物的結(jié)構(gòu)鑒定
        2.3.4 酚酸類化合物的結(jié)構(gòu)鑒定
        2.3.5 其他類化合物的結(jié)構(gòu)鑒定
    2.4 本章小結(jié)
    2.5 討論
第三章 基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的輔助降糖片靶點(diǎn)預(yù)測(cè)
    3.1 實(shí)驗(yàn)方法
    3.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.3 本章小結(jié)
    3.4 討論
第四章 輔助降糖片改善肝細(xì)胞胰島素抵抗作用的研究
    4.1 儀器和材料
        4.1.1 儀器
        4.1.2 試劑與材料
        4.1.3 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 試劑配制
        4.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
        4.2.3 HepG2細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
        4.2.4 輔助降糖片對(duì)HepG2細(xì)胞存活率的影響
        4.2.5 輔助降糖片對(duì)HepG2葡萄糖消耗量的影響
        4.2.6 Annexin V-FITC/PI雙染檢測(cè)輔助降糖片對(duì)HepG2細(xì)胞凋亡的影響
        4.2.7 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)HepG2細(xì)胞胰島素信號(hào)通路靶點(diǎn)基因的表達(dá)
        4.2.8 Western Blot測(cè)定HepG2細(xì)胞胰島素信號(hào)通路靶點(diǎn)蛋白的表達(dá)
        4.2.9 數(shù)據(jù)分析
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.3.1 HepG2細(xì)胞標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作
        4.3.2 輔助降糖片對(duì)HepG2細(xì)胞存活率的影響
        4.3.3 輔助降糖片對(duì)HepG2細(xì)胞葡萄糖消耗的影響
        4.3.4 各組HepG2細(xì)胞凋亡檢測(cè)的結(jié)果
        4.3.5 輔助降糖片對(duì)各組HepG2細(xì)胞胰島素信號(hào)靶點(diǎn)關(guān)鍵基因表達(dá)的影響
        4.3.6 輔助降糖片對(duì)各組HepG2細(xì)胞胰島素信號(hào)通路靶蛋白表達(dá)的影響
    4.4 本章小結(jié)
    4.5 討論
第五章 輔助降糖片改善肌細(xì)胞胰島素抵抗作用的研究
    5.1 儀器和材料
        5.1.1 儀器
        5.1.2 試劑與材料
        5.1.3 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
    5.2 實(shí)驗(yàn)方法
        5.2.1 實(shí)驗(yàn)藥物的配置
        5.2.2 C2C12細(xì)胞培養(yǎng)
        5.2.3 C2C12細(xì)胞分化
        5.2.4 輔助降糖片對(duì)C2C12細(xì)胞存活率的影響
        5.2.5 輔助降糖片對(duì)胰島素抵抗的C2C12細(xì)胞葡萄糖消耗的影響
        5.2.6 Western Blot測(cè)定C2C12細(xì)胞胰島素信號(hào)通路靶點(diǎn)蛋白的表達(dá)
        5.2.7 數(shù)據(jù)分析方法
    5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.3.1 C2C12細(xì)胞形態(tài)變化
        5.3.2 輔助降糖片對(duì)C2C12細(xì)胞存活率的影響
        5.3.3 輔助降糖片對(duì)C2C12細(xì)胞葡萄糖消耗的影響
        5.3.4 各組C2C12細(xì)胞胰島素信號(hào)通路靶點(diǎn)蛋白表達(dá)的結(jié)果
    5.4 本章小結(jié)
    5.5 討論
結(jié)語(yǔ)
創(chuàng)新點(diǎn)與特色
不足與展望
參考文獻(xiàn)
附圖
致謝
在學(xué)期間主要研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]基于UPLC-Q-Orbitrap MS法分析補(bǔ)肺益腎方的化學(xué)成分[J]. 黃海英,康俊麗,余亞輝,趙鵬,馮素香,杜燕,李建生.  分析測(cè)試學(xué)報(bào). 2019(01)
[2]UPLC-Q-TOF-MS/MS分析復(fù)方南星止痛膏化學(xué)成分[J]. 李郭帥,馬陽(yáng),耿婷,高霞,黃文哲,曹亮,肖偉,王振中.  中國(guó)中藥雜志. 2019(02)
[3]中醫(yī)藥治療2型糖尿病胰島素抵抗的機(jī)制研究進(jìn)展[J]. 孫豐卉,王秋虹,邱宗林,王澤,林蘭.  醫(yī)學(xué)綜述. 2018(20)
[4]基于UPLC-ESI-Q-TOF-MS的紅禾麻提取物化學(xué)成分分析[J]. 唐娟,吳耽,陳思穎,李瑩,李靖,鞏仔鵬,李維維,蘭燕宇,王永林.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2018(24)
[5]桑葉化學(xué)成分及生物活性研究進(jìn)展[J]. 王婷婷,馬天宇,李琪,李蒙.  食品與藥品. 2018(05)
[6]肉桂的化學(xué)成分、藥理活性及臨床應(yīng)用研究進(jìn)展[J]. 林紅強(qiáng),周柏松,譚靜,王涵,吳福林,劉金平,李平亞.  特產(chǎn)研究. 2018(02)
[7]大狼把草的化學(xué)成分液質(zhì)聯(lián)用快速鑒定分析[J]. 王翌臣,王煥軍,張玲,周洪雷,馬艷妮.  中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2018(17)
[8]肝糖異方通過(guò)上調(diào)肝臟IRS2/PI3K信號(hào)通路改善肝硬化大鼠的胰島素抵抗[J]. 陳凍伢,熊靜芳,徐燕芳,馮慧,徐建軍,徐虹.  中華中醫(yī)藥學(xué)刊. 2018(04)
[9]匙羹藤總皂苷通過(guò)調(diào)控脂肪組織PI3K/AKT信號(hào)通路改善胰島素抵抗的作用機(jī)制研究[J]. 秦靈靈,穆曉紅,徐暾海,劉銅華.  世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化. 2017(12)
[10]和于泰輔助降糖片聯(lián)合二甲雙胍對(duì)糖尿病大鼠骨骼肌胰島素抵抗的影響[J]. 許光遠(yuǎn),孫文,宋紫臨,郭璇,吳麗麗,秦靈靈,侯丹,張茁,田碩,李響,劉銅華.  中國(guó)中醫(yī)藥信息雜志. 2017(11)

