舒郁膠囊對PMS肝氣郁證大鼠關(guān)鍵腦區(qū)Glu-GABA代謝通路中GAD、GABA-T、GAT-1變化的影響
發(fā)布時間:2022-12-10 15:47
目的:研究經(jīng)前期綜合征(Premenstrual syndrome,PMS)肝氣郁證大鼠模型在接受期(Receptive phases/R)和非接受期(Non-Receptive phases/NR)關(guān)鍵腦區(qū)中γ-氨基丁酸轉(zhuǎn)氨酶(GABA transaminase,GABA-T)、谷氨酸脫羧酶(Glutamate decarboxylase,GAD)、γ-氨基丁酸轉(zhuǎn)運體(GABA transporter,GAT-1)變化和調(diào)肝方藥舒郁膠囊對其干預(yù)作用,探討舒郁膠囊治療PMS肝氣郁證的作用機制。方法:1.以陰道涂片法篩選動情周期規(guī)律的雌性大鼠,據(jù)體質(zhì)量、曠場總路程將大鼠隨機分為正常對照組、模型組、模型+舒郁膠囊組(SY組)、模型+氟西汀組(FXT組)。以改進(jìn)優(yōu)化的慢性束縛應(yīng)激法制備PMS肝氣郁證大鼠模型,造模時間為兩個動情周期。造模及藥物干預(yù)結(jié)束后,采集大鼠體質(zhì)量,曠場總路程和強迫游泳懸浮不動時間等行為學(xué)指標(biāo),分別于接受期和非接受期采集外周血以及中樞關(guān)鍵腦區(qū)海馬、額葉、頂區(qū)、下丘腦,存于-70℃待檢測。2.ELISA法分別檢測接受期、非接受期各組大鼠外周血清中谷氨酸(glutamate,...
【文章頁數(shù)】:95 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
提要
abstract
引言
一、目前PMS肝氣郁證的主要研究現(xiàn)狀
二、舒郁膠囊治療PMS肝氣郁證的相關(guān)性研究
三、Glu-GABA代謝通路與PMS肝氣郁證
四、PMS肝氣郁證相關(guān)腦區(qū)的研究進(jìn)展
縮略詞表
第一章 PMS肝氣郁證大鼠模型制備以及行為學(xué)檢測
實驗一 PMS肝氣郁證大鼠模型制備
1 實驗材料
1.1 實驗動物
1.2 實驗藥品
1.3 主要儀器
2 實驗方法
2.1 PMS肝氣郁證大鼠模型制備
2.1.2 大鼠初篩
2.1.3 動物的分組及模型的制備
2.1.4 給藥
實驗二 PMS肝氣郁證模型大鼠的評價
1 體質(zhì)量(Body Weight)
2 行為學(xué)實驗
2.1 強迫游泳(FST)
2.2 曠場實驗(OFT)
2.3 統(tǒng)計分析
3 實驗結(jié)果
3.1 大鼠體質(zhì)量增加量(Body Weight Gain)
3.2 曠場實驗結(jié)果(Total distance)
3.3 強迫游泳實驗結(jié)果(Immobility time)
4 討論
4.1PMS肝氣郁證大鼠模型研究概況
4.2 PMS肝氣郁證大鼠模型評價
4.3 慢性束縛應(yīng)激法誘導(dǎo)PMS肝氣郁證大鼠模型
第二章 舒郁膠囊對PMS肝氣郁證大鼠關(guān)鍵腦區(qū)Glu-GABA代謝通路中GAD、GABA-T、GAT-1 變化的影響
實驗一 舒郁膠囊對接受期、非接受期各組大鼠血清中Glu、GABA含量變化的影響
1 實驗材料與儀器
1.1 材料與試劑
1.2 試劑配置
2 實驗方法(以Glu為例)
3 統(tǒng)計方法
4 實驗結(jié)果
4.1 接受期與非接受期各組大鼠Glu的濃度
4.2 接受期與非接受期各組大鼠GABA的濃度
4.3 接受期與非接受期各組大鼠Glu/GABA的比值
實驗二 舒郁膠囊對接受期、非接受期各組大鼠各腦區(qū)GABA-T、GAD活性變化的影響
1 實驗材料與方法
1.1 試劑與儀器
1.2 試劑配制
2 實驗方法
3 實驗結(jié)果
3.1 接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GABA-T活性的表達(dá)
3.2 接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAD活性的表達(dá)
3.3 非接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GABA-T活性的表達(dá)
3.4 非接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAD活性的表達(dá)
實驗三 舒郁膠囊對接受期、非接受期各組大鼠各腦區(qū)GABA-T、GAD、GAT-1 mRNA表達(dá)水平的影響
1 實驗材料與儀器
1.1 實驗材料與試劑
