目的:研究銀杏外種皮提取物（Ginkgobiloba exocarp extracts,GBEE）體內(nèi)外抗B16-F10黑色素瘤轉(zhuǎn)移作用及相關(guān)機(jī)制。方法:建立C57BL/6J小鼠B16-F10黑色素瘤肺轉(zhuǎn)移模型,將C57BL/6J小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組（不接種腫瘤細(xì)胞）、模型對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組、GBEE各治療組,每組10只。正常對(duì)照組和模型對(duì)照組灌胃（ig）給予0.1mL/10g生理鹽水（NS）,每天1次,連續(xù)17d;陽(yáng)性對(duì)照組隔日腹腔注射（ip）給予5mg/kg順鉑（DDP）,連續(xù)7d;GBEE各治療組分別ig給予GBEE50、100、200 mg/kg,每天1次,連續(xù)17d。給藥結(jié)束后第2天,剝瘤稱量移植瘤重量,計(jì)算抑瘤率;摘取肺組織,于解剖顯微鏡下觀察肺轉(zhuǎn)移灶,計(jì)算肺轉(zhuǎn)移率和抗轉(zhuǎn)移率;制備肺組織和移植瘤組織切片,蘇木素-伊紅（HE）染色觀察肺組織病理學(xué)變化;免疫組織化學(xué)法檢測(cè)移植瘤組織CD34的表達(dá)并計(jì)算微血管密度（MVD）,同時(shí)檢測(cè)HIF-1α、VEGF、MMP-9的表達(dá)水平。體外培養(yǎng)B16-F10細(xì)胞和人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVEC）,采用MTT比色法檢測(cè)GBEE對(duì)B16-F1... 

【文章頁(yè)數(shù)】：54 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
符號(hào)說(shuō)明
0 前言
1 文獻(xiàn)綜述
    0 引言
    1 PI3K/Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的結(jié)構(gòu)
    2 PI3K/Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的激活
    3 PI3K/Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路促進(jìn)惡性腫瘤轉(zhuǎn)移的機(jī)制
    4 PI3K/Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路介導(dǎo)的腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)靶點(diǎn)抑制劑
    5 結(jié)語(yǔ)
2 技術(shù)路線
3 實(shí)驗(yàn)材料
    3.1 銀杏外種皮提取物
    3.2 細(xì)胞和動(dòng)物
    3.3 主要儀器
    3.4 主要藥品與試劑
    3.5 主要溶液配制
4 實(shí)驗(yàn)方法
    4.1 C_(57)BL/6J小鼠B16-F10黑色素瘤肺轉(zhuǎn)移模型的建立、分組及給藥
    4.2 檢測(cè)抑瘤率、肺轉(zhuǎn)移率及抗轉(zhuǎn)移率
    4.3 HE染色觀察肺轉(zhuǎn)移灶
    4.4 免疫組織化學(xué)法檢測(cè)B16-F10移植瘤中CD34,MMP-9,HIF-1α,VEGF表達(dá)
    4.5 MTT 比色法檢測(cè)B16-F10細(xì)胞增殖
    4.6 細(xì)胞黏附實(shí)驗(yàn)觀察B16-F10細(xì)胞與HUVEC異質(zhì)黏附
    4.7 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)觀察B16-F10細(xì)胞遷移
    4.8 Western Blot法檢測(cè)B16-F10細(xì)胞和移植瘤組織相關(guān)蛋白表達(dá)
    4.9 qRT-PCR法檢測(cè)B16-F10細(xì)胞和移植瘤組織相關(guān)基因表達(dá)
    4.10 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)方法
5 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    5.1 GBEE對(duì)B16-F10移植瘤生長(zhǎng)的抑制作用
    5.2 GBEE抑制B16-F10黑色素瘤肺轉(zhuǎn)移
    5.3 GBEE對(duì)B16-F10移植瘤MMP-9的影響
    5.4 GBEE抑制B16-F10移植瘤血管生成
    5.5 GBEE對(duì)B16-F10移植瘤中PI3K/Akt/HIF-1α/VEGF信號(hào)通路的影響
    5.6 GBEE對(duì)B16-F10細(xì)胞增殖的抑制作用
    5.7 GBEE對(duì)B16-F10細(xì)胞與HUVEC異質(zhì)黏附的抑制作用
    5.8 GBEE對(duì)B16-F10細(xì)胞遷移的抑制作用
    5.9 GBEE對(duì)B16-F10細(xì)胞中PI3 K/Akt/NF-KB/MMP-9信號(hào)通路的影響
6 討論
    6.1 GBEE對(duì)B16-F10黑色素瘤轉(zhuǎn)移各個(gè)過(guò)程的干預(yù)作用
    6.2 GBEE對(duì)PI3K/Akt相關(guān)信號(hào)通路的調(diào)控作用
創(chuàng)新點(diǎn)
結(jié)語(yǔ)
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表論文及科研情況



本文編號(hào)：3720430