納米雄黃酸水飛品誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞程序性死亡及其作用機(jī)制研究
發(fā)布時間:2023-01-07 09:27
國際癌癥研究機(jī)構(gòu)(GLOBAR CACER OBSERVATORY)于2018年曾報道,在世界范圍內(nèi),到2018年估計全球有1810萬新癌癥病例和960萬癌癥患者死亡病例。兩性中,肺癌是最常診斷的癌癥,占總癌癥病例的11.6%,其次是乳腺癌占11.6%,前列腺癌占7.1%,結(jié)腸癌占6.1%。在女性中,乳腺癌是最常診斷的癌癥,并且是癌癥導(dǎo)致的女性死亡的主要原因。我國在2018年有367900新乳腺癌病例,占總癌癥新病例的8.6%,乳腺癌死亡人數(shù)97972例。乳腺癌是目前全世界婦女面臨的最為常見的癌癥,迄今為止,基于手術(shù)、化療、放療、內(nèi)分泌、中醫(yī)藥和分子靶向的綜合治療已成為乳腺癌治療的標(biāo)準(zhǔn)模式,許多研究表明中醫(yī)藥在治療乳腺癌方面發(fā)揮著非常重要作用。雄黃始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,為硫化物類礦物雄黃族雄黃,主含二硫化二砷(As2S2),是中醫(yī)內(nèi)治外用常用藥,F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明,雄黃對難治性或復(fù)發(fā)性腫瘤或癌癥具有一定的臨床療效。本實驗室前期實驗證明雄黃及納米雄黃炮制品能夠抑制乳腺癌細(xì)胞MCF-7的增殖,并能夠誘導(dǎo)其凋亡。本論文在前期研究基礎(chǔ)上,進(jìn)一步研究納米...
【文章頁數(shù)】:90 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
前言
第一章 納米雄黃酸水飛品對不同乳腺癌細(xì)胞株活性的篩選
1 儀器與材料
1.1 儀器
1.2 藥品與試劑
1.3 細(xì)胞株
1.4 試劑的配制
2 實驗方法
2.1 藥物的制備
2.2 細(xì)胞的培養(yǎng)與傳代
2.3 細(xì)胞的凍存
2.4 細(xì)胞的復(fù)蘇
2.5 CCK-8法篩選納米雄黃酸水飛品對乳腺癌細(xì)胞的抗腫瘤活性
3 實驗結(jié)果
3.1 不同濃度納米雄黃酸水飛品在不同時間段對MCF-7 細(xì)胞的增殖抑制作用
3.2 不同濃度納米雄黃酸水飛品在不同時間段對MDA-MB-231細(xì)胞的增殖抑制作用
3.3 不同濃度納米雄黃酸水飛品在不同時間段對MDA-MB-435S細(xì)胞的增殖抑制作用
3.4 不同濃度納米雄黃酸水飛品在不同時間段對L-02細(xì)胞的增殖抑制作用
3.5 納米雄黃酸水飛品對MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435S及L-02 細(xì)胞作用的IC_(50)
4 討論
第二章 納米雄黃酸水飛品誘導(dǎo)MDA-MB-435S細(xì)胞凋亡研究
1 儀器與材料
1.1 儀器
1.2 藥品與試劑
1.3 細(xì)胞株
1.4 儲備液的配制
2 實驗方法
2.1 Hoechst33258染色法檢測細(xì)胞形態(tài)變化
2.2 Annexin V-FITC/PI雙染法檢測細(xì)胞凋亡率
2.3 PI單染法檢測細(xì)胞周期
3 實驗結(jié)果
3.1 納米雄黃酸水飛品對細(xì)胞形態(tài)變化的影響
3.2 納米雄黃酸水飛品對MDA-MB-435S細(xì)胞凋亡率的影響
3.3 納米雄黃酸水飛品對MDA-MB-435S細(xì)胞周期的影響
4 討論
4.1 Hoechst33258 染色法檢測細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化
4.2 AnnexinV-FITC/PI雙標(biāo)記法檢測細(xì)胞凋亡率
4.3 PI染色法檢測細(xì)胞周期
4.4 本章小結(jié)
第三章 納米雄黃酸水飛品誘導(dǎo)乳腺癌MDA-MB-435S細(xì)胞程序性死亡機(jī)制的研究
1 儀器與材料
1.1 儀器
1.2 藥品與試劑
1.3 溶液的配制
2 實驗方法
2.1 透射電子顯微鏡觀察自噬小體
2.2 蛋白印跡法(Western blot)檢測凋亡、自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)