1.2 實驗儀器
2 實驗方法
3 實驗結(jié)果
3.1 接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GABA-T mRNA表達(dá)水平
3.2 接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAD65 mRNA表達(dá)水平
3.3 接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAD67 mRNA表達(dá)水平
3.4 接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAT-1 mRNA表達(dá)水平
3.5 非接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GABA-T mRNA表達(dá)水平
3.6 非接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAD65 mRNA表達(dá)水平
3.7 非接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAD67 mRNA表達(dá)水平
3.8 非接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAT-1 mRNA表達(dá)水平
實驗四 舒郁膠囊對接受期、非接受期各組大鼠各腦區(qū)GABA-T、GAD、GAT-1 蛋白表達(dá)水平的影響
1 實驗材料與儀器
2 實驗方法
2.1 樣品準(zhǔn)備
2.2 組織樣品全蛋白提取
2.3 SDS-PAGE電泳
2.4 蛋白雜交反應(yīng)
2.5 數(shù)據(jù)處理分析
3 實驗結(jié)果
3.1 接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GABA-T蛋白表達(dá)水平
3.2 接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAD65蛋白表達(dá)水平
3.3 接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAD67蛋白表達(dá)水平
3.4 接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAT-1 蛋白表達(dá)水平
3.5 非接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GABA-T蛋白表達(dá)水平
3.6 非接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAD65蛋白表達(dá)水平
3.7 非接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAD67蛋白表達(dá)水平
3.8 非接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAT-1 蛋白表達(dá)水平
4 討論
4.1 PMS肝氣郁證模型大鼠GABA、Glu含量異常改變
4.1.1 γ-氨基丁酸與PMS
4.1.2 谷氨酸與PMS
4.1.3 Glu/GABA的平衡被打破可能是PMS產(chǎn)生的重要原因
4.2 PMS肝氣郁證模型大鼠R期和NR期關(guān)鍵酶的活性并未發(fā)生顯著性差異
4.3 PMS肝氣郁證模型大鼠Glu-GABA代謝通路中各關(guān)鍵酶發(fā)生異常變化
4.4 PMS肝氣郁證模型大鼠頂區(qū)GABA-T、GAT-1 關(guān)鍵基因和蛋白表達(dá)情況與其他腦區(qū)不同
4.5 舒郁膠囊通過調(diào)節(jié)Glu-GABA代謝通路中關(guān)鍵酶的異常變化從而治療疾病
研究特色與不足
結(jié)語
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
附件
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]中藥結(jié)合中醫(yī)情志療法治療經(jīng)前期綜合征50例療效觀察[J]. 張藝,譚桂云. 湖南中醫(yī)雜志. 2015(12)
[2]白芍及其化學(xué)成分的藥理研究進(jìn)展[J]. 李巖. 職業(yè)與健康. 2015(15)
