目的:探究中藥山茱萸提取物山茱萸新苷對SH-SY5Y細(xì)胞生長的影響及對過氧化氫誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞損傷的神經(jīng)保護作用。方法:體外培養(yǎng)的SH-SY5Y細(xì)胞與山茱萸新苷（0.3、1、3μmol/L）作用2 h后,加入過氧化氫300μmol/L作用12 h誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞產(chǎn)生氧化損傷。顯微條件下觀察細(xì)胞形態(tài);CCK8法檢測細(xì)胞存活率;分光光度計法測定LDH釋放率;JC-1法檢測線粒體膜電位;熒光顯微鏡檢測胞內(nèi)ROS水平;Hochest 33258和AO/EB染色法檢測細(xì)胞凋亡情況;分光光度計檢測胞內(nèi)SOD活力、GSH水平和MDA含量。結(jié)果:山茱萸新苷在0.01μmol/L～30μmol/L條件下對正常SH-SY5Y細(xì)胞不產(chǎn)生毒性作用;與模型對照組相比,山茱萸新苷在0.3、1和3μmol/L條件下可呈濃度依賴性地提高細(xì)胞存活率,并明顯改善細(xì)胞受損形態(tài)和凋亡水平;同時山茱萸新苷0.3、1、3μmol/L能降低LDH滲漏率并升高線粒體膜電位;此外,山茱萸新苷各濃度還能提高胞內(nèi)抗氧化酶水平和GSH含量,減少丙二醛的產(chǎn)生,在濃度為1μmol/L時效果最佳,其抗氧化損傷效果與維生素E相當(dāng)。結(jié)論:... 

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 試驗藥物
    1.2 細(xì)胞
    1.3 試劑
    1.4 儀器
    1.5 方法
        1.5.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.5.2 山茱萸新苷儲備液的配制
        1.5.3 CCK8法檢測山茱萸新苷對正常SH-SY5Y的細(xì)胞毒作用
        1.5.4 CCK8法檢測山茱萸新苷對過氧化氫損傷SH-SY5Y細(xì)胞的存活率
        1.5.5 顯微條件下觀察細(xì)胞形態(tài)
        1.5.6 培養(yǎng)上清液中LDH的含量測定
        1.5.7 ROS檢測
        1.5.8 Hochest 33258染色法、AO/EB雙染法檢測SH-SY5Y細(xì)胞凋亡
        1.5.9 JC-1法檢測線粒體膜電位
        1.5.10 GSH含量、SOD酶活性和MDA水平的測定
        1.5.11 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 山茱萸新苷對正常SH-SY5Y細(xì)胞活力的影響
    2.2 山茱萸新苷對過氧化氫損傷SH-SY5Y細(xì)胞的影響
    2.3 山茱萸新苷對過氧化氫損傷SH-SY5Y細(xì)胞形態(tài)的影響
    2.4 山茱萸新苷對過氧化氫損傷SH-SY5Y細(xì)胞培養(yǎng)上清液中LDH含量的影響
    2.5 山茱萸新苷對過氧化氫損傷SH-SY5Y細(xì)胞ROS和線粒體膜電位的影響
    2.6 山茱萸新苷對過氧化氫誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞凋亡的影響
        2.6.1 Hochest 33258染色法
        2.6.2 AO/EB雙染法
    2.7 山茱萸新苷對過氧化氫損傷的SH-SY5Y細(xì)胞抗氧化能力的影響
3 討論


【參考文獻】：
期刊論文
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[2]山茱萸環(huán)烯醚萜苷對血管性癡呆大鼠學(xué)習(xí)記憶能力及腦組織病理變化的影響[J]. 孟敏,楊翠翠,張麗,李雅莉,張?zhí)m,李林.  中國中醫(yī)藥信息雜志. 2018(06)
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本文編號：3717319