目的:研究復(fù)方制劑活肺通片的化學(xué)成分及君藥五指毛桃中佛手柑內(nèi)酯的抗炎活性。利用色質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù),對復(fù)方制劑活肺通片及其君藥五指毛桃進(jìn)行化學(xué)物質(zhì)組的系統(tǒng)研究;建立斑馬魚炎癥模型,對君藥五指毛桃中的佛手柑內(nèi)酯進(jìn)行抗炎和消炎活性研究。方法:按活肺通片的提取工藝對五指毛桃中的化學(xué)成分進(jìn)行提取,結(jié)合高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（LCMS-IT-TOF）和氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）技術(shù)對君藥五指毛桃提取物中的復(fù)雜化學(xué)成分進(jìn)行快速定性分析;采用固相萃取法從君藥五指毛桃中分離純化佛手柑內(nèi)酯（Bergapten,BG）單體,采用LCMS-IT-TOF和核磁共振（Nuclear Magnetic Resonance,NMR）方法對佛手柑內(nèi)酯單體進(jìn)行鑒定;建立斑馬魚炎癥模型,以斑馬魚幼魚的形態(tài)學(xué)變化為依據(jù),考察BG對斑馬魚幼魚48h內(nèi)的毒性;以巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞的數(shù)量和ROS、NO含量為指標(biāo),對BG進(jìn)行抗炎和消炎活性研究;采用6倍量乙醇對五指毛桃中的化學(xué)成分進(jìn)行回流提取,10倍量水對靈芝、平貝母、蛤蚧、甘草煎煮,合并濃縮液,運用LCMS-IT-TOF技術(shù)對活肺通片制劑中的復(fù)雜化學(xué)成分進(jìn)行定性分析。結(jié)果:1.采用... 

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
本論文中涉及的主要名詞及縮寫
摘要
abstract
前言
第一章 緒論
    1 慢阻肺研究現(xiàn)狀
        1.1 病理機制研究
        1.2 臨床治療研究
    2 活肺通片概況
        2.1 處方和方解
    3 佛手柑內(nèi)酯概況
        3.1 佛手柑內(nèi)酯的理化性質(zhì)
        3.2 佛手柑內(nèi)酯的藥理作用
    4 炎癥概況
    5 斑馬魚概況
        5.1 熒光標(biāo)記轉(zhuǎn)基因系
        5.2 斑馬魚炎癥模型
第二章 色質(zhì)譜聯(lián)用分析五指毛桃的化學(xué)成分
    1 儀器與材料
        1.1 儀器
        1.2 材料
    2 方法
        2.1 溶液的配制
        2.2 LCMS-IT-TOF色譜及質(zhì)譜條件
        2.3 GC-MS色譜及質(zhì)譜條件
    3 結(jié)果
        3.1 五指毛桃LCMS-IT-TOF的成分分析
        3.2 五指毛桃GC-MS的成分分析
    4 討論
        4.1 LCMS-IT-TOF色譜條件的優(yōu)化
        4.2 LCMS-IT-TOF和GC-MS結(jié)果分析
    5 小結(jié)
第三章 固相萃取法分離純化五指毛桃中的佛手柑內(nèi)酯
    1 儀器與材料
        1.1 儀器
        1.2 材料
    2 方法
        2.1 LCMS-IT-TOF分析條件
        2.2 五指毛桃提取物的制備
        2.3 硅膠柱色譜初步分離
        2.4 有效成分的純化
        2.5 溶液的配制
    3 結(jié)果
        3.1 硅膠柱色譜初步分離
        3.2 有效成分的純化
        3.3 單體的鑒定
    4 討論
        4.1 溶劑萃取
        4.2 化合物損失
    5 小結(jié)
第四章 基于斑馬魚炎癥模型從五指毛桃中分離純化的佛手柑內(nèi)酯的抗炎和消炎活性研究
    1 儀器與材料
        1.1 儀器
        1.2 試藥與試劑
        1.3 實驗動物
    2 方法
        2.1 溶液的配制
        2.2 斑馬魚炎癥模型的建立
        2.3 BG對斑馬魚的毒性實驗
        2.4 體內(nèi)嗜中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞募集測定
        2.5 體內(nèi)炎癥消除分析
        2.6 測量炎癥誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)ROS產(chǎn)生和圖像分析
        2.7 測量炎癥誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)NO產(chǎn)生和圖像分析
        2.8 統(tǒng)計分析
    3 結(jié)果
        3.1 BG對斑馬魚幼魚的毒性
        3.2 BG抑制體內(nèi)中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞募集
        3.3 BG通過促進(jìn)傷口中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的清除,加速了體內(nèi)炎癥的消退
        3.4 BG對斑馬魚幼魚切割尾部誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)ROS產(chǎn)生的抑制作用
        3.5 BG對切尾誘導(dǎo)斑馬魚幼魚細(xì)胞內(nèi)NO產(chǎn)生的抑制作用
    4 討論
        4.1 魚卵收集及幼魚飼養(yǎng)
        4.2 切尾
        4.3 細(xì)胞計數(shù)
        4.4 溶液的配制
        4.5 給藥方式
    5 小結(jié)
第五章 液質(zhì)聯(lián)用分析活肺通片的化學(xué)成分
    1 儀器與材料
        1.1 儀器
        1.2 材料
    2 方法與結(jié)果
        2.1 溶液的制備
        2.2 LCMS-IT-TOF色譜及質(zhì)譜條件
        2.3 活肺通片LCMS-IT-TOF的成分分析
    3 討論
    4 小結(jié)
第六章 結(jié)論與展望
    1 結(jié)論
    2 展望
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[2]靈芝的化學(xué)成分及藥理作用分析[J]. 趙明宇.  首都食品與醫(yī)藥. 2017(02)
[3]佛手柑內(nèi)酯對雙氧水誘導(dǎo)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞衰老的影響[J]. 丁燕,傅友,單蘭蘭,奈文青,吳洪淵,唐亮,陳順枝,戴萌.  中國組織工程研究. 2016(46)
[4]抗炎動物模型的研究進(jìn)展[J]. 李學(xué)哲,蔡愛華,樸惠順.  延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)學(xué)報. 2013(02)
[5]五指毛桃的化學(xué)成分和藥理作用研究進(jìn)展[J]. 王偉偉,陳瑤.  中國民族民間醫(yī)藥. 2013(03)
[6]Protective effects of 5-methoxypsoralen against acetaminophen-induced hepatotoxicity in mice[J]. Wei-Xia Liu,Feng-Lan Jia,Yue-Ying He,Bao-Xu Zhang,Department of Toxicology,School of Public Health,Peking University,Beijing 100191,China.  World Journal of Gastroenterology. 2012(18)
[7]斑馬魚模型在中藥活性篩選中的適用性研究[J]. 韓利文,袁延強,何秋霞,王思鋒,李遇伯,楚杰,劉可春,劉昌孝.  中草藥. 2011(10)
[8]構(gòu)建由綠色熒光標(biāo)記巨噬細(xì)胞的轉(zhuǎn)基因斑馬魚模型[J]. 秦帥,陳希,孔德明.  貴陽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報. 2011(05)
[9]五指毛桃指紋圖譜的高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用研究[J]. 陶敬奇,聞瑩瑩,王輝,王三永,陳洪偉.  華南師范大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2011(03)
[10]新一代超長效支氣管擴張劑——茚達(dá)特羅[J]. 方曉聰,白春學(xué).  中華哮喘雜志(電子版). 2010(06)



本文編號：3718409