[3]應(yīng)用fMRI技術(shù)探查靜息態(tài)經(jīng)前期綜合征肝氣郁證患者中樞腦區(qū)定位[J]. 高冬梅,于艷紅,侯艷嬌,劉曉琴,喬明琦. 世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化. 2015(04)
[4]甘草的藥理作用及現(xiàn)代研究進(jìn)展[J]. 張利. 中醫(yī)臨床研究. 2014(10)
[5]基因芯片技術(shù)分析舒郁膠囊對抑郁癥肝氣郁結(jié)證大鼠模型的干預(yù)作用[J]. 徐凱勇,李自發(fā),高杰. 中國藥理學(xué)通報. 2014(03)
[6]柴胡治療肝病有效成分及藥理作用研究進(jìn)展[J]. 沈霞,趙振宇. 生物技術(shù)世界. 2014(02)
[7]γ-氨基丁酸及其受體在經(jīng)前期綜合征情緒調(diào)控中的作用機制研究進(jìn)展[J]. 田溪,張惠云. 醫(yī)學(xué)研究雜志. 2013(09)
[8]舒郁膠囊及其組分抗抑郁機制研究進(jìn)展[J]. 殷慧敏,薛玲. 醫(yī)學(xué)研究雜志. 2013(07)
[9]γ-氨基丁酸治療對哮喘患兒血漿P物質(zhì)和降鈣素基因相關(guān)肽含量的影響[J]. 徐傳偉,郭山春,鄭振文,王慶元. 中國當(dāng)代兒科雜志. 2013(02)
[10]香附化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J]. 徐曉婷,鄧志鵬,仲浩,姚慶強. 齊魯藥事. 2012(08)
博士論文
[1]經(jīng)前焦慮性障礙患者腦內(nèi)GABA含量的磁共振波譜研究[D]. 劉波.山東大學(xué) 2015
碩士論文
[1]強迫游泳應(yīng)激誘導(dǎo)經(jīng)前煩躁障礙(PMDD)肝氣郁證大鼠模型的制備以及模型大鼠神經(jīng)遞質(zhì)及其受體的變化[D]. 朱德豪.山東中醫(yī)藥大學(xué) 2016
[2]刮痧配合中藥治療肝郁氣滯型經(jīng)前期綜合征的療效觀察[D]. 張秀娟.廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2014
[3]前額皮層和后頂葉皮層神經(jīng)元在識別記憶中的放電特征[D]. 代淑芬.首都師范大學(xué) 2013
[4]PMS肝氣逆大鼠腦區(qū)GAD、GABA-T、GAT-1表達(dá)的變化及藥物干預(yù)影響[D]. 房芳芳.山東中醫(yī)藥大學(xué) 2013
[5]舒郁膠囊及柴胡提取物含藥血清對大鼠海馬神經(jīng)元GABABR2介導(dǎo)的ERK通路和AC/cAMP/CREB通路的影響[D]. 姜英鳳.山東中醫(yī)藥大學(xué) 2012
[6]苯巴比妥對大鼠額葉、頂葉、小腦神經(jīng)元及神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞凋亡的影響[D]. 李凈兵.河北醫(yī)科大學(xué) 2011
[7]中藥新藥治療經(jīng)前期綜合征(肝氣郁結(jié)、脾運失調(diào)證)臨床研究[D]. 謝琪.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2004
本文編號:3717038
【文章頁數(shù)】:95 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
提要
abstract
引言
一、目前PMS肝氣郁證的主要研究現(xiàn)狀
二、舒郁膠囊治療PMS肝氣郁證的相關(guān)性研究
三、Glu-GABA代謝通路與PMS肝氣郁證
四、PMS肝氣郁證相關(guān)腦區(qū)的研究進(jìn)展
縮略詞表
第一章 PMS肝氣郁證大鼠模型制備以及行為學(xué)檢測
實驗一 PMS肝氣郁證大鼠模型制備
1 實驗材料
1.1 實驗動物
1.2 實驗藥品
1.3 主要儀器
2 實驗方法
2.1 PMS肝氣郁證大鼠模型制備
2.1.2 大鼠初篩
2.1.3 動物的分組及模型的制備
2.1.4 給藥
實驗二 PMS肝氣郁證模型大鼠的評價
1 體質(zhì)量(Body Weight)
2 行為學(xué)實驗
2.1 強迫游泳(FST)
2.2 曠場實驗(OFT)
2.3 統(tǒng)計分析
3 實驗結(jié)果
3.1 大鼠體質(zhì)量增加量(Body Weight Gain)
3.2 曠場實驗結(jié)果(Total distance)
3.3 強迫游泳實驗結(jié)果(Immobility time)
4 討論
4.1PMS肝氣郁證大鼠模型研究概況
4.2 PMS肝氣郁證大鼠模型評價
4.3 慢性束縛應(yīng)激法誘導(dǎo)PMS肝氣郁證大鼠模型