3 實驗結(jié)果
3.1 透射電鏡觀察自噬小體
3.2 納米雄黃酸水飛品對MDA-MB-435S細(xì)胞cleaved-PARP表達(dá)量的影響
3.3 納米雄黃酸水飛品對MDA-MB-435S細(xì)胞LC3、P62 表達(dá)量的影響
3.4 納米雄黃酸水飛品對MDA-MB-435S細(xì)胞Bcl-2、Beclin1 表達(dá)量的影響
3.5 納米雄黃酸水飛品對MDA-MB-435S細(xì)胞p-PI3K、p-Akt、p-mTOR表達(dá)量的影響
4 討論
結(jié)語與創(chuàng)新
攻讀碩士學(xué)位期間已發(fā)表論文
文獻(xiàn)綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號:3728383
【文章頁數(shù)】:90 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
前言
第一章 納米雄黃酸水飛品對不同乳腺癌細(xì)胞株活性的篩選
1 儀器與材料
1.1 儀器
1.2 藥品與試劑
1.3 細(xì)胞株
1.4 試劑的配制
2 實驗方法
2.1 藥物的制備
2.2 細(xì)胞的培養(yǎng)與傳代
2.3 細(xì)胞的凍存
2.4 細(xì)胞的復(fù)蘇
2.5 CCK-8法篩選納米雄黃酸水飛品對乳腺癌細(xì)胞的抗腫瘤活性
3 實驗結(jié)果
3.1 不同濃度納米雄黃酸水飛品在不同時間段對MCF-7 細(xì)胞的增殖抑制作用
3.2 不同濃度納米雄黃酸水飛品在不同時間段對MDA-MB-231細(xì)胞的增殖抑制作用
3.3 不同濃度納米雄黃酸水飛品在不同時間段對MDA-MB-435S細(xì)胞的增殖抑制作用
3.4 不同濃度納米雄黃酸水飛品在不同時間段對L-02細(xì)胞的增殖抑制作用
3.5 納米雄黃酸水飛品對MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435S及L-02 細(xì)胞作用的IC_(50)
4 討論
第二章 納米雄黃酸水飛品誘導(dǎo)MDA-MB-435S細(xì)胞凋亡研究
1 儀器與材料
1.1 儀器
1.2 藥品與試劑
1.3 細(xì)胞株
1.4 儲備液的配制
2 實驗方法
2.1 Hoechst33258染色法檢測細(xì)胞形態(tài)變化
2.2 Annexin V-FITC/PI雙染法檢測細(xì)胞凋亡率
2.3 PI單染法檢測細(xì)胞周期
3 實驗結(jié)果
3.1 納米雄黃酸水飛品對細(xì)胞形態(tài)變化的影響
3.2 納米雄黃酸水飛品對MDA-MB-435S細(xì)胞凋亡率的影響
3.3 納米雄黃酸水飛品對MDA-MB-435S細(xì)胞周期的影響
4 討論
4.1 Hoechst33258 染色法檢測細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化
4.2 AnnexinV-FITC/PI雙標(biāo)記法檢測細(xì)胞凋亡率
4.3 PI染色法檢測細(xì)胞周期
4.4 本章小結(jié)
第三章 納米雄黃酸水飛品誘導(dǎo)乳腺癌MDA-MB-435S細(xì)胞程序性死亡機(jī)制的研究
1 儀器與材料
1.1 儀器
1.2 藥品與試劑
1.3 溶液的配制
2 實驗方法
2.1 透射電子顯微鏡觀察自噬小體
2.2 蛋白印跡法(Western blot)檢測凋亡、自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)
3 實驗結(jié)果
3.1 透射電鏡觀察自噬小體
3.2 納米雄黃酸水飛品對MDA-MB-435S細(xì)胞cleaved-PARP表達(dá)量的影響
3.3 納米雄黃酸水飛品對MDA-MB-435S細(xì)胞LC3、P62 表達(dá)量的影響
3.4 納米雄黃酸水飛品對MDA-MB-435S細(xì)胞Bcl-2、Beclin1 表達(dá)量的影響
3.5 納米雄黃酸水飛品對MDA-MB-435S細(xì)胞p-PI3K、p-Akt、p-mTOR表達(dá)量的影響
4 討論
結(jié)語與創(chuàng)新
攻讀碩士學(xué)位期間已發(fā)表論文
文獻(xiàn)綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
本文編號:3728383
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