博士論文
[1]輔助降糖顆粒與二甲雙胍聯(lián)合用藥對(duì)ZDF大鼠胰島素抵抗的作用及機(jī)制研究[D]. 許光遠(yuǎn).北京中醫(yī)藥大學(xué) 2017
[2]輔助降糖顆粒與吡格列酮聯(lián)合用藥對(duì)KKAy小鼠肝臟胰島素抵抗及機(jī)制研究[D]. 王海焱.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2017
[3]衛(wèi)矛抗炎物質(zhì)基礎(chǔ)及其質(zhì)量控制研究[D]. 王騰華.廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2016
[4]基于液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)的大小薊多組分分析與黃酮類成分的藥物代謝動(dòng)力學(xué)研究[D]. 孫倩.河北醫(yī)科大學(xué) 2013

碩士論文
[1]尖葉假龍膽乙酸乙酯部位改善胰島素抵抗作用機(jī)制研究及成分分析[D]. 高佳琪.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2018
[2]芙樸感冒顆�；钚猿煞值囊嘿|(zhì)聯(lián)用分析及其抗炎活性評(píng)價(jià)[D]. 徐米米.浙江大學(xué) 2018
[3]基于LC-HR-MSn的糖痹康顆粒成分分析及芍藥內(nèi)酯苷對(duì)高糖誘導(dǎo)雪旺細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷保護(hù)作用研究[D]. 王東超.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2017
[4]錦南復(fù)方改善2型糖尿病模型大鼠胰島素抵抗及機(jī)制初探[D]. 尹忞強(qiáng).揚(yáng)州大學(xué) 2016
[5]黃酮醇類化合物ESI-ITMSn質(zhì)譜裂解規(guī)律的量子化學(xué)研究[D]. 李想.佳木斯大學(xué) 2015
[6]蜂蜜酚類化合物的色譜分析及其電噴霧質(zhì)譜裂解途徑的研究[D]. 梁艷.西北大學(xué) 2009



本文編號(hào)：3731348