第二章 舒郁膠囊對PMS肝氣郁證大鼠關(guān)鍵腦區(qū)Glu-GABA代謝通路中GAD、GABA-T、GAT-1 變化的影響
實驗一 舒郁膠囊對接受期、非接受期各組大鼠血清中Glu、GABA含量變化的影響
1 實驗材料與儀器
1.1 材料與試劑
1.2 試劑配置
2 實驗方法(以Glu為例)
3 統(tǒng)計方法
4 實驗結(jié)果
4.1 接受期與非接受期各組大鼠Glu的濃度
4.2 接受期與非接受期各組大鼠GABA的濃度
4.3 接受期與非接受期各組大鼠Glu/GABA的比值
實驗二 舒郁膠囊對接受期、非接受期各組大鼠各腦區(qū)GABA-T、GAD活性變化的影響
1 實驗材料與方法
1.1 試劑與儀器
1.2 試劑配制
2 實驗方法
3 實驗結(jié)果
3.1 接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GABA-T活性的表達(dá)
3.2 接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAD活性的表達(dá)
3.3 非接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GABA-T活性的表達(dá)
3.4 非接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAD活性的表達(dá)
實驗三 舒郁膠囊對接受期、非接受期各組大鼠各腦區(qū)GABA-T、GAD、GAT-1 mRNA表達(dá)水平的影響
1 實驗材料與儀器
1.1 實驗材料與試劑
1.2 實驗儀器
2 實驗方法
3 實驗結(jié)果
3.1 接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GABA-T mRNA表達(dá)水平
3.2 接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAD65 mRNA表達(dá)水平
3.3 接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAD67 mRNA表達(dá)水平
3.4 接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAT-1 mRNA表達(dá)水平
3.5 非接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GABA-T mRNA表達(dá)水平
3.6 非接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAD65 mRNA表達(dá)水平
3.7 非接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAD67 mRNA表達(dá)水平
3.8 非接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAT-1 mRNA表達(dá)水平
實驗四 舒郁膠囊對接受期、非接受期各組大鼠各腦區(qū)GABA-T、GAD、GAT-1 蛋白表達(dá)水平的影響
1 實驗材料與儀器
2 實驗方法
2.1 樣品準(zhǔn)備
2.2 組織樣品全蛋白提取
2.3 SDS-PAGE電泳
2.4 蛋白雜交反應(yīng)
2.5 數(shù)據(jù)處理分析
3 實驗結(jié)果
3.1 接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GABA-T蛋白表達(dá)水平
3.2 接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAD65蛋白表達(dá)水平
3.3 接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAD67蛋白表達(dá)水平
3.4 接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAT-1 蛋白表達(dá)水平
3.5 非接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GABA-T蛋白表達(dá)水平
3.6 非接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAD65蛋白表達(dá)水平
3.7 非接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAD67蛋白表達(dá)水平
3.8 非接受期海馬、下丘腦、額葉、頂區(qū)的GAT-1 蛋白表達(dá)水平
