目的:本實(shí)驗(yàn)擬研究Akt-mTOR信號(hào)通路與Beclin1、LC3及TRAP1在姜黃素逆轉(zhuǎn)卡鉑耐藥中的作用機(jī)制。研究方法:培養(yǎng)卵巢癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞株T2（由Sandra Orsulic教授課題組構(gòu)建,p53敲除的大鼠卵巢上皮,轉(zhuǎn)染c-myc及Akt后生成的卵巢癌細(xì)胞系）,采用CCK-8法檢測(cè)姜黃素、卡鉑及兩藥聯(lián)用后細(xì)胞的增殖活性。采用Real-time PCR法檢測(cè)T2細(xì)胞在姜黃素、卡鉑及兩藥聯(lián)用48小時(shí)后Akt、mTOR、Beclin1、LC3、TRAP1的mRNA轉(zhuǎn)錄水平變化,采用Western blot檢測(cè)T2細(xì)胞加藥后Akt、Beclin1、LC3、TRAP1的蛋白表達(dá)水平。使用si法敲減T2細(xì)胞的Akt蛋白水平,檢測(cè)Beclin1、LC3、TRAP1的轉(zhuǎn)錄及蛋白表達(dá)水平變化。采用CCK-8法檢測(cè)敲減Akt蛋白后T2細(xì)胞對(duì)姜黃素、卡鉑及兩藥聯(lián)用的敏感性,使用SPSS統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析結(jié)果。結(jié)果:姜黃素、卡鉑均可以抑制T2細(xì)胞的增殖活性,48小時(shí)姜黃素的IC50為21.2μmol/L,卡鉑的IC50為145.59μmol/L,姜黃素與卡鉑有協(xié)同作用。姜黃素與卡鉑降低T2細(xì)胞的Akt、mT... 

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料與方法
    2.1 主要試劑和儀器
    2.2 研究方法
3 結(jié)果
    3.1 姜黃素及卡鉑對(duì)T2細(xì)胞系的抑制
    3.2 姜黃素、卡鉑及聯(lián)合作用后T2細(xì)胞系自噬及AKT-mTOR的變化
    3.3 敲減Akt后T2細(xì)胞系自噬及AKT-mTOR的變化
    3.4 敲減Akt后T2細(xì)胞系對(duì)姜黃素及卡鉑藥物敏感性的變化
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Correlation between mitochondrial TRAP-1 expression and lymph node metastasis in colorectal cancer[J]. Jing-Yan Gao,Bao-Rong Song,Jun-Jie Peng,Yuan-Ming Lu,Department of Colorectal Cancer,Fudan University Shanghai Cancer Center,Shanghai Medical College,Fudan University,Shanghai 200032,China Jing-Yan Gao,Department of Human Anatomy and Histo-Embryology,Shanghai Medical College,Fudan University,Shanghai 200032,China Bao-Rong Song,Department of Oncology,Shanghai Medical College,Fudan University,Shanghai 200032,China.  World Journal of Gastroenterology. 2012(41)
[2]姜黃素抑制鼠轉(zhuǎn)基因卵巢癌細(xì)胞系增殖及其與p21/BRCA1信號(hào)通路關(guān)系的研究[J]. 彭妲,呂慶杰,齊亞飛,曹程程,孫韓雪,王勁歐.  現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué). 2012(10)
[3]PI3K/Akt信號(hào)通路與卵巢癌耐藥關(guān)系的研究[J]. 齊亞飛,呂慶杰.  中國(guó)醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2008(05)



本文編號(hào)：3724206