目的:研究銀杏外種皮提取物（Ginkgobiloba exocarp extracts,GBEE）體內(nèi)外抗B16-F10黑色素瘤轉(zhuǎn)移作用及相關機制。方法:建立C57BL/6J小鼠B16-F10黑色素瘤肺轉(zhuǎn)移模型,將C57BL/6J小鼠隨機分為正常對照組（不接種腫瘤細胞）、模型對照組、陽性對照組、GBEE各治療組,每組10只。正常對照組和模型對照組灌胃（ig）給予0.1mL/10g生理鹽水（NS）,每天1次,連續(xù)17d;陽性對照組隔日腹腔注射（ip）給予5mg/kg順鉑（DDP）,連續(xù)7d;GBEE各治療組分別ig給予GBEE50、100、200 mg/kg,每天1次,連續(xù)17d。給藥結束后第2天,剝瘤稱量移植瘤重量,計算抑瘤率;摘取肺組織,于解剖顯微鏡下觀察肺轉(zhuǎn)移灶,計算肺轉(zhuǎn)移率和抗轉(zhuǎn)移率;制備肺組織和移植瘤組織切片,蘇木素-伊紅（HE）染色觀察肺組織病理學變化;免疫組織化學法檢測移植瘤組織CD34的表達并計算微血管密度（MVD）,同時檢測HIF-1α、VEGF、MMP-9的表達水平。體外培養(yǎng)B16-F10細胞和人臍靜脈內(nèi)皮細胞（HUVEC）,采用MTT比色法檢測GBEE對B16-F1... 

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
符號說明
0 前言
1 文獻綜述
    0 引言
    1 PI3K/Akt信號轉(zhuǎn)導通路的結構
    2 PI3K/Akt信號轉(zhuǎn)導通路的激活
    3 PI3K/Akt信號轉(zhuǎn)導通路促進惡性腫瘤轉(zhuǎn)移的機制
    4 PI3K/Akt信號轉(zhuǎn)導通路介導的腫瘤轉(zhuǎn)移相關靶點抑制劑
    5 結語
2 技術路線
3 實驗材料
    3.1 銀杏外種皮提取物
    3.2 細胞和動物
    3.3 主要儀器
    3.4 主要藥品與試劑
    3.5 主要溶液配制
4 實驗方法
    4.1 C_(57)BL/6J小鼠B16-F10黑色素瘤肺轉(zhuǎn)移模型的建立、分組及給藥
    4.2 檢測抑瘤率、肺轉(zhuǎn)移率及抗轉(zhuǎn)移率
    4.3 HE染色觀察肺轉(zhuǎn)移灶
    4.4 免疫組織化學法檢測B16-F10移植瘤中CD34,MMP-9,HIF-1α,VEGF表達
    4.5 MTT 比色法檢測B16-F10細胞增殖
    4.6 細胞黏附實驗觀察B16-F10細胞與HUVEC異質(zhì)黏附
    4.7 細胞劃痕實驗觀察B16-F10細胞遷移
    4.8 Western Blot法檢測B16-F10細胞和移植瘤組織相關蛋白表達
    4.9 qRT-PCR法檢測B16-F10細胞和移植瘤組織相關基因表達
    4.10 數(shù)據(jù)統(tǒng)計方法
5 實驗結果
    5.1 GBEE對B16-F10移植瘤生長的抑制作用
    5.2 GBEE抑制B16-F10黑色素瘤肺轉(zhuǎn)移
    5.3 GBEE對B16-F10移植瘤MMP-9的影響
    5.4 GBEE抑制B16-F10移植瘤血管生成
    5.5 GBEE對B16-F10移植瘤中PI3K/Akt/HIF-1α/VEGF信號通路的影響
    5.6 GBEE對B16-F10細胞增殖的抑制作用
    5.7 GBEE對B16-F10細胞與HUVEC異質(zhì)黏附的抑制作用
    5.8 GBEE對B16-F10細胞遷移的抑制作用
    5.9 GBEE對B16-F10細胞中PI3 K/Akt/NF-KB/MMP-9信號通路的影響
6 討論
    6.1 GBEE對B16-F10黑色素瘤轉(zhuǎn)移各個過程的干預作用
    6.2 GBEE對PI3K/Akt相關信號通路的調(diào)控作用
創(chuàng)新點
結語
參考文獻
致謝
攻讀碩士學位期間發(fā)表論文及科研情況



本文編號：3720430