4 討論
4.1 PMS肝氣郁證模型大鼠GABA、Glu含量異常改變
4.1.1 γ-氨基丁酸與PMS
4.1.2 谷氨酸與PMS
4.1.3 Glu/GABA的平衡被打破可能是PMS產(chǎn)生的重要原因
4.2 PMS肝氣郁證模型大鼠R期和NR期關(guān)鍵酶的活性并未發(fā)生顯著性差異
4.3 PMS肝氣郁證模型大鼠Glu-GABA代謝通路中各關(guān)鍵酶發(fā)生異常變化
4.4 PMS肝氣郁證模型大鼠頂區(qū)GABA-T、GAT-1 關(guān)鍵基因和蛋白表達(dá)情況與其他腦區(qū)不同
4.5 舒郁膠囊通過調(diào)節(jié)Glu-GABA代謝通路中關(guān)鍵酶的異常變化從而治療疾病
研究特色與不足
結(jié)語
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
附件
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]中藥結(jié)合中醫(yī)情志療法治療經(jīng)前期綜合征50例療效觀察[J]. 張藝,譚桂云. 湖南中醫(yī)雜志. 2015(12)
[2]白芍及其化學(xué)成分的藥理研究進(jìn)展[J]. 李巖. 職業(yè)與健康. 2015(15)
[3]應(yīng)用fMRI技術(shù)探查靜息態(tài)經(jīng)前期綜合征肝氣郁證患者中樞腦區(qū)定位[J]. 高冬梅,于艷紅,侯艷嬌,劉曉琴,喬明琦. 世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化. 2015(04)
[4]甘草的藥理作用及現(xiàn)代研究進(jìn)展[J]. 張利. 中醫(yī)臨床研究. 2014(10)
[5]基因芯片技術(shù)分析舒郁膠囊對抑郁癥肝氣郁結(jié)證大鼠模型的干預(yù)作用[J]. 徐凱勇,李自發(fā),高杰. 中國藥理學(xué)通報. 2014(03)
[6]柴胡治療肝病有效成分及藥理作用研究進(jìn)展[J]. 沈霞,趙振宇. 生物技術(shù)世界. 2014(02)
[7]γ-氨基丁酸及其受體在經(jīng)前期綜合征情緒調(diào)控中的作用機制研究進(jìn)展[J]. 田溪,張惠云. 醫(yī)學(xué)研究雜志. 2013(09)
[8]舒郁膠囊及其組分抗抑郁機制研究進(jìn)展[J]. 殷慧敏,薛玲. 醫(yī)學(xué)研究雜志. 2013(07)
[9]γ-氨基丁酸治療對哮喘患兒血漿P物質(zhì)和降鈣素基因相關(guān)肽含量的影響[J]. 徐傳偉,郭山春,鄭振文,王慶元. 中國當(dāng)代兒科雜志. 2013(02)
[10]香附化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展[J]. 徐曉婷,鄧志鵬,仲浩,姚慶強. 齊魯藥事. 2012(08)
博士論文
[1]經(jīng)前焦慮性障礙患者腦內(nèi)GABA含量的磁共振波譜研究[D]. 劉波.山東大學(xué) 2015
碩士論文
[1]強迫游泳應(yīng)激誘導(dǎo)經(jīng)前煩躁障礙(PMDD)肝氣郁證大鼠模型的制備以及模型大鼠神經(jīng)遞質(zhì)及其受體的變化[D]. 朱德豪.山東中醫(yī)藥大學(xué) 2016
[2]刮痧配合中藥治療肝郁氣滯型經(jīng)前期綜合征的療效觀察[D]. 張秀娟.廣州中醫(yī)藥大學(xué) 2014
[3]前額皮層和后頂葉皮層神經(jīng)元在識別記憶中的放電特征[D]. 代淑芬.首都師范大學(xué) 2013
[4]PMS肝氣逆大鼠腦區(qū)GAD、GABA-T、GAT-1表達(dá)的變化及藥物干預(yù)影響[D]. 房芳芳.山東中醫(yī)藥大學(xué) 2013
[5]舒郁膠囊及柴胡提取物含藥血清對大鼠海馬神經(jīng)元GABABR2介導(dǎo)的ERK通路和AC/cAMP/CREB通路的影響[D]. 姜英鳳.山東中醫(yī)藥大學(xué) 2012
[6]苯巴比妥對大鼠額葉、頂葉、小腦神經(jīng)元及神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞凋亡的影響[D]. 李凈兵.河北醫(yī)科大學(xué) 2011
[7]中藥新藥治療經(jīng)前期綜合征(肝氣郁結(jié)、脾運失調(diào)證)臨床研究[D]. 謝琪.北京中醫(yī)藥大學(xué) 2004
本文編號:3